分光光度法定量測定食品中硼砂

硼砂屬于有毒有害物質，是食品禁用防腐劑。而一些不法生產商為增加食物韌性、脆度、改善食物保水性及保鮮度等，常在一些食物制品中如腐竹、牛肉丸、米粉、河粉、面條等作為膨松劑、防腐劑使用。目前國家食品衛生標準中沒有硼砂定量檢驗方法，曾有食品中硼砂的反相高效液相色譜測定方法等，但液相色譜法儀器昂貴，不易普及［1］。本法利用灰化-姜黃素分光光度法測定食品中硼砂含量，為建立食品中硼砂的定量分析方法提供科學依據。

資料與方法

原理：在酸性溶液中硼砂轉化為硼酸，與姜黃素生成紅色化合物（稱為玫瑰紅花青），分光光度法比色定量。

儀器：723型分光光度計；馬弗爐；恒溫水浴鍋（55±2℃）；恒溫干燥箱；可調電熱板。

試劑：姜黃素-草酸溶液：稱取0.04g姜黃素和5.0g草酸，溶于95%乙醇稀釋至100ml，如果試劑渾濁，應過濾儲存于聚乙烯塑料瓶中，保存于冰箱中；95%乙醇溶液；碳酸鈉溶液（40g/L）；硼酸標準儲備溶液（600.0mg/L）：稱取0.3000g干燥無水硼酸溶于純水，并定容至500ml，儲存于聚乙烯塑料瓶中，此溶液每毫升相當于600.0μg硼酸；硼酸標準使用液（6.0mg/L）：吸取10.00ml硼酸標準儲備液，置于1000ml聚乙烯塑料瓶中，加水稀釋至刻度，此溶液每毫升相當于6.0μg硼酸。

方法：①樣品預處理：在采樣和制備過程中，應注意不使試樣污染；面條、米粉、米皮、肉丸等水分含量較高的樣品，用食品勻漿機打成勻漿，儲存于聚乙烯塑料瓶中，保存備用。②樣品消解：稱取樣品3～5g于瓷坩堝中，加入40g/L碳酸鈉溶液4～5ml，若試樣為酸性，繼續加入碳酸鈉溶液至堿性，置于水浴鍋上蒸干，將瓷坩堝置于電熱板上炭化至無煙后，再置入馬弗爐中，升溫至600℃灰化6～8小時，冷卻。如試樣灰化不徹底，再加入碳酸鈉溶液1ml繼續進行灰化直至灰化完全，冷卻至室溫。加入少量水和10% HCl 5ml攪拌使殘渣溶解，移至100ml聚乙烯塑料容量瓶中定容。③測定：吸取1.00ml樣液，再分別吸取0.00，0.25，0.50，0.75，100ml硼酸標準使用液于同一類型、同一形狀和大小的瓷蒸發皿上，各加純水至1.00ml。分別向盛有樣液和標準溶液的蒸發皿中各加入1.00ml姜黃素-草酸溶液，輕輕旋轉蒸發皿使之混合均勻。置蒸發皿于55℃恒溫水浴鍋上，蒸干后立即取出移至60℃恒溫干燥箱中繼續維持20分鐘，取出置于干燥器中冷卻。用95%乙醇溶解蒸發皿內固體物，并完全移入25ml聚乙烯塑料塑料比色管內，用95%乙醇溶液定容至25ml，混勻，用1cm比色皿，以零管調零，于550nm波長處測定吸光度，繪制標準曲線比較，同時做試劑空白。

計算：X=1.54mV1/MV2。式中：X-樣品中硼砂含量（mg/kg）；m-從標準曲線中查得樣品中硼酸的含量（μg）；M-樣品質量（g）；V1-樣品定容量（ml）；V2-樣品測定量（ml）；1.54-硼酸與硼砂轉換系數。

結 果

最大吸收波長的選擇：按試驗操作方法對標準溶液和樣品進行顯色反應后分別作吸收曲線，兩者均在550mn波長處有最大吸收峰，故選擇550mn為測定波長。

脫水溫度的選擇：按試驗操作方法用含有3.0、4.0、5.0μg硼酸標準分別在30℃、40℃、50℃、60℃、70℃脫水并與顯色劑反應，測定溶液吸光度，在50～60℃時反應的吸光度穩定，故選擇在55℃水浴上蒸干和60℃干燥箱內脫水。

線性范圍：試驗表明，本方法在0～6.0μg范圍內有良好的的線性關系，相關系數r＞0.9995。

最低檢出濃度：本法最低檢出濃度1.56mg/kg。

回收率試驗，見表1。

精密度試驗，見表2。

討 論

實驗器皿的影響實驗時盡量避免使用玻璃器皿，防止玻璃中硼溶出而影響實驗結果，可采用聚四氟乙烯、聚乙烯、鉑金等材料的器皿。

樣品灰化的影響樣品進行灰化前必須確保檢樣為堿性，防止硼砂轉化為硼酸在高溫條件下與水蒸氣一同蒸發，影響結果的準確度。本法采用40g/L碳酸鈉溶液堿化樣品，取得了滿意的效果。

測定波長的選擇有文獻報道540mn［2］，本試驗操作方法表明標準和樣品在550mn波長處有最大吸收峰，且吸光度較穩定，故選擇550mn為測定波長。

測定時比色速度的影響由于本法反應后用95%乙醇溶液溶解和定容的，因此在比色過程中應盡量提高比色速度，防止測定過程中乙醇揮發損失，提高實驗的重現性。

本法利用灰化-姜黃素分光光度法測定食品中硼砂含量，為建立食品中硼砂的定量分析方法提供科學依據。該方法不需要特殊的儀器和設備，有較好的靈敏度和準確度，具有一定的實用價值，且適合基層普通實驗室。

參考文獻

1 陳艷，李紅光.食品中硼砂的反相高效液相色譜測定法［J］.環境與健康雜志，2007，24（12）：994.

2 鄭彬，鄭紅梅.分光光度法測定食品中硼砂［J］.現代預防醫學，2004，3（3）：446.