牛蒡子的提取工藝優(yōu)化研究

[摘要] 目的 優(yōu)化牛蒡子的提取工藝。 方法 采用L9（34）正交實驗設計法，考察溶劑濃度、溶劑用量、提取次數(shù)的醇提工藝因素，每個因素3個水平，通過HPLC法檢測牛蒡子苷含量。 結果 牛蒡子的最佳醇提工藝為，溶劑濃度為75%，溶劑用量為6倍體積，提取次數(shù)為 1次。結論 牛蒡子的最佳提取工藝為牛蒡子粉末，加入6倍量體積75%乙醇提取 1次，提取時間為2h，牛蒡子苷的提取率達到95.49%，可以作為牛蒡子的實驗室提取方法。

[關鍵詞] 正交設計；牛蒡子；工藝

[中圖分類號] R284.2 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2013）02-54-02

牛蒡子是菊科植物牛蒡 Arctium lappa L.的干燥成熟果實。果實含牛蒡甙（Arctiin），水解生成牛蒡甙元（Arctigenin）。另含脂肪油（半干性油） 25%～30%，為軟脂酸、硬脂酸、油酸、亞麻油酸的甘油酯。近來從種子中分離出7種木脂素類化合物牛蒡酚（Lappaol）A，B，C，D，E，F(xiàn)，H[1-2]。其中牛蒡子苷為其主要成分。牛蒡子的常用提取方法有兩種：水煎煮法和醇提法[3-4]。本研究對醇提法工藝的影響因素進行系統(tǒng)性考察。優(yōu)化牛蒡子醇提法的工藝條件，為牛蒡子有效成分的提取和制備提供參考。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀Agilent（1100），旋轉蒸發(fā)儀（RE-52AA型，上海亞榮生化儀器廠）；循環(huán)水式真空泵（SHZ-D-III），牛蒡子苷對照品由中國藥品生物制品檢定所提供，牛蒡子藥材購自同仁堂藥材公司。所有試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 方法

2.1.1 提取方法 采用L9（34）正交試驗設計方法對牛蒡子的醇提工藝進行優(yōu)化。對溶劑濃度，溶劑用量，提取次數(shù)3個因素進行考察，每個因素3個水平。因素水平見表1。

2.1.2 樣品制作 將牛蒡子粉碎成粉末，過三號篩，提取時間為2 h。按照L9（34）正交試驗表見表。分別制備平行樣品，過濾，濃縮至樣品含量為每毫升含0.5 g牛蒡子，精密吸取各實驗樣品1 mL，揮干，甲醇定容，搖勻，濾過，待HPLC測定[5]。

含量測定方法：色譜柱：Kromasil C18 （250 mm×4.6 mm，5μm，Sweden）；流動相：甲醇-水（65∶35）；流速：1.0 mL/min，檢測波長280 nm。進樣量：20μL[6]。

2.2 方差分析結果

A、B兩因素對于醇提工藝的影響較為顯著，確定了溶劑濃度為75%，溶劑倍數(shù)為6倍。但C因素對于醇提工藝無顯著性影響，為了節(jié)省實驗成本，確定提取次數(shù)應取最小值為1次。因此本實驗范圍的工藝優(yōu)化條件為A2B2C1。見表3。

2.3 驗證實驗

根據工藝優(yōu)化的最優(yōu)條件，取3份藥材進行平行提取，并對樣品進行濃縮，揮干，按照上述處理方法進行含量測定，計算平均提取率為95.49%，符合實驗要求。見表4。

3 結論

牛蒡子的主要成分為牛蒡子苷，在其提取工藝中多為醇提工藝。因此本研究通過對牛蒡子的醇提工藝進行優(yōu)化，對溶劑濃度，溶劑用量，提取次數(shù)三個因素的3個水平進行考察。采用正交試驗設計方法，對提取物處理后，進行HPLC法測定，根據得出的提取率，進行方差分析得出醇提工藝的最優(yōu)條件。由于A、B兩因素的顯著性影響，確定了溶劑濃度為75%，溶劑倍數(shù)為6倍。但C因素對工藝無顯著性影響，以節(jié)省實驗成本為基準，確定提取次數(shù)確定為1次。最后確定牛蒡子的醇提最優(yōu)工藝為：75%乙醇按6倍量提取1次。按照最優(yōu)工藝條件對工藝進行驗證，最終平均提取率高達95.49%，符合實驗要求。綜上所述，牛蒡子的最佳醇提工藝為A2B2C1，即牛蒡子粉末，加入6倍量體積75%乙醇提取 1次，提取時間為2 h。

藥材提取前要加以粉碎，其目的是加大牛蒡子與溶劑的接觸面積，以提高提取效率。在提取過程中由于乙醇具有較高的揮發(fā)性，因此溶劑量在反應過程中與加入量會有較大差距。因此如果大量提取牛蒡子苷，應采用冷凝回流提取。在濃縮過程中注意溫度不易過高，因為高溫會對牛蒡子苷的化學結構產生一定的破壞，從而影響其作用效果。本研究對牛蒡子的提取工藝優(yōu)化后，為牛蒡子在新制劑的開發(fā)提供一定的理論依據。

[參考文獻]

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[3] 王小琳，張玉杰，石任兵.正交實驗設計優(yōu)選牛蒡子的提取工藝[J].北京中醫(yī)藥大學學報，2003，26（4）：64-65.

[4] 王勁，史輯，康延國，等.均勻設計法優(yōu)化牛蒡子中牛蒡苷的提取工藝[J].中藥材，2004，27（2）：127-130.

[5] 鞠玫君，竇德強，康延國. 牛蒡子提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量測定研究[J].中國現(xiàn)代中藥，2008，10（2）：14-17.

[6] 侯薔，竇德強，康延國.牛蒡子水解后牛蒡苷元的含量測定[J].中國現(xiàn)代中藥，2011，13（5）：18-19.

（收稿日期：2012-12-18）