牛蒡子微波加熱炒制與傳統(tǒng)清炒法的比較試驗

(重慶市北碚區(qū)中醫(yī)院，重慶 400711)

近年來微波技術(shù)在炮制中的應(yīng)用發(fā)展迅猛。微波加熱效率高，且具有節(jié)能、省時、方便、衛(wèi)生等優(yōu)點。于定榮[1]用微波技術(shù)對炒法的操作進行了初步探索，結(jié)果顯示微波炮制品的性狀及成分溶出度優(yōu)于傳統(tǒng)炮制品。為深入中藥飲片炮制工藝的改革，本研究中設(shè)計了牛蒡子微波炮制法與傳統(tǒng)清炒法的比較試驗。

1 儀器與試藥

微波爐(格蘭仕wp700型);普通電炒鍋;YFLLL型粉碎機(浙江瑞安市歷制藥機械有限公司);藥典篩;Agilent1200型高效液相色譜儀(配有VWD檢測器，四元梯度泵);Chem Station工作站(Agilent科技有限公司);HC－TPLL－10型架盤藥物天平(上海精科天平);HHS型電熱數(shù)顯水浴鍋(上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠);超聲提取器(功率220 V，50 Hz，上海聲源超聲儀器設(shè)備有限公司)。牛蒡子(四川新荷花中藥飲片股份有限公司);牛蒡苷對照品(批號為110819－200606，中國藥品生物制品檢定所);甲醇、乙腈為色譜純，試驗用水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 傳統(tǒng)炮制品制備

取牛蒡子500 g，按2010年版《中國藥典(一部)》清炒法(附錄ⅡD)依法炮制[2]。

2.2 微波炮制品制備

取牛蒡子500 g，平鋪在轉(zhuǎn)盤上，0.5～1 cm厚，放入微波爐，加熱炮制到符合規(guī)定。

2.3 薄層色譜比較[2－3]

取牛蒡子清炒和微波炮制品粉末各0.5 g，加乙醇20 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。另取牛蒡子對照藥材0.5 g，同法制成對照藥材溶液。再取牛蒡苷對照品，加乙醇制成每1 mL含5 mg的溶液，作為對照品溶液。吸取供試品溶液3 μL、對照藥材溶液 3 μL、對照品溶液 5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－甲醇－水(40∶8∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，薄層色譜圖見圖1。結(jié)果表明，在微波法與清炒法的供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液及對照品溶液色譜相應(yīng)位置上分別顯相同顏色的斑點。

圖1 牛蒡子薄層色譜圖

2.4 有效成分含量比較[4]

2.4.1 色譜條件

參考2010年版《中國藥典(一部)》，確定以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相為甲醇－水(1∶1.1)，檢測波長為280 nm。理論板數(shù)按牛蒡苷計算應(yīng)不低于1 500。

2.4.2 溶液制備

精密稱取牛蒡苷對照品5 mg，置10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得對照品溶液(每1 mL含牛蒡苷0.5 mg)。精密稱取牛蒡子清炒品和微波炮制品粉末(過3號篩)各0.5 g，分別置50 mL量瓶中，各加甲醇約45 mL，超聲處理20 min，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2.4.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察:吸取牛蒡苷對照品溶液 6，9，12，15，18 μL，依次進樣，依法測定，以牛蒡苷量與峰面積值作圖，得線性回歸方程 Y=269 318 X+273 975，r=0.999 7(n=5)。結(jié)果表明，牛蒡苷進樣量在3～9 μg范圍內(nèi)與峰面積值線性關(guān)系良好。

穩(wěn)定性試驗:在擬訂的色譜條件下，取同一牛蒡子供試品溶液，于 0，2，4，6，8 h 時測定峰面積值，結(jié)果的 RSD 為 0.05%(n=5)，表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

精密度試驗:在擬訂的色譜條件下，精密吸取同一牛蒡子對照品溶液1份，連續(xù)進樣5次，記錄峰面積值。結(jié)果的 RSD為0.04%(n=5)，表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗:在擬訂的色譜條件下，取同一批樣品，平行制備6份供試品溶液，依次進樣，記錄峰面積值并計算含量。結(jié)果的RSD為2.06%(n=6)，表明測定結(jié)果穩(wěn)定、可靠。

加樣回收試驗:在擬訂的色譜條件下，取已知含量的供試品溶液 6 份，分別精密加入對照品溶液 0.4，0.5，0.6 mL，照 2.4.2項下供試品制備方法制備加樣回收供試品溶液，依法測定，記錄峰面積值，按外標法分別計算含量。結(jié)果見表1。

表1 牛蒡子苷加樣回收試驗結(jié)果(n=6)

2.4.4 牛蒡苷含量測定

按擬訂的色譜條件，精密吸取牛蒡子供試品溶液10 μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積值(見圖2)，按外標法分別計算含量。結(jié)果清炒炮制品3批樣品含量平均值為5.236%，微波炮制品3批樣品含量平均值為5.330%。結(jié)果表明，微波法炮制的牛蒡苷含量為清炒法的1.02倍，說明微波法炮制略優(yōu)于清炒法。

圖2 高效液相色譜圖

3 討論

從外觀性狀比較，兩種方法的成品外觀均能達到藥典對該品種項下的要求，微波炮制的時間也比清炒法時間短。薄層色譜鑒別結(jié)果表明，兩種方法的成品中都能出現(xiàn)與對照品溶液和對照藥材溶液相同顏色的斑點，說明微波法沒有改變供試品溶液中的主要指標成分。高效液相色譜法結(jié)果表明，兩種方法成品的含量均能達到藥典的規(guī)定，且微波炮制法的含量測定略高于傳統(tǒng)清炒法，說明通過微波炮制后，更有利于飲片中有效成分的溶出。

本研究結(jié)果表明，微波炮制法在外觀性狀、和有效成分含量等方面的檢測結(jié)果均優(yōu)于傳統(tǒng)清炒法，同時微波炮制法較傳統(tǒng)清炒法具有省工、省時、工藝簡便、易掌握、飲片潔凈度高、勞動強度小、無環(huán)境污染、工藝指標可量化等優(yōu)點，為中藥飲片炮制較為理想的方法之一。

[1]于定榮.微波炮制決明子、酸棗仁的實驗研究[D].長沙:湖南中醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文，2004.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:66.

[3]陳新培，窶志英，肖學(xué)風(fēng).微波技術(shù)在中藥炮制中的應(yīng)用[J].中國中藥雜志，2001，26(7):501.

[4]劉惠如，李 萍，唐家福.微波技術(shù)在中藥炮制中的應(yīng)用探討[J].基層中藥雜志，2002，16(5):41.

[5]蔡寶昌，劉訓(xùn)紅.常用中藥材HPLC指紋圖譜測定技術(shù)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:23－24.