北疆地區3個規模化豬場豬O型口蹄疫抗體監測結果及免疫程序分析

齊向濤 戚 帥 許 追 歐 都 許丹丹 楊 莉 齊亞銀

（新疆石河子大學動物科技學院，新疆石河子 832000)

北疆地區3個規模化豬場豬O型口蹄疫抗體監測結果及免疫程序分析

齊向濤 戚 帥 許 追 歐 都 許丹丹 楊 莉 齊亞銀*

（新疆石河子大學動物科技學院，新疆石河子 832000)

為了查明北疆地區3個規模化豬場O型口蹄疫病毒的抗體陽性率及免疫合格率，并提出針對該病的最佳免疫程序，分別采集北疆地區3個規模化豬場的公豬、后備母豬、哺乳母豬、妊娠母豬、7日齡、14日齡、21日齡、30日齡、40日齡和55日齡仔豬等不同豬群的血液，分離血清，共計1 500份。采用間接ELISA方法檢測其抗體。結果顯示，3個規模化豬場不同豬群的口蹄疫抗體陽性率及免疫合格率之間差異顯著 （≤0.05），口蹄疫總體抗體陽性率為86.4%。3個豬場口蹄疫抗體陽性率分別為90.3%、90.6%、78.4%，不同豬群的抗體陽性率分別為公豬100%、后備母豬100%、哺乳母豬100%、妊娠母豬100%、7日齡仔豬91.9%、14日齡仔豬92%、21日齡仔豬87.6%、30日齡仔豬83.4%、40日齡仔豬73.9%、55日齡仔豬58.2%。綜合本研究結果及該豬場前期的免疫程序，建議仔豬的口蹄疫免疫程序為40日齡首次免疫，54日齡二次免疫。

口蹄疫抗體；間接ELISA；免疫程序

口蹄疫（Foot and Mouth Disease, FMD）是由口蹄疫病毒引起的以感染偶蹄動物為主的急性、熱性、高度傳染性疫病，世界動物衛生組織（OIE）將其列為必須報告的動物傳染病，我國規定為一類動物疫病。該病傳播途徑多，傳播速度快，傳染性強，病原變異大，危害嚴重，曾多次在世界上流行。FMD可侵害多種動物，以偶蹄獸最易感。口蹄疫病毒具有傳播迅速和傳播范圍廣的特點，其傳播方式有蔓延式和跳躍式，一般呈流行性，但也可形成跨地區的大流行。在自然狀態下，數個感染性病毒顆粒即可引起動物發病，由于該病的發生會造成嚴重的經濟損失和政治影響，因此，其防治工作得到世界各國的高度重視[1]。

母源抗體既能保護幼畜免遭病原侵襲、抵抗感染，又會降低疫苗免疫的效果。若免疫時間過早，母源抗體可能會干擾疫苗的作用而導致免疫失敗；若免疫時間過遲，母源抗體水平過低，易引起發病[2]。適時免疫接種，一方面要避開母源抗體的干擾，一方面又要維持抗體對豬群的免疫保護率。口蹄疫免疫抗體檢測是預防和控制口蹄疫發生的重要手段。豬場尤其是規模化養豬場應增強預防意識，加強口蹄疫免疫監測，制定合理有效的免疫程序[3]。

為了解北疆地區3個規模化豬場豬O型口蹄疫免疫效果，給養殖戶提供科學合理的口蹄疫免疫方案，本研究以北疆地區3個規模化豬場為研究對象，收集其背景資料，包括品種、飼養管理措施、免疫防治程序、藥物保健方案等，并分別采集北疆地區3個規模化豬場的公豬、后備母豬、哺乳母豬、妊娠母豬、7日齡仔豬、14日齡仔豬、21日齡仔豬、30日齡仔豬、40日齡仔豬、55日齡仔豬等不同階段豬群的血清，共計1 500份，對試驗的3個規模化豬場進行豬O型口蹄疫抗體水平的血清學調查和仔豬O型口蹄疫母源抗體消長規律研究，依據監測結果，制定合理的豬O型口蹄疫免疫程序。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

豬O型口蹄疫病毒ELISA抗體檢測試劑盒（武漢科前動物生物制品公司）、酶標儀（美國BioTek公司），微量移液器（德國Eppendorf公司），恒溫培養箱（北京市光明醫療儀器廠）。

1.2 試驗樣品

1.2.1 血清樣品的準備

由北疆A、B、C 3個規模化豬場＞（種母豬 200頭）中分別采集公豬血清60份、后備母豬血清120份、哺乳母豬血清120份、妊娠母豬血清120份、7日齡仔豬血清180份、14日齡仔豬血清180份、21日齡仔豬血清180份、30日齡仔豬血清180份、40日齡仔豬血清180份、55日齡仔豬血清180份。共計1 500份。

1.2.2 樣品采集時間、方法及樣品儲存血清共分4次均等采集，分別為2012年7月、2012年10月、2013年1月、2013年4月；采血方式為前腔靜脈采血（個別成年豬只采取耳緣靜脈采血）；血液采集后用高速離心機提取-血清，置于 20℃冰箱儲存備用。

1.3 試驗方法與判定

1.3.1 試驗方法

按照豬O型口蹄疫抗體檢測ELISA試劑盒操作。

1.3.2 結果判定

在酶標儀上測各孔的OD630值。陽性對照孔的平均OD630值均≥0.8，陰性對照孔的平均OD630值均＜0.3時，試驗有效。樣品OD630值≥0.4時判定為陽性；樣品OD630值＜0.4時判定為陰性。

