腎虛證模型及其腎虛證治療進展

馮曉芬，吳 華，殷紅光，陳志芳，沈世林

(1.甘肅省第二人民醫院，甘肅蘭州730000;2.蘭州大學第一醫院，甘肅蘭州730000)

中醫學認識治療疾病的出發點為“證”，腎藏精，與機體的生長發育、衰老和生殖密切相關。如何科學的從微觀上對腎虛進行客觀化、定量化，是現代中醫研究的觀點之一。筆者就腎虛本質的研究，綜述如下。

1 “恐傷腎”腎虛模型的研究

“恐傷腎”是中醫病因學上的認識，“驚則氣亂”“恐則氣下”。《素問·舉痛論》云：“余知百病生于氣也……恐則氣下……恐則精卻，卻則上焦閉，閉則氣還，還則下焦脹，故氣下行矣?！笨譃槟I志，恐則氣下，恐則精卻，恐懼過度可導致腎精虧虛。腎失藏精功能即為腎精虧虛證，也是腎虛證。腎精虧虛是以生長發育遲緩、早衰，以及生殖功能低下為特征，表現為腰膝酸軟無力，行動遲緩，健忘、智力低下，身體萎弱，生殖功能下降等。在上述理論指導下，沈雁等［1］建立了驚恐傷腎致腎虛動物模型，進行了有關“恐傷腎”病理機制的研究。觀察了3種不同類型的“恐傷腎”動物模型后發現，驚恐對小鼠、貓和狗的睪丸、腦垂體等組織在形態上均有不同程度的損傷。電鏡掃描證實，小鼠的睪丸精子成熟過程受阻，腦垂體促性腺激素細胞等均有胞漿內細胞器變性，及細胞核固縮、溶解、壞死等表現。由此認為，“恐傷腎”的病理形態學改變主要在垂體-性腺軸。其后，王米渠等［2-3］以貓嚇鼠的方法，對“恐傷腎”動物，及其子代的動物行為、免疫水平、內分泌等方面進行了研究。在對“恐傷腎”動物子代的行為學研究中證實，如空地測試、懸掛尾測試和下滑繩測試“恐傷腎”組與正常組對比，體力活動(作強)行為顯著降低。王米渠等［4］在對“恐傷腎”致腎虛小鼠紅細胞免疫功能研究中發現，“恐傷腎”小鼠的紅細胞免疫功能低于正常組，胸腺和脾臟的質量減輕。同時王米渠等［5］在神經內分泌研究中發現，恐傷孕鼠后的子一代腎虛鼠下丘腦神經細胞數量明顯減少，腎上腺皮質厚度變薄，腎上腺皮質球狀帶等細胞可見胞漿內疏松空殼。認為孕鼠受到驚嚇后，對于子一代的3個層次均有不良影響，尤其是神經內分泌系統。在上述研究基礎上，使得“恐傷腎”、腎精不足的本質有了比較明確的認識，主要是下丘腦-垂體-性腺軸的病理改變導致的內分泌紊亂。馮新玲等［6］使用恐傷孕鼠觀察對其仔鼠大腦海馬區組織形態學和血清甲狀腺激素含量的變化，以探求腎虛腎精不足對腦發育的影響。研究證實：恐傷孕鼠可以導致仔鼠腎虛，腦組織結構出現異常引起腦發育障礙，其機制可能與血清甲狀腺激素含量下降有關，通過補腎治療后可明顯改善。有研究證實，應激可導致機體神經內分泌系統的功能紊亂［7］。柯江維等［8］探討雌性大鼠心理應激狀態下，卵巢卵泡刺激素受體(FSHR)、黃體生成素受體(LHR)的變化，證明心理應激雌性大鼠卵巢FSHR表達上升、LHR表達下降，說明嚴重心理應激狀態，可以引起卵巢內分泌功能失調。現代醫學研究認為，“腎”與下丘腦-垂體-性腺軸的功能狀態密切相關，其中心定位于下丘腦，類似于神經內分泌免疫網絡系統功能失調［9］。王建紅等［10］采用心理應激方法建立大鼠卵巢內分泌功能減低模型，證實模型大鼠動情周期紊亂、血清E2、P水平、腎上腺抗壞血酸含量明顯降低;垂體、卵巢、子宮質量明顯降低;卵巢形態學變化明顯，認為這是一種可行的卵巢內分泌功能降低的動物模型。

