血清低水平HBV表面抗原測定臨床意義探討

摘要 目的：探討低水平血清乙肝病毒表面抗原（HBsAg）的。方法：采用微粒子酶免疫分析技術(shù)對非肝炎病患者886例進(jìn)行乙肝兩對半檢測，包括HBsAg、HBs-Ab、HBeAg、HBe-Ab、HBc-Ab。結(jié)果：HBsAg陽性患者166例濃度在5μg/L以下，占檢測總?cè)巳旱?8.70%。結(jié)合兩對半檢查結(jié)果發(fā)現(xiàn)低水平HBsAg人群主要體現(xiàn)血清學(xué)特征為“HBsAg（+）、HBcAb（+）、HBeAb（+）”和“HBeAg（-）、HBsAb（-）”模式為主（81.81%）。結(jié)論：提高HBsAg檢測靈敏度對于低水平的人群具有重要臨床意義，同時(shí)分析血清學(xué)模式具有一定的意義。

關(guān)鍵詞 抗原 乙肝病毒 免疫

我國是乙肝高發(fā)國家，主要以病毒感染為主，這給我國的健康安全帶來了不小的挑戰(zhàn)，隨著科技的不斷發(fā)展和技術(shù)革命的不斷更新，如何更加快捷、簡便、準(zhǔn)確地分析出低水平抗原表達(dá)的乙肝患者，對其早期診斷治療具有積極的意義。目前對乙肝的診斷仍然以表面抗原HBsAg為主，故此為進(jìn)一步分析和有效檢測，采用微粒子酶免疫技術(shù)對886例非肝炎患者進(jìn)行兩對半檢測，觀察HBsAg 5μg/L以下的患者比例并分析其表達(dá)模式，現(xiàn)研究報(bào)告如下。

資料與方法

2009～2011年入院體檢的非肝炎病患者血清樣本886例。采用微粒子酶免疫技術(shù)進(jìn)行乙肝兩對半（HBsAg、HBs-Ab、HBeAg、HBe-Ab、HBc-Ab）檢測。

設(shè)備材料：免疫熒光分析儀。采用HBsAg試劑盒，根據(jù)國家臨檢中心制定的標(biāo)準(zhǔn)調(diào)整HBsAg檢測靈敏度：HBsAg檢測靈敏度0.23μg/L；1μg/L、2μg/L和5μg/LHBsAg定值參比血清。

方法：①抗原與微粒子單抗結(jié)合；②測抗原再與生物素標(biāo)記二抗結(jié)合組成復(fù)合物，被微粒子包被；③比色皿底部玻璃纖維捕獲上述復(fù)合物，達(dá)到富集的目的；④微粒子復(fù)合物與有HRP標(biāo)記的生物素抗體結(jié)合；⑤熒光底物MUP與HRP發(fā)生作用分解Mu，后者能激發(fā)熒光，根據(jù)速率法檢測熒光強(qiáng)度，計(jì)算含量。

判斷標(biāo)準(zhǔn)：①HBeAg陽性：S/N≥2100；②HBsAg陽性：S/N≥20；③HBc與HBe陽性：S/CO≤1000；對低水平HBsAg（5μg/L）者進(jìn)行中和試驗(yàn)，中和率≥50%確定低水平者為HBsAg陽性。

結(jié) 果

886例患者中檢測出166例患者血清＜HBsAg濃度5μg/L，占總?cè)藬?shù)的187%，其中低于1μg/L 24例，占低水平人數(shù)的145%；1～2μg/L 40例，占低水平人數(shù)的241%；2～5μg/L 102例，占低水平人數(shù)614%。

通過兩對半檢測對其陽性模式進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)低水平HBsAg人群主要體現(xiàn)血清學(xué)特征為“HBsAg（+）、HBcAb（+）、HBeAb（+）”和“HBeAg（-）、HBsAb（-）”模式136人，占所有低水平患者的8193%，“HBsAg（+）、HBc-Ab（+）”124例，占低水平人數(shù)的7470%，“HBsAg（+）、HBsAb（+）”24例（145%）。

討 論

隨著生活水平的不斷提高，人們的健康意識和自我保健意識不斷增強(qiáng)，對于乙肝的重視程度不斷加深［１，2］。目前已經(jīng)有研究指出部分，HBV感染人群其血清HBsAg仍保持很低的水平，采用常規(guī)普通的檢測方法和診斷指標(biāo)，容易導(dǎo)致漏診，因此更加快捷、高效、高靈敏的檢測出低水平HBV感染具有明顯的臨床意義。本研究中采用微粒子免疫熒光分析技術(shù)886例非肝病患者進(jìn)行HBsAg、HBs-Ab、HBeAg、HBe-Ab、HBc-Ab，分析其低水平表達(dá)情況以及低水平患者的常見抗體、抗原表達(dá)模式。以充分認(rèn)識肝炎診斷、進(jìn)一步減少臨床假陽性和假陰性的誤診率。

在本次實(shí)驗(yàn)中一共檢測出5μg/L以下HBsAg陽性患者166名，占總?cè)巳旱?87%，占了較高的比率，說明提高靈敏度檢測的必要性。同時(shí)對其模式進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)低水平的HBsAg陽性患者模式主要以“HBsAg（+）、HBcAb（+）、HBeAb（+）”和“HBeAg（-）、HBsAb（-）”為主占總?cè)藬?shù)的8193%，為臨床治療和評估患者預(yù)后等提供了指標(biāo)參考。在對5μg/L以下HBsAg陽性患者我們進(jìn)一步分析，發(fā)現(xiàn)還存在＜1μg/L者，其比例145%，但其中主要還是以2～5μg/L患者為主（614%），進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了需要提高靈敏度的必要性，以及微粒子法的良好評估作用。同時(shí)對＜1μg/L者進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)“HBsAg（+）、HBs-Ab（+）”者于其重合，與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一致［3］。二者同時(shí)存在的內(nèi)在機(jī)制可能是HBV發(fā)生變異，有待進(jìn)一步探討。總之，低水平HBsAg人群是一個(gè)值得注意的問題，因此在臨床工作中需要進(jìn)一步重視對低水平HBsAg的認(rèn)識。

參考文獻(xiàn)

1 楊守純，陶其敏.我國病毒性肝炎免疫學(xué)檢測史的回顧與展望.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1999，22：275-277.

2 Coursaget P，Yvonnet B，Bourdil C，et al.HBsAg positive reactivity in man not due to hepatitis B virus.Lancet，1987，12：1354-1358.

3 成軍，楊守純，主編.現(xiàn)代肝炎病毒分子生物學(xué).北京：人民軍醫(yī)出版社，1997：278-280.