復方銀紅滴丸的急性毒性研究

朱光怡　王翠媛　朱丹

摘要：采用與臨床應用相同的給藥途徑對小鼠和大鼠分別灌胃給予復方銀紅滴丸，測定其急性毒性和最大耐受量。結果表明，在急性毒性試驗中，受藥液濃度及灌胃容積的限制而未能測出半數致死量（LD50），測定復方銀紅滴丸對大鼠的的最大耐受量（MTD）為279 g/kg。說明在本試驗條件下，復方銀紅滴丸對受試動物未見明顯的急性毒性，按急性毒性分類，屬無毒級，表明該制劑具有良好的安全性。

關鍵詞：復方銀紅滴丸；最大耐受量；急性毒性

中圖分類號：S853.9 文獻標識碼：A 文章編號：1007-273X（2013）09-0013-02

復方銀紅滴丸是根據中醫藥學和現代醫學理論，精選紅花、金銀花等道地藥材，經現代工藝技術提煉精制而成的復方中藥制劑，其應用簡單、經濟，對治療奶牛乳房炎有獨特療效。為客觀、科學地評價復方銀紅滴丸的安全性，并為該產品的開發提供理論依據，現對其進行急性毒性研究。

1 材料與方法

1.1 受試藥物

復方銀紅滴丸，自制（生產批號：YH-001、YH-002、YH-003），每克含生藥干膏0.63 g。臨用前用蒸餾水配成最大濃度（0.667 g生藥/mL）的混懸液。

1.2 受試動物

健康KM種小鼠20只，清潔級，體重（20.0±2.0 ）g，雌雄各半，由佳木斯大學實驗動物中心提供，動物合格證號：19-082。

健康Wistar大鼠20只，清潔級，體重（200.0±10 .0）g，雌雄各半，由佳木斯大學實驗動物中心提供，動物合格證號：19-085。

1.3 動物飼料

配方的營養成分組成：水分8.53%，粗蛋白25.10%，精蛋白24.6%，粗脂肪7.33%，粗灰分7.50%，精纖維21.4%，無氮浸出物48.4%，能量18.17 MJ/kg。

1.4 飼養條件

空調動物室，溫度（22±2）℃，相對濕度（60±5）%，動物每籠5只，定時定量添加飼料，自由飲水，每周更換墊料3次。

1.5 試驗方法

試驗在空調恒溫實驗室進行，室內恒溫25 ℃，光線充足，排風扇排風，空氣流通良好，環境安靜，清潔，對試驗結果影響較小。試驗前1周購進小鼠，強化飼養，適應環境。

1.5.1 測定復方銀紅滴丸對小鼠的半數致死量（LD50） 選取健康小鼠20只雌雄各半，給藥前禁食14 h，不禁水。按文獻方法[1，2]隨機分組，實驗動物灌胃給予復方銀紅滴丸，以藥物的最大濃度（50%）和動物能耐受的最大容積（0.8 mL/20 g）在24 h內連續灌胃給藥2次（每日上午8：00、下午14：00各灌胃一次），每次0.4 mL。嚴密觀察小鼠給藥后的反應，逐日觀察并記錄小鼠的行為活動、步態、皮毛、呼吸、大小便、食欲及攝食量、體重、鼻、眼、口腔有無異常分泌物等情況及動物死亡數，試驗后即刻及連續觀察7日，求出半數致死量，并確定急性毒性分級。

1.5.2 測定復方銀紅滴丸對大鼠的的最大耐受量（MTD） 選取健康大鼠20只雌雄各半，給藥前禁食12 h，不禁水。按文獻方法[3]隨機分組，實驗動物灌胃給予復方銀紅滴丸，最大體積2 mL/20 g（劑量279 g/kg，相當于臨床日用藥劑量的386.2倍），上下午各灌胃1次。給藥后觀察動物的體征、行為活動、精神狀態等，連續觀察16 d，定期稱重，計算體重變化，并同對照組作比較。于第16天處死動物，尸檢，肉眼觀察主要臟器的外觀變化。

1.6 數據處理

試驗驗數據以平均數±標準差表示，用統計軟件SPSS 12.0處理。

2 結果與分析

試驗觀察中可見，小鼠灌胃給予復方銀紅滴丸后，出現自主活動減少、閉眼、臥伏等現象，食欲有所下降，糞便呈褐色，所有體征在給藥2 h后基本恢復正常。在連續7 d中一般情況良好，無明顯異常癥狀；步態活動、行為、精神狀態正常，毛色光亮，攝食飲水情況良好，無震顫、扭體及翹尾，鼻、眼、口腔無異常分泌物，未顯現呼吸興奮及抑制現象，大小便正常。7 d內小鼠無一例死亡，亦未見明顯毒性反應；7 d后斷頸處死實驗小鼠，經解剖和尸檢未發現內臟器官異常。

大鼠在灌胃給予復方銀紅滴丸后，亦出現自主活動減少的現象，然后進入閉眼、靜臥不動狀態，食欲有所下降，呼吸無明顯變化，糞便呈褐色，所有體征在給藥1 h后基本恢復正常。同對照組比較，大鼠在給藥后1～16 d內的體重變化無顯著性差異（表1）。16 d內無動物死亡，經解剖和尸檢未發現大鼠主要臟器因毒性作用引起的改變。

3 小結與討論

小鼠灌胃給予復方銀紅滴丸未引起明顯的毒性反應，無動物死亡，按急性毒性分級標準規定，該受試物屬于無毒級。大鼠灌胃給予復方銀紅滴丸的最大耐受量為279 g/kg（折合原生藥總量計），相當于臨床用量386.2倍。急性毒性試驗結果表明復方銀紅滴丸的毒性低，臨床用藥安全。

參考文獻：

[1] 謝秀瓊.中藥新制劑開發與應用[M].第二版.北京：人民衛生出版社，2000.540.

[2] 陳 奇.中藥藥理研究方法學[M].第一版.北京：人民衛生出版社，1993.112-130.

[3] 張均田.現代藥理實驗方法學[M].第一版.北京：北京醫科大學協和醫科大學聯合出版社，1998.1816-1821.