綜上所述，從中醫學的七情氣機理論出發，驚恐應激是一個漸變的過程。急性應激反應是“驚則氣亂”的急性階段，逐漸向“恐則氣下”慢性應激狀態轉變，驚恐可以傷及腎氣，久則傷精。研究表明：“恐傷腎”致母鼠先天腎精不足后引起后代鼠行為能力下降，生長發育遲緩;恐傷孕鼠，可以導致仔鼠腦超微結構發生改變，經補腎治療后明顯好轉。因此，通過驚恐應激反應建造的腎精不足證動物模型可以作為腎主生殖的研究模型。

2 中醫學的腎與下丘腦-垂體-性腺軸功能系統

中醫理論中的腎-沖任-天癸-胞宮理論，與現代醫學中下丘腦-垂體-卵巢軸功能表現極為相似。補腎填精藥作用于下丘腦-垂體-卵巢軸系統，可調整其功能而發揮正常作用。李超荊［11］研究認為：調節腎的陰陽能調節雌激素水平，改善卵巢功能、促進排卵，補腎促排卵的作用環節可能主要在下丘腦。沈皓等［12］發現：滋補腎陰中藥可顯著抑制下丘腦促性腺激素釋放激素(GnRH)合成與釋放，而溫腎填精藥則顯著促進下丘腦GnRH合成與釋放，提示下丘腦 Gn-RH分泌水平異常增高與腎陰虛證密切相關，而其功能異常降低則與腎陽虛證相關。蔣淑君等［13］發現：腎陽虛大鼠下丘腦-性腺軸鈣調蛋白(CaM)mRNA明顯升高，淫羊藿總黃酮能顯著降低下丘腦-睪丸組織(CaM)mRNA水平，提示下丘腦-性腺軸異常是腎虛證形成的重要機制之一。沈自尹［14］認為：腎陽虛的調控中心定位在下丘腦，而且補腎藥對外周效應器官有廣泛的直接調節作用。通過腎陽虛的研究，補腎藥能特異地提高下丘腦的關鍵性功能——促腎上腺皮質激素釋放激素的表達，從而發揮下丘腦調節神經內分泌免疫功能網絡的作用。陳健安等［15］證實：六味地黃湯能夠升高黃體生成素(LH)、睪酮(T)的濃度，并能降低卵泡刺激素(FSH)的濃度，而對雌二醇(E2)濃度無影響。同時對大鼠的垂體、精囊有增重作用，并能增加垂體LH細胞的數量，并改變其形態結構;使垂體FSH細胞數量減少，對睪丸無增重作用，但能夠改善睪丸間質細胞及曲細精管的結構。認為六味地黃湯治療生殖功能減退的機理，為作用于下丘腦-垂體-性腺軸系統各個層次的綜合效應。陸煒等［16］研究證明：不同補腎中藥可通過改變垂體GnRH受體，及其mRNA表達水平，調節下丘腦-垂體-性腺軸的功能。歸綏琪［17］采用補腎法治療雄激素致不孕證結果表明：補腎中藥能使大鼠卵巢質量增加、黃體數目增多、卵泡顆粒層增厚，促進卵細胞成熟并排卵，使黃體孕酮受體轉為陽性;同時促進垂體、卵巢、腎上腺的異常組織構造的逆轉，使激素分泌恢復正常?？梢娧a腎法既能調節性腺軸，又能調節腎上腺皮質功能，形成對生殖功能的調節作用，進一步體現了中醫的整體觀念。

以上研究表明：腎虛導致下丘腦-垂體-性腺軸的不同環節、不同程度的功能紊亂，采用補腎填精治療可協調腎陰腎陽的平衡，調整機體激素水平，說明中醫“腎”與現代神經內分泌之間有著極大的相似性。

3 腎虛證與對紅細胞免疫功能的影響

紅細胞免疫由Siegel于1981年提出，認為紅細胞不僅具有運送呼吸氣體的功能，而且還具有免疫功能。紅細胞的免疫黏附作用可以影響到機體的許多免疫反應［18］。中醫學有“腎主骨，生髓，藏精”“血為精所化”“骨者髓之府”，以及“骨髓堅固，氣血皆從”(《素問》)的觀點。說明腎、髓、血三者之間的密切聯系，骨、髓與造血有直接的關系。骨髓藏之于骨，為腎所主，腎之功能強弱與否可以影響骨髓生精造血?！端貑枴酚钟小案尾匮薄澳I生骨髓，髓生肝”，以及“脾統血”之說，認為心、肝、脾胃、腎等臟腑和氣都與造血有關，其中以肝腎之關系最為密切。

