李杰,岳穎,李嬌,郭麗
(1.沈陽市兒童醫院檢驗科,遼寧 沈陽 110032;2.沈陽醫學院科學實驗中心)
輪狀病毒(rotavirus,RV)是引起嬰幼兒嚴重腹瀉的最主要病原體,世界范圍內有35%~52%的患兒腹瀉由它引起[1]。有研究認為RV可以通過胃腸屏障而到達血液循環,引起各個臟器病變,導致多種并發癥,成為RV腹瀉致死的重要原因之一[2]。為了解本地區嬰幼兒糞便鏡檢脂肪球與RV腹瀉關系以及感染現狀,我們對2011年9月至2012年4月沈陽市兒童醫院腹瀉嬰幼兒的糞便進行糞便常規檢查,同時進行RV抗原檢測,現報道如下。
1.1 臨床資料 2011年9月至2012年4 月到我院就診的腹瀉患兒5 187 例,其中男3 085例,女2 102例,年齡9 d~5歲。
1.2 方法
1.2.1 試劑與儀器 杭州艾康生物技術有限公司提供,采用膠體金法即膠體金免疫層析技術和雙抗體夾心原理檢測糞便中A群輪狀病毒抗原。日本Olympus C21顯微鏡。
1.2.2 試驗方法 水樣便采用產品所配的一次性塑料吸管滴加2滴(大約50 μl)至裝有稀釋緩沖液的收集器中;固態糞便可用取樣棒(收集器自帶)挑取大約50 mg標本的糞便加入裝有稀釋緩沖液的收集器中。充分搖勻,折斷收集器尖端,棄去頭2滴,垂直滴加2滴(約80 μl)無氣泡的樣品稀釋液于試劑的加樣孔(S)內,10~20 min讀取測試結果。陽性出現兩條紫紅色的條帶;陰性時質控區內(C)出現一條紫紅色的條帶;無效則質控區內(C)未出現紫紅色的條帶,需重新檢測。同時記錄糞便性狀并直接涂片鏡檢。鏡檢標準嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》。
1.3 統計學方法 采用SPSS 15.0進行統計學分析,計數資料采用Pearson Chisquare 檢驗。P<0.05為差異有顯著性。
2.1 RV陽性嬰幼兒不同性別、不同年齡脂肪球檢測結果 5 187例腹瀉嬰幼兒糞便中RV感染1 287例,陽性率為24.8%。RV陽性男患兒脂肪球陽性為70.0%,RV陽性女患兒脂肪球陽性為66.4%,差異無顯著性。RV陽性年齡<6個月、6個月~2歲、>2歲患兒脂肪球陽性分別為67.6%、69.0%和52.6%,差異無顯著性。見表1。

表1 RV陽性嬰幼兒不同性別、不同年齡脂肪球檢測結果
2.2 RV陽性組與陰性組糞便鏡檢脂肪球數量比較 0代表未見脂肪球,>0代表見到1個以上脂肪球。分析結果見表2。RV陽性組中68.5%的糞便標本鏡檢可見脂肪球,顯著高于RV檢測陰性組(32.0%),差異有顯著性。

表2 RV陽性組與陰性組糞便鏡檢脂肪球數量比較
注:兩者比較χ2=533.6,P<0.01
RV是引起人類和動物病毒性腹瀉的主要病原體,屬呼腸病毒科輪狀病毒屬,為雙鏈RNA病毒,分為A、B、C 3組,僅A、B組引起人類嚴重發病,A組致嬰幼兒腹瀉且最為常見,已成為世界范圍內兒童急性腹瀉病最重要的病原之一。
通過對本院5 187例腹瀉嬰幼兒糞便進行檢測結果分析可見,A 群RV陽性標本1 287例,陽性率為24.8%,與其它報道一致[3]。由表1可見不同性別、不同年齡RV陽性嬰幼兒脂肪球檢測結果差異無顯著性。A 群RV陽性標本中糞便鏡檢出脂肪球882例,檢出率68.5%,與張靜等[4]報道一致。由表2可見,RV陽性組與陰性組糞便鏡檢脂肪球數量比較,差異有顯著性。分析其相關的原因可能是:RV的發病機制尚不完全清楚,認為RV主要侵犯上部小腸的微絨毛上皮細胞,使其凋亡。腹瀉患兒小腸絨毛變短、萎縮,黏膜固有層單核細胞侵潤,內質網池膨脹,線粒體腫脹,微絨毛稀少,不規則、可見裸露的微絨毛。可能是嬰幼兒感染RV后最先出現消化道黏膜免疫反應,引起小腸黏膜破壞。由于新生的上皮細胞功能低下及吸收面積變小,造成腸吸收不良而出現脂肪球[5]。因缺乏脂肪酶而使脂肪水解不全,引起脂肪消化不良,腸黏膜上皮細胞刷狀緣受損,脂肪吸收障礙,導致糞便中的脂肪球增多。
小兒RV腸炎,起病急且常出現發熱、嘔吐和腹瀉等癥狀,持續時間較長,可達3~9 d,同時還伴有脫水和電解質平衡紊亂等癥狀。RV是嬰幼兒秋冬季腹瀉的主要病原體,不僅引起腸道內感染,而且常可能發生病毒血癥,引起肝臟、心肌、神經系統,甚至呼吸系統及泌尿系統等損害[6]。目前臨床檢測RV的方法有PCR、膠乳凝集法、ELISA雙抗體夾心法、病毒培養、電鏡檢查、膠體金法等。本實驗所用的膠體金法,具有快速、特異、敏感、方法簡單、結果準確的特點[7],適合一般基層實驗室門急診的常規檢查。在高發流行季節建議把A 群RV抗原檢測作為急性腹瀉患兒糞便的常規檢查之一。
本研究發現糞便鏡檢脂肪球數量與RV陽性呈正相關。根據腹瀉發生的季節,臨床癥狀,在尚未開展A 群RV抗原檢測的醫院,如果腹瀉嬰幼兒糞便常規檢測發現脂肪球時,提示醫生高度懷疑RV感染,從而避免臨床誤診,及早確診RV感染有助于指導臨床有效治療和控制致死性并發癥。
參考文獻:
[1]李上淼,李紹錦.兒科輪狀病毒醫院感染的高危因素分析與處理對策[J].中國初級衛生保健,2012,26(2):52-53.
[2]刁艷霞,陳蘭舉.輪狀病毒腸道外感染的研究進展[J].國際兒科學雜志,2010,37(2):203-205.
[3]張巧紅,萬汝根,李國鋼.腹瀉患兒輪狀病毒感染分析[J].中華醫院感染學雜志,2011,21(6):1139-1236.
[4]張靜,劉慶玲,熊德棟,等.A 群輪狀病毒的檢測對于嬰幼兒腹瀉的重要性研究[J].國際檢驗醫學雜志,2011,32(9):1001-1002.
[5]魏靜芬,葉富法.嬰幼兒腹瀉輪狀病毒感染的檢測與分析[J].中國婦幼保健,2009,24(12):1640-1641.
[6]唐紅,汪青,鄭潔麗.嬰幼兒輪狀病毒腸炎并胃腸外損害的臨床分析[J].中華全科醫學,2010,8(2):196-197.
[7]高平.嬰幼兒腹瀉患者A 群輪狀病毒快速檢測分析及臨床意義[J].檢驗醫學與臨床,2011,8(19):2375-2376.