溶血性貧血的溶血檢查及臨床意義

閆曉琳

溶血性貧血是當體內紅細胞破壞過度超過骨髓代償能力時, 臨床可出現不同程度的貧血。實驗室檢查用于證實溶血的存在并確定病因。貧血的患者發現網織紅細胞增多是診斷溶血的最有用指標, 其他網織紅細胞增多的貧血還見于活動性失血、骨髓炎、紅系造血抑制的恢復期。溶血性貧血的診斷首先應確定是否存在溶血, 根據紅細胞破壞增加和代償增生的實驗室依據, 確定為溶血性貧血。

1 實驗室診斷技術

1. 1 顯示紅細胞破壞增加的依據

1. 1. 1 紅細胞壽命測定 將放射性核素51Cr標記的紅細胞注入血循環后, 逐日觀察其消失率, 記錄成活曲線, 進而計算出紅細胞壽命,測定紅細胞的半衰期(t1/2)。半衰期為25～32 d。紅細胞形態改變對某些溶血性貧血的診斷可提供重要的線索或依據。

1. 1. 2 血漿游離血紅蛋白檢測 采用過氧化物酶法檢測血漿游離血紅蛋白。取肝素抗凝血2 ml, 分離血漿備用。取試管3支, 標明測定管、標準管、空白管。充分混勻后, 在波長435 nm處用空白管調零, 讀取各管吸光度值,所有容器應避免血紅蛋白污染。標本勿溶血,以免出現假陽性結果［1］。

1. 1. 3 血清結合珠蛋白檢測 血清0.1 ml加33 g/L Hb 溶液 10 μl, 混勻 , 胃 37℃水箱中 10 min。此時標本中Hb的終末溶度為3 g/L。在電泳槽中加入pH值8.6巴比妥緩沖液, 平衡兩槽液面。取2 cm×8 cm醋纖膜條, 置浸液中濕潤, 用濾紙吸去多余水分。在一端2.5 cm處加上述血清約5 μl, 待血清完全吸人薄膜后,將醋纖膜條置電泳槽上, 加蓋, 平衡10 min。切斷電源, 取出醋纖膜條, 趁潮濕時立即將兩條區帶分別剪下洗脫。

1. 1. 4 高鐵血紅素白蛋白 取血漿或血清1 ml, 在上面覆蓋一層乙醚, 然后加入0.1 ml的飽和黃色硫化銨溶液, 混合。用分光鏡或分光光度計檢查, 若在波長558 nm處有一強吸收峰即為陽性, 正常人呈陰性。

1. 2 顯示紅細胞代償增加的依據

1. 2. 1 網織紅細胞增多 網織紅細胞增多表示骨髓紅細胞系增生旺盛, 多數貧血(再生障礙性貧血除外)網織紅細胞計數均可增高, 如溶血性貧血時由于大量網織紅細胞浸入血循環, 可使網織紅細胞高達0.20或更高；惡性貧血或缺鐵性貧血在藥物治療有效時網織紅細胞計數亦可短期內增高。

1. 2. 2 外周血涂片中見到紅系增生旺盛的紅細胞形態學改變, 如嗜多色性細胞、有核紅細胞、 Howell-Jolly小體、Cabot環及大型紅細胞增多等。

1. 2. 3 增生性貧血骨髓象 溶血性貧血時,幼紅細胞顯著增生, 以中、晚幼紅細胞為主,粒紅比例倒置。

2 臨床意義

正常血漿只有微量的游離血紅蛋白, 當大量溶血時主要是急性血管內溶血, 游離血紅蛋白明顯增高。大量溶血時, 血清游離膽紅素增高。血管內溶血后, 游離血紅蛋白能與血液中的結合珠蛋白相結合, 這種復合物在單核-巨噬細胞系統被清除, 導致結合珠蛋白降低。當游離血紅蛋白增多, 超過了結合珠蛋白所能結合的量, 多余的血紅蛋白即從腎小球濾出,出現血紅蛋白尿, 尿呈醬油色, 鏡檢無紅細胞,隱血試驗陽性。含鐵血黃素尿主要見于慢性血管內溶血, 尿Rous試驗陽性。

對溶血性貧血的患者而言, 詳細詢問病史和體格檢查可以為病因提供重要線索?；颊咭话銜蟹αΦ蓉氀Y狀, 黃疸和茶紅色尿多見, 應詳問藥物及毒素接觸史, 體格檢查易發現皮膚黏膜感染, 脾大較常見［2］。紅細胞可以在成熟前被循環中尤其是肝、脾的巨噬細胞清除, 即血管外溶血或者循環中膜被破壞,即血管內溶血。兩種機制都會使血紅素代謝增加, 非結合膽紅素(間接膽紅素)增加, >34 μmol/L或2 mg/dl時, 臨床可見黃疸。溶血的患者如果肝功能未受損, 則非結合膽紅素很少超過 70～85 μmol/L(4～5 mg/dl), 而在 Gilbert's綜合征患者中膽紅素結合存在缺陷, 非結合膽紅素將會繼續上升。血管內溶血導致血漿中血紅蛋白上升, 數量超過腎小管吸收能力時, 即會出現血紅蛋白尿。3～4 d后, 尿中即會出現含鐵血黃素并可持續到血紅蛋白尿停止后數周, 因此, 血紅蛋白尿象征嚴重的血管內溶血,血紅蛋白尿需與血尿和橫紋肌肉瘤溶解造成的肌球蛋白尿鑒別。不存在組織損傷時, 血清酶水平可用于溶血患者的診斷和監測。乳酸脫氫酶LDH可隨著紅細胞的破壞而增加, 谷草轉氨酶也會(AST)有所升高, 而谷丙轉氨酶正常。

［1］馬驄. 溶血性貧血的實驗檢查及進展. 繼續醫學教育, 2006,20(26):20-23.

［2］楊志娟, 唐任光. 血清酶測定在貧血疾病中的臨床應用價值初探. 實用醫技雜志, 2007,14(34):4686-4688.