混合物料發酵產物小分子肽的測定

朱長波 王勁松 陳清蟬

(1.武漢爍森生物科技有限公司，湖北荊門 448121；2.荊楚理工學院，湖北荊門 448000)

我國每年產生數億噸的各類糟粕，一方面沒能很好的利用造成巨大浪費，另一方面又從國外進口大量大豆。我們將啤酒糟、白酒糟、味精糟、糖糟等農副產品及工業廢料作為主要原料，以其他農副產品為輔助原料，加上我們的核心菌種，采用現代生物工程技術和酶工程技術，結合微生態理論，通過多菌種混合固體發酵和添加外源復合酶相結合的先進工藝，生產植物源性酶菌功能營養小肽——肽素35。

過去我們只能用單一的凝膠電泳的檢測方法,只能單一的判斷小分子肽分子量的范圍,不能準確的判斷各個分子量段的含量,從而不能準確的判斷我們的發酵產品和別人的產品的差異。為了建立一種科學、可靠和穩定的檢測方法,我們花了10年時間，通過大量的方法實驗證明,Shodex尺寸排阻色譜法是一套比較科學的檢測方法,該方法對確定小分子肽含量的測定準確、可靠。

1 待檢測原料肽素35的原料組成及比例（見表1）

表1 肽素35的組成(%)

2 小分子肽的分離提取

2.1 蛋白質提取

肽素35樣品粉碎，過0．25 mm的篩網，取100 g溶解在水中，定容到1 000 ml，在50℃的振蕩水浴鍋中振蕩提取15 h，得固液混合物。

2.2 蛋白質溶液除雜

提取結束的固液混合物先用紗布粗過濾一次，然后用濾紙細過濾一次，離心（轉速4 000 r/min，20 min）再次除去部分固型雜質。取出上清液體放入冰箱待鹽析。

2.3 鹽析

取800 ml樣品蛋白質溶液，稱取440 g硫酸銨，逐漸加入到蛋白質溶液中，邊加邊攪拌。……