血小板減少及血液中微粒檢驗的研究進展

[摘要] 當患者發生血小板減少時，各種血細胞分析儀對血小板的計數準確性會存在一定的差異，檢驗參考方法以及血涂片均具有十分重要的意義。同時，對血液中的微粒進行檢測，在血栓的形成的生理、病理過程中，具有十分重要的意義。筆者對血小板減少以及血液中的微粒的檢驗結果的研究情況進行分析，探討血小板減少和血液中微粒的臨床檢驗現狀。

[關鍵詞] 血小板減少；微粒；檢驗

[中圖分類號] R558+.2 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2013）02-42-02

血小板是血液成分中最小的成分細胞，主要的作用是參與機體的止血和凝血。隨著醫療研究的不斷發展，發現血液中的微粒與血栓的形成也具有重要作用。對患者的血小板以及血液中的微粒進行準確檢測，對血栓性疾病以及止血具有十分重要的臨床意義[1]。筆者對近幾年國內外關于血小板減少以及血液中微粒的臨床檢驗情況作如下綜述，對血小板減少以及血液中微粒的臨床檢驗結果進行分析。

1 血小板減少的檢驗情況

對于由于疾病或者放化療導致的血小板減少，需要精確地進行血小板計數。目前普遍的觀點認為，如果血標本采集情況滿意，并且使用原理為阻抗法以及光散射法的血細胞分析儀檢測得到的血小板計數達到50×109/L以上，則說明血小板計數結果基本可靠。如果患者的血小板計數更低，由于血液內存在非血小板顆粒（NPPS），則需要考慮檢測結果的可信度。血液中的非血小板顆粒主要為紅細胞碎片，并且體積與血小板體積十分相近，或是為白細胞死亡后的殘骸、血液中的免疫復合物以及小體積的細菌等。在某些嚴重的血小板減少癥患者血液檢測時，非血小板顆粒的數量有時會高于血小板計數，自動化細胞分析儀可能將非血小板顆粒當成血小板進行計數，從而導致血小板計數檢測結果的假性增高，會對檢驗結果的臨床應用造成十分嚴重的影響[2]。

1.1 血小板計數的比較

有學者對正常人群和血小板減少的白血病患者的血小板計數進行對比性研究，將正常人群的血液樣本稀釋到血小板計數為（30～50）×109/L的范圍之內，同時抽取血小板計數30×109/L以下的白血病患者，同時使用四種不同原理的血細胞分析儀對血標本的血小板進行計數，包括二維光散射法、阻抗法+鞘流、光散射法以及阻抗法。研究結果顯示，對于正常人群的血標本，四種儀器的檢測結果的精密度十分良好，CV值為4.6%～9.5%。檢測結果與草酸銨參考方法相比，具有很好的一致性。但對于血小板減少的白血病患者的血標本，根據光散射法以及阻抗法的血細胞分析儀的血小板計數結果則存在十分明顯的偏差，只有二維光散射法的血小板計數結果與與草酸銨參考方法具有很好的一致性。說明血小板減少癥的患者的血液樣本中存在異質性[3]。二維光散射法與傳統的一維系統比較，具有更高的準確度，對血液中的非血小板顆粒具有更好的鑒別能力。有學者在對基于阻抗法+鞘流、光散射法以及阻抗法等原理的血細胞分析儀進行血小板計數的研究時，發現如果使用一維系統進行血小板計數，則會由于血液標本中存在非血小板顆粒對造成血小板計數的檢測結果發生明顯偏高的情況，但都會有系統警示的提示。因此，在應用上述原理的血細胞分析儀進行血小板檢測，并且檢測結果為30×109/L以下，系統發出警示信號時，則需要使用參考方法進行結果的校準，包括流式細胞儀分析法以及草酸銨法。隨機醫療設備的不斷發展，近年來最新推出的血細胞分析儀在進行血小板計數時，精確性得到了明顯的改善，在血小板減少時，仍然可以得出比較準確的檢測結果[4]。

1.2 血液涂片在血小板計數中的鑒別

急性白血病等患者的血液中存在大量的細胞碎片、偽足的脫落以及胞漿的撕裂等，均會對患者的血小板計數結果造成干擾[2]。有學者研究使用血液涂片法對急性白血病患者的血液中的血小板以及非血小板顆粒進行計數，發現有55%左右的患者的血液中存在假性的血小板，并且與參考方法草酸銨法進行對比確認[5]。其中最主要的非血小板顆粒為惡性細胞的漿質體，在鏡下比血小板染色要深，因此，當患者使用自動化血細胞分析儀檢測的血小板計數結果與患者的臨床表現或者與參考方法的檢測結果存在明顯的不符時，可以通過血涂片法進行檢查，通過形態學進行鑒別[6]。

2 血液中微粒的檢驗情況

在人體的血液中，含有許多細胞來源的各種微粒，并且在患者的不同狀態時，微粒的成分以及數量也各不相同。研究血液中的微粒，對止血的生理和病理過程、血栓疾病的診斷和治療具有重要的意義[7]。

2.1 血小板微粒

當患者的血管壁發生損傷，血小板會粘附于損傷處，或者血小板受到誘導劑以及高切應力作用而發生活化時，則會通過出芽的方式釋放，或者偽足的撕裂而產生血小板微粒，血小板微粒的表面磷脂可以促進患者的凝血功能，因此普遍認為血小板微粒與患者血管受到損傷時的止血有密切的關系[8]。多種血栓性疾病以及疾病的并發癥，可以導致患者循環中的血小板微粒明顯增高[9]，但發生的原理尚不清楚；最近有學者提出血小板微粒可以導致微循環的細胞應答，因此已經近年來的研究熱點。血小板微粒的體積非常小，因此只能通過電子顯微鏡去觀察其形態，同時由于血小板微粒中富含許多種血小板膜糖蛋白，因此可以使用免疫學方法進行識別[10]。

2.2 內皮細胞微粒

殷冬梅等[5]學者對全身性脈管炎患者、發熱患者以及健康志愿者的血液中的內皮細胞微粒進行檢測，發現全身性脈管炎患者血液中的內皮細胞微粒含量明顯高于發熱患者以及健康志愿患者，因此內皮細胞微粒可以作為內皮細胞活化的指標，同時還可以作為與脈管炎相關的血管損傷的生理、病理依據[11]。在冠狀動脈病變中，血管內皮的損傷起到了十分重要的作用，因此，可以內皮細胞微粒可以用來對冠心病患者發生血管內皮損傷的評價指標。

2.3 表達組織因子的微粒

有學者對來源于心臟外科手術治療患者的心包血以及健康人員的靜脈血中進行微粒的分離，并使用流式細胞術對微粒的數量、來源以及TF表達狀態進行分析[12]；同時在體外使用纖維蛋白試驗進行微粒促凝作用的研究，研究表明，患者和健康人群的表達組織因子的微粒比較，無明顯的差異[13]。

3 討論

血液系統疾病中，出血以及血栓是臨床上最多見的并發癥，也是血液病患者的主要死亡原因之一[14]。人體血液中的血小板微粒以及其他各種微粒在止血性疾病或者血栓性疾病的發病原則以及臨床上的診治中起著重要的作用[15]。雖然隨機儀器設備的精確度越來越高，但在必要時，還需要使用血涂片法進行復查[16]。

綜上所述，目前對于血液中微粒的研究還處于初級階段，隨著醫學的不斷進步，血液中微粒的研究必將成為一個新興的研究領域。

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（收稿日期：2012-12-10）