農藥殘留快速分析儀在蔬菜農殘檢測中的運用

[摘 要] 本文介紹了用酶試劑法對蔬菜中有機磷類農藥殘留進行快速檢測的技術。

[關鍵詞] 酶試劑法 有機磷農藥 農藥殘留 快速檢測

我國土地遼闊，農作物品種豐富，農藥的生產和使用量較大，而農藥對人體、動物和環境的危害很大。食用含有高毒、劇毒的農藥殘留的食物會導致人、畜急性中毒事故，長期食用農藥超標的農副產品，還可能引起慢性中毒，導致人體的神經麻痹以及呼吸系統損傷等，嚴重的甚至影響下一代。因此，加強農藥殘留監測尤為重要。

傳統的農藥殘留分析方法主要有氣相色譜法、液相色譜法、薄層色譜法及質譜聯用等。這些方法測試靈敏、準確度高，但預處理較為煩瑣，測試時間較長，且儀器昂貴，對儀器的使用條件和操作人員的要求也比較嚴格。而農藥殘留快速檢測法可以把食品安全風險監測的關口提前，在蔬菜上市前快速判斷出其農藥殘留是否超標，這樣能防止許多農藥中毒事件的發生，確保消費者的飲食安全。

本文旨在研究用農藥殘留快速分析儀（PR-203-6T）分析農藥殘留，該快速檢測法的優點是檢測時間短、操作簡單，可以連續使用，攜帶方便，而且檢測成本較低， 適合現場檢測，可推廣為普通檢測點、檢測站、農貿市場、超市及果蔬精加工企業接受和使用。

一、試驗原理

農藥殘留快速分析儀采用酶抑制法，膽堿酯酶對底物分解反應的催化能力與其活性成正相關。而蔬菜中的農藥對膽堿酯酶的活性起抑制作用，抑制程度的大小與農藥的殘留毒性成線性相關。因此，通過測試蔬菜樣品與膽堿酯酶作用前后催化反應的速率變化，即可測試膽堿酯酶的活性變化，從而計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機磷類農藥的存在。

二、儀器與試劑

1.儀器

儀器為廈門市信儀科技有限公司生產的PR-203-6T 型農藥殘留快速測試儀。此儀器有四個顯示參數： “透光度”、“吸光度”、“透射比”、和“吸收比”；工作模式有：“單通道” 、“八通道”、“自動”四種，可以根據檢測樣品的數量和類型自行選擇工作模式；顯色時間為1-9分鐘；測試數據可以傳輸到“打印機”或“計算機”。

2.試劑

緩沖液：取一包緩沖劑，溶于500ml蒸餾水，攪拌、溶解、混合后放在室溫下保存。

酶溶液配制：取一瓶膽堿脂酶液，加磷酸緩沖液8ml，4℃保存。

顯色劑配制：取一瓶顯色劑，加磷酸緩沖液25m，4℃保存。

底物液配制：取一瓶底物，加磷酸緩沖液12.5ml，4℃保存。

三、樣品的提取

取蔬菜2～5g（菜葉類2g，塊莖類4g），剪成面積約1cm2大小，放入錐形瓶中，加入磷酸緩沖液10ml，震搖1～2min，然后將提取液到入取樣瓶，靜置2～3min，待測。

四、測試步驟

1.對照測試

在干凈的取樣瓶中依次取0.1ml酶液、2.5ml緩沖液 ，混勻，再加入0.1ml顯色液，搖勻后放于37℃靜置10～15min。在比色皿中加0.1ml底物溶液，再將上述培養后的反應液倒入比色皿中，迅速放入檢測倉中第一檢測通道，按【對照】鍵進行對照測試，一般1～3min。

注意：試樣放入試樣室前應按【100%T/ABSO】鍵使透光度值為100.0或吸光度值為0.000。

2.樣品測試

在干凈的取樣瓶中依次取0.1ml酶液、2.5ml緩沖液 ，混勻，再加入0.1ml顯色液，搖勻后放于37℃靜置10～15min。在干凈的比色皿中加0.1ml底物溶液，再將上述反應液倒入比色皿中，迅速放入檢測通道，按【樣品】鍵開始檢測，一般1～3min。

注意：試樣放入試樣室前應按【100%T/ABSO】鍵使透光度值為100.0或吸光度值為0.000。

3.測試結果的判斷

若被測樣品的酶抑制率超過50%，則表明被測樣品中農藥殘留可能超過安全的界定標準，需用氣相色譜等儀器分析法作進一步的確認。陽性結果的樣品需要重復檢驗2 次以上。

五、討論

1.適宜的反應溫度

酶催化顯色反應吸光度與溫度呈正比，實驗證明，在35℃左右，顯色反應達到最佳。

2.適宜的酸度

隨PH值的增加，反應速率增大，PH值超過7.5后反應速率變化減弱，實驗證明，PH值為8時反應速率最大。

3.合適的搖振時間

充分搖振有利于酶催化動力學反應的進行，若搖振時間太短，則初始反應速率小，檢測靈敏度較低，若搖振時間過長，則初始吸光度較大，所以一般振搖20～30秒。

4.正確的添加順序

酶與待測樣品中的農藥殘留量或底物的反應為可逆反應，由于酶與含有的農藥反應速率比酶與底物的反應速率低得多，所以試劑加入順序對實驗影響較大，先加入酶液，使酶與含有的農藥預反應，然后加入顯色劑，最后加入底物，能達到最佳效果。

5.排除假陽性的干擾

蔥、蒜、蘿卜和一些葉綠素含量較高的蔬菜中，含有的植物次生物質對酶的活性產生影響，容易產生假陽性。樣品提取時緩沖液的用量要是樣品重量數的5 倍。對于蔥，先去掉須根，再把其根部剪掉，再作樣品提取。另外，檢測前，將儀器開機預熱半個小時，可以提高檢測過程的穩定性和準確性，減少假陽性的出現。

參考文獻

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