王米渠等［4］以貓恐嚇小鼠建造了“恐傷腎”的模型，觀察對紅細胞免疫黏附功能和免疫器官質量的影響，發現“恐傷腎”組小鼠的紅細胞免疫功能低于正常組，胸腺和脾臟的質量減輕，證實“恐傷腎”既能降低機體紅細胞免疫系統的功能，也能抑制免疫器官的發育。吳玲霓等［19］研究證實：腎陽虛動物模型的胸腺和脾臟超微結構均有明顯破壞，經補腎治療可以顯著改善腎陽虛動物被破壞的組織結構，認為免疫器官超微結構的破壞可能是腎陽虛證的病理表現之一。孟憲麗等［20］觀察到淫羊藿復合脂質體可顯著對抗腎虛動物模型的體質量、脾質量下降，提高動物的紅細胞C3b受體花環率(RBC-C3bRR)和紅細胞免疫復合物花環率(RBC-ICRR)，改善其調節因子的活性，增強T淋巴細胞的免疫活性。廖品東等［21］認為：保真丸可能通過直接興奮紅細胞膜上的C3b受體來增強其免疫黏附活性，而免疫黏附活性的提高不但有助于紅細胞清除免疫復合物，還對防治感染、抗癌及延緩衰老有所幫助，這可能是保真丸具有廣泛臨床效應的主要原因。而減少細胞膜上覆蓋的免疫復合物，則可能是金匱腎氣丸在臨床上對多種免疫復合物疾病有效的機制之一。李文雄等［22］對腎虛證患者的紅細胞免疫功能進行了研究，檢測指標為腎虛患者與健康者紅細胞C3b受體酵母菌花環形成率。證實成年腎虛證患者酵母菌花環形成率，顯著低于健康人;而在不同年齡的健康人群中，花環率亦呈現青年組高于中年組，中年組高于老年組的趨勢。廖品東等［23］還觀察了腎虛證患者紅細胞免疫黏附活性在24 h不同時間的變化，腎虛證患者免疫黏附活性不僅較正常人明顯降低，而且其節律也發生了異常變化。證明腎虛證患者的紅細胞免疫功能下降，而且人體腎中精氣的盛衰與紅細胞C3b受體酵母菌花環成花率的高低有著正相關，紅細胞C3b受體酵母菌花環成花率可能成為診斷腎虛證的一項客觀指標。

紅細胞具有識別、黏附、濃縮、殺傷抗原，清除可溶性免疫復合物(CIC)等多種免疫功能，是機體免疫系統的重要組成部分。紅細胞來源于骨髓造血干細胞，與骨髓的造血功能有關。腎中精氣虧損，無以充骨生髓，化血資血，必然影響到紅細胞的生成和功能。經過補腎生血藥治療后，上述指標明顯回升，因此腎生髓是補腎生血藥發揮作用的理論基礎。腎精充足，髓海充盈，則促進了腎生髓的能力，進而增強了紅細胞免疫功能?？梢娔I藏精生髓，血為精所化，精、血、髓三者同源的理論重要性。

