無創性產前基因診斷樣本及其分析技術研究進展

1.孕婦外周血中的胎兒細胞 1893年德國病理學家Schmorl在死于子癇的產婦肺循環中發現滋養葉細胞， 首次證實孕婦外周血存在胎兒細胞。孕婦外周血中胎兒細胞數量極少，平均1個/ml，不同的孕周及不同的個體之間有較大差異[1]。胎兒細胞與母體細胞之比為1∶5000～20000，其中胎兒有核紅細胞的比例在1/105～1/109之間。孕婦外周血中的各種胎兒細胞具有不同特性。滋養層細胞在外周血中數量不多亦不恒定；合體滋養細胞具有多核特性及嵌合體核型（發生率約1%），會干擾遺傳學分析，但其仍是除胎兒有核紅細胞（FNRBC）外的第二候選細胞；胎兒淋巴細胞因其出現的時間（孕14周）較晚、數量極少（僅為有核紅細胞的0.1%）、在母血中長期存在、存活時間長，與母體的淋巴細胞表面無本質差別等原因，使其在產前診斷中的應用受到明顯的限制；胎兒粒細胞的分離及應用的報道卻很少見；胎兒有核紅細胞（FNRBC）自孕6周開始持續存在于孕婦外周血中直至分娩，而正常未孕婦女外周血中幾乎無有核紅細胞（NRBC），其含有胎兒基因的全部遺傳信息，是目前公認的用于產前診斷的最佳細胞類型，主要理由為：①數量較多：孕11周時約占胎兒血液全部紅細胞的10%；②自孕6周開始孕期全程均可被檢測到，而正常成人外周血中成人有核紅細胞罕見[4]；③FNRBC在孕婦母血中的平均壽命約90天，最長在產后5天就被清除，用于當次妊娠的產前診斷不受既往妊娠的干擾；④含有胎兒基因完整的遺傳信息，為單核的細胞，可以應用FISH技術進行染色體的核型分析等；⑤FNRBC細胞的大小、顆粒以及細胞表面具有的一些特異性標志物如轉鐵蛋白受體（CD71）等，可作為細胞篩選的根據。