諾氟沙星膠囊質量標準方法學驗證

摘 要：諾氟沙星膠囊現為上市品種，現依據中國藥典[1]質量標準分析方法驗證指導原則，采用HPLC法測定諾氟沙星含量，對諾氟沙星膠囊質量標準進行方法學驗證，以確認質量標準能夠有效地控制成品質量。

關鍵詞：諾氟沙星膠囊 質量標準 方法驗證

中圖分類號：R284 文獻標識碼：A 文章編號：1672-3791（2013）01（c）-0215-01

1 含量測定分析方法學驗證

1.1 儀器與試劑

儀器：二元梯度液相色譜儀。

試劑：鹽酸（0.1 mol/L），磷酸（0.025 mol/L），三乙胺，乙腈。

對照品：諾氟沙星（中國藥品生物制品檢定所，批號：130450-200705）。

供試品：諾氟沙星膠囊（哈藥集團三精千鶴制藥有限公司，批號20100615）。

1.2 色譜條件

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.025 mol/L磷酸溶液（用三乙胺調節pH值至3.0±0.1）-乙腈（87∶13）為流動相；流速為每分鐘0.8 mL；檢測波長為278 nm。

1.3 對照品溶液的制備

取諾氟沙星對照品25 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加0.1 moL/L鹽酸溶液2 mL使溶解后，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

1.4 供試品溶液的制備

取本品20粒，混合均勻，精密稱取細粉適量（約相當于諾氟沙星125 mg），置500 mL量瓶中，加0.1 moL/L鹽酸溶液10 mL使溶解后，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取5 mL，置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

1.5 測定法

分別精密吸取供試品溶液和對照品溶液各20 uL，注入液相色譜儀，測定，即得。

1.6 系統性適用性試驗

在上述色譜條件下，選用不同型號的色譜柱進行系統適用性考察，結果表明，在選定的色譜條件下，三種長度不同的色譜柱（250 mm，200 mm，150 mm）的理論板數均不低于2000，供試品溶液中諾氟沙星與其它組分分離度良好，滿足含量測定要求。

1.7 專屬性試驗

取不含諾氟沙星的空白樣品，照供試品溶液制備方法制成空白溶液。精密吸取供試品溶液，空白溶液，對照品溶液各20 μl，分別注入液相色譜儀中，在對照品色譜峰相應的位置上，供試品溶液具有相同保留時間的色譜峰，空白溶液在此峰位無吸收，對本制劑中諾氟沙星含量測定無干擾，方法專屬性良好。

1.8 線性試驗

取諾氟沙星對照品50 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加0.1 moL/L鹽酸溶液2 mL使溶解后，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，制成每1 mL含諾氟沙星50 μg的溶液，分別精密吸取8 μL、9 μL、10 μL、11 μL、12 μL對照品溶液，測定。以諾氟沙星進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標做回歸曲線，得回歸方程為Y=4984531.373X +2293999.4，r=0.9996。由結果可見，諾氟沙星進樣量在0.4 μg～0.7 μg之間線性關系良好。

1.9 精密度試驗

精密吸取濃度為25 μg/mL的諾氟沙星對照品溶液20 μL，注入液相色譜儀中，測定色譜峰面積，重復進樣6次，RSD（%）=0.4由結果可見，測定方法精密度良好。

1.10 重復性試驗

取諾氟沙星膠囊樣品（批號：20100615），照含量測定項下方法，在同一實驗室由同一人進行含量測定，重復6次。結果見表1。

由結果可見，測定方法重復性良好。

1.11 供試品溶液穩定性試驗

取諾氟沙星樣品（批號：20100615），制成供試品溶液，照上述含量測定項下方法，分別于0、2、4、6、8小時進行含量測定，供試品溶液在8小時內穩定性良好，含量測定應在8小時內完成。

1.12 回收率試驗

取諾氟沙星膠囊樣品（約相當于諾氟沙星出65 mg）g（批號：20100615，平均裝量為：0.1921 g，已知諾氟沙星含量為99.5%），精密稱定，精密加入諾氟沙星對照品60 mg，照含量測定項下方法進行含量測定，重復6次。結果見表2。

由結果可見，回收率在95%～105%之間，RSD值為0.9%。測定方法回收率良好。

2 試驗結論

綜合以上數據，按照藥品檢驗標準操作規范[2]測定，可以得出在選定的色譜條件下，諾氟沙星與相鄰組分分離度良好，空白溶液無干擾，方法學研究表明，質量標準中含量測定方法的專屬性，線性，精密度、重復性、穩定性、回收率均良好，含量測定方法能夠有效地控制成品的諾氟沙星含量。

參考文獻

[1] 中華人民共和國藥典[M].化學工業出版社，2010，二部.

[2] 中國藥品檢驗操作規范[S].中國醫藥科技出版社，2010.