4 腎虛與免疫功能

腎主生髓，免疫活性細胞來源于骨髓;腎氣與造血功能的強弱，關系到免疫細胞的發生和分化，進而影響免疫功能強弱。腎氣是人體全身正氣的根本，《黃帝內經》言：“正氣存內，邪不可干?！笨梢娔I氣與機體免疫的防御、監視、自穩三大功能相關;腎氣消長，與人體生長、衰老，及免疫中樞器官自然衰退規律相平行;腎氣虛衰，其免疫功能常常低下。細胞因子是由體內多種免疫活性細胞產生的一大類多肽物質，主要作用為細胞間信號傳遞，以及介導和調節免疫應答、炎癥反應等;具有多種生理功能，也涉及多種疾病的病理和生理過程。白細胞介素-1(interleukin-1，IL-1)主要由單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞等在攝取抗原后，或在抗原遞呈過程中產生。后來研究發現，胎盤細胞、腦星形膠質細胞等均可合成IL-1。IL-1不僅是免疫系統和神經內分泌系統之間相互作用的化學信使［24］，而且對多種免疫活性細胞具有重要的調節作用，并參與炎癥、發熱、神經內分泌、抗腫瘤及抗放射損傷等過程。IL-1的上述作用主要通過神經內分泌免疫途徑進行的，是神經內分泌免疫網絡中的重要調節介質。白細胞介素-2(interleukin-2，IL-2)主要由T細胞產生，它是機體最主要、最強有力的T細胞生長因子［25］。IL-2主要由活化的T淋巴細胞產生，它能維持T細胞在體外生長，激活多種免疫細胞，促進NK細胞的增殖和增強其活性，活化B細胞、刺激抗體產生，活化巨噬細胞等，對機體的特異性和非特異性免疫具有重要的調節作用，其水平反映了T細胞的功能狀態。由于T細胞在機體免疫應答及調節中起重要作用，因此，IL-2是保障機體正常免疫功能的關鍵環節。IL-2可通過促使某一特定T細胞群體的克隆性擴增，通過輔助性T細胞數目及功能的提高來增強整體的免疫功能。已有研究證實：腎虛患者的細胞免疫功能低下［26-27］。絕大多數的研究表明，作為反映機體免疫功能強弱重要標志的IL-2，其產生和分泌隨著機體衰老而下降［28-31］。

王宇等［32］以貓恐嚇孕鼠建造“恐傷腎”的模型，觀察到子代成年小鼠IL-2活性，在恐嚇模型組顯著高于正常組。“恐傷腎”使子代小鼠IL-2活性處于亢進狀態，而經典補腎方藥金匱腎氣丸對其有一定調節作用，為中醫腎為先天之本的理論提供了科學依據。宋淑霞等［33］證明：腎虛小鼠脾淋巴細胞的增殖活性，以及IL-2和 IL-12的表達，均較正常小鼠明顯下降，兩種細胞因子的mRNA的表達也受到抑制。經益氣補腎方藥治療后，以上指標均有不同程度的提高，認為益氣補腎方藥可能是改善外源性糖皮質激素所致腎虛及免疫衰老的較理想藥物。吳建文等［34］通過益壽飲治療老年腎虛血瘀證患者，證實益壽飲明顯提高老年腎虛血瘀證患者產生IL-1、IL-2的能力，進而改善免疫調節功能和延緩衰老。楊鋒等［35］證明：溫腎助陽藥可以使陽虛小鼠細胞的轉化功能提高到正常水平，而滋陰補腎藥對陽虛小鼠的免疫功能則無此作用。認為腎氣丸、六味地黃丸，及其加減而成的補腎方藥對機體的免疫功能均有促進作用，但其促進作用具有一定的體質選擇性和證型選擇性。胡國讓等［36］采用淫羊藿、人參、首烏、枸杞子等組成的補腎片，以老年人及正常中青年人進行照研究，結果顯示：老年人服藥后T細胞功能低下狀態得到明顯改善，而正常中青年人服藥前后的T細胞功能無明顯變化。腎為先天之本，藏精化髓生血，主生長、發育與生殖。腎氣的盛衰，是決定體質強弱的重要因素。免疫功能低下，與中醫學腎虛體質有一定的關系。因此，進一步研究腎虛質與機體免疫相關性十分必要。

5 討論

中醫學是按照自身特有的邏輯體系組織構建的理論體系，是以中國古代樸素的唯物論和辯證思想為主，以陰陽、五行學說為方法論，立足整體觀念，以臟腑、經絡的生理和病理為核心，以辨證論治為診療特點的醫學理論體系。中醫理論的精華，在于整體觀、天人相應觀、精氣神理論、辨證論治、經絡學說等。

中醫學認識和治療疾病的出發點是“證”?！白C”是疾病的核心和本質，但是目前尚無客觀統一的標準。如何科學合理地復制中醫“證”的模型，是研究“證”的出發點。腎主藏精，與機體的生長發育、衰老和生殖相關。因此，進行研究時，也要從相應的觀點出發，并力求探索真反映本質的客觀指標，以實現對中醫理論的客觀化和定量化的科學描述，最終為闡明中醫理論的本質和治療臨床病癥提供科學依據。

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