HPLC法測定復方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚的含量

[摘要] 目的 建立測定復方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚含量的方法。 方法 采用HPLC法，C18柱（6.0 mm×200 mm，5μm）；流動相為磷酸鹽緩沖液（0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液，用磷酸調節pH至3.4）-甲醇-三乙胺（80︰20︰0.02）；檢測波長為254 nm。 結果 對乙酰氨基酚在11.43～114.30μg/mL濃度范圍內線性關系良好（r=0.999 7），平均回收率99.21%，RSD=0.87%。 結論 本方法簡便、準確，重現性好，可用于復方氨酚烷胺片的質量控制。

[關鍵詞] 高效液相色譜法；復方氨酚烷胺片；對乙酰氨基酚；含量

[中圖分類號] R927 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2013）02-102-02

復方氨酚烷胺片為復方制劑，為感冒用藥類非處方藥藥品。適用于緩解普通感冒及流行性感冒引起的發熱、頭痛、四肢酸痛、打噴嚏、流鼻涕、鼻塞、咽痛等癥狀。本品不宜與氯霉素類、巴比妥類等并用。國家藥品標準WS1-XG-015-2002所記載的復方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚含量方法為永停滴定法。容量分析最大缺點是誤差較大，結果不準確。作者通過篩選多種色譜體系，建立了HPLC法測定復方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚的含量，方法簡單可靠，可用于復方氨酚烷胺片的質量控制。

1 儀器與試藥

UVIKON紫外分光光度計（法國），METTLER電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司），HP1100高效液相色譜儀（美國安捷倫）；HP1100化學工作站，Agilent G1313ALS自動進樣器；對乙酰氨基酚對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號100018-200408，供HPLC含量測定、比色檢查用，使用前不需干燥處理）；復方氨酚烷胺片（長春海外制藥集團有限公司，批號：20120403；吉林省吳太感康藥業有限公司，批號：1112039；安徽三精萬森制藥有限公司，批號：20120502）；三乙胺為分析純，水為純凈水，甲醇為一級色譜純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱Diamonsil-C18柱（6.0 mm×200 mm，5 μm）；流動相：磷酸鹽緩沖液（0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液，用磷酸調節pH至3.4）-甲醇-三乙胺（80︰20︰0.02）；檢測波長254 nm；流速為1.0 mL/min；進樣量：20μL；柱溫：30℃[1]。

2.2 對照品溶液的制備

用天平精密稱取對乙酰氨基酚對照品0.114 3 g，置500 mL容量瓶中，加流動相適量溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品儲備液，濃度為228.60μg/mL的溶液。量取上述溶液25 mL，置50 mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻即得對照品溶液[2]，濃度為114.30μg/mL。

2.3 供試品溶液的制備

取樣品10片，稱定，計算平均片重，研細，精取細粉（約相當于對乙酰氨基酚300 mg），置100 mL容量瓶中，加流動相適量溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精取續濾液，用流動相定量稀釋成約含對乙酰氨基酚約100μg/mL，即得供試品溶液[3-4]。

2.4 陰性對照試驗

分別取已經制備好的對乙酰氨基酚對照溶液、供試品溶液和陰性溶液，按照2.1項下的色譜條件，分別準確進樣20μL，考察本系統的適用性。見圖1。

2.5 線性關系的考察

精密量取對照品儲備液5.0、10.0、15.0、20.0、25.0 mL，分別置25 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。按照2.1的色譜條件進樣，結果對乙酰氨基酚在11.43～114.30μg/mL范圍內線性關系良好。以對照品進樣量（μg）為橫坐標，以峰面積為縱坐標，計算線性回歸，得回歸方程：Y=45 039.13X+2 013.5，r=0.999 7（n=5）。

2.6 精密度試驗

精密吸取線性關系考察項下中間濃度的對照品溶液，重復5次進樣，分別測定色譜峰的峰面積，RSD為0.91%，本法精密度良好[5-6]。

2.7 重復性試驗

取同一批次的樣品，按照“2.3”項下方法制成供試品溶液后，重復進樣6次，按照上述色譜條件測定峰面積，RSD為0.95%。該方法的重現性良好。

2.8 穩定性試驗

取重復性試驗所用的供試品溶液，分別于放置0、4、8、12、16、20、24 h之后，取20μL進樣，然后測定色譜峰的峰面積，RSD為0.87%。說明供試品溶液在24h內基本穩定。

2.9 加樣回收率試驗

取長春海外制藥集團有限公司（批號：20120403，含量252.18mg/片）6份，精密稱定后，分別加入對照品28.18 mg，按照上述色譜條件測定，結果本法平均回收率為99.21%，RSD為0.87%，表明本法回收率的重現性較好。見表1。

2.10 測定樣品中對乙酰氨基酚的含量

分取實驗用樣品各10片，精密稱定，研細，精密稱取細粉適量（約相當于對乙酰氨基酚300mg），按照2.3項下的方法制備樣品溶液，分別準確吸取20 μL，按照2.1項下色譜條件，以峰面積計算，結果見表2。

3 討論

當選用濃度較高的磷酸二氫鉀溶液時，與甲醇混合易產生渾濁，經多次試驗，選用0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液時，出峰時間和峰形均滿意。

對照品溶液在200～400 nm范圍內，作掃描圖譜，進行峰檢測，分析圖譜，發現對乙酰氨基酚在254 nm波長處有最大吸收，故選用該波長為檢測波長。

該方法實驗結果證明，雜質和輔料對復方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚的含量測定幾乎無影響，陰性對照無干擾，結果準確，可用于復方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚的含量測定。

[參考文獻]

[1] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典（二部）[S].北京：中國醫藥科技出版社，2010：附錄ⅤD：29-31.

[2] 蘇彥文，張鳳榮，蘇彥斌.HPLC法對二種復方氨酚烷胺制劑中對乙酰氨基酚含量測定[J].吉林化工學院學報，2012，7（29）：27-30.

[3] 黃曉霞.復方氨酚烷胺膠囊中有效成分的薄層色譜鑒別研究[J].醫學信息，2010，5（11）：3390-3391.

[4] 徐連明，嚴令耕.HPLC法測定復方氨酚烷胺膠囊中對乙酰氨基酚和咖啡因的含量[J].黑龍江醫藥，2009，22（5）：596-597.

[5] 周岐勛，李健和，徐幸民.高效液相色譜法測定鹽酸甲氯芬酯分散片含量及有關物質[J].中國當代醫藥，2009，16（4）：73-76.

[6] 許建平.HPLC法測定布洛芬膠囊的含量[J].中華中西醫學雜志，2010，3：6-7.

（收稿日期：2012-09-26）