1.4 數據處理與統計分析

用EXCEL軟件進行原始數據處理，用SPSS 11.5對試驗數據進行t檢驗。

2 結果與分析

2.1 規模化豬場口蹄疫抗體監測結果

統計4次血清檢測結果并匯總，運用EXCEL軟件進行原始數據處理，用SPSS 11.5對試驗數據進行t檢驗。3個規模化豬場不同豬群O型口蹄疫抗體水平檢測結果見表1。

2.2 不同豬場及豬群O型口蹄疫抗體檢測結果比較

2.2.1 不同豬場豬O型口蹄疫抗體檢測結果比較

3個規模化豬場豬O型口蹄疫抗體陽性率分別為：A場90.3%、B場90.6%、C場 78.4%；血清抗體的ELISA測定平均值為：A場1.232、B場1.182、C場1.388。由結果可以看出，A場總體免疫效果最好，B場免疫結果也比較好，特別是總體的抗體陽性率達到了90.6%，而C場的免疫效果最差，尤其是對仔豬的免疫保護率較低，而且抗體的均勻度不高。

表1 3個規模化豬場口蹄疫抗體的監測結果

2.2.2 不同豬群O型口蹄疫抗體檢測結果比較

對各豬群抗體檢測結果加以比較，公豬、后備母豬、妊娠母豬、哺乳母豬的抗體陽性率均為100%，7日齡仔豬為91.9%，14日齡仔豬為92%，21日齡仔豬為 87.6%，30日齡仔豬為83.4%，40日齡仔豬為73.9%，55日齡仔豬為58.2%。

不同豬群O型口蹄疫血清抗體的ELISA測定結果顯示，公豬ELISA測定平均值為1.725，后備母豬為1.497，妊娠母豬為 1.438，哺乳母豬為1.523，7日齡仔豬為1.653，14日齡仔豬為 1.394，21日齡仔豬為1.312，30日齡仔豬為1.184，40日齡仔豬為0.819，55日齡仔豬為0.651。

綜上所述，仔豬出生后抗體水平就開始下降，而在30日齡后下降速度加快。

2.3 檢測結果分析

通過對3個規模化豬場不同豬群O型口蹄疫抗體檢測結果的對比分析發現，3個豬場的豬群雖都經豬O型口蹄疫疫苗免疫，但抗體陽性率及免疫合格率之間差異顯著（≤0.05），不同豬場及豬群間的抗體分布并不均勻。公豬和后備母豬抗體陽性率最高，仔豬抗體陽性率偏低，55日齡仔豬的免疫效果不理想，群體整體抗體水平較低，其原因可能為：仔豬免疫力較差，免疫效果不理想；免疫程序不科學，免疫時機不適宜，不能產生良好的免疫應答。如母源抗體消失后而疫苗免疫沒有及時跟進，產生免疫保護空檔。

表2 3個規模化豬場的口蹄疫免疫程序

3 討論

3.1 加強口蹄疫免疫抗體監測

規模養殖戶應重視口蹄疫免疫抗體監測。開展抗體監測的目的不僅僅是診斷，更主要的是評價豬群整體的免疫狀況，并且根據監測結果對免疫方案進行適當的調整或提供一些預警機制。對于生產母豬，豬場應根據自身實際，嚴格實行全進全出制。對于一些生產流程相當規范的豬場，可以跟胎次免疫，但每年需合理地進行2～3次免疫抗體監測。對于仔豬，建議在首次免疫之前檢測其體內的母源抗體水平，以確定最佳首次免疫日齡。免疫過早，母源抗體影響太大，容易造成免疫失敗或群體抗體水平不均衡。免疫過遲，口蹄疫免疫空白期延長，染病危險增加。同時最好在二次免疫前檢測口蹄疫病毒抗體水平，以確定合理的免疫程序。

3.2 3個規模化豬場的口蹄疫免疫程序

現在在我國受口蹄疫威脅的地區，一般采用28～35日齡首次免疫，首次免疫后1個月進行二次免疫的方案。但這種免疫方案存在很多不理想之處。在本試驗過程中，筆者發現3個規模化豬場采用的免疫程序與一般的免疫程序不同。具體免疫程序如下：公豬、經產母豬每年春、秋各普免1次；經產母豬每次斷奶前免疫1次；后備母豬配種前免疫2次；仔豬斷奶前后，即30～35日齡首次免疫，50～70日齡二次免疫。在本研究中，仔豬口蹄疫免疫抗體水平參差不齊、波動較大，推測可能是仔豬的首次免疫及二次免疫日齡偏早造成的。30日齡仔豬體內的母源抗體水平依然較高，會造成免疫抑制，所以此階段不能進行首次免疫，建議仔豬的首次免疫時間推遲到40日齡。這樣在仔豬55日齡左右時，抗體水平不至于太低，可在此時進行第二次免疫。經調整后，3個規模化豬場的口蹄疫免疫程序如表2。

[1]裔群英.鹽城地區生豬口蹄疫免疫抗體與疫情監測.南京:南京農業大學，2005.

[2]王峰.豬O型口蹄疫疫苗不同豬齡免疫抗體分析試驗.廣東農業科學，2011 (21）：118-119.

[3]Chenard G,Miedema K,Moonen P,et al.A solid-phase blocking ELISA for detection of type O foot-and-mouth disease virus antibodies suitable for mass serology.Journal of Virological Methods, 2003,107(1):89-98.

S851.35

B

1673-4645(2013)09-0045-03

2013-07-22

齊向濤（1987-），男，陜西人，碩士研究生

齊亞銀（1980-），男，寧夏人，博士，副教授，主要從事動物傳染病的診斷與防治工作