香榧假種皮提取物對(duì)潛葉跳甲的殺蟲活性初步研究

單麟珉　孫小紅

摘要：為研究香榧（Torreya grandis cv. Merrilli）假種皮的殺蟲活性，采用液-液萃取分離法對(duì)香榧假種皮乙醇提取浸膏進(jìn)行萃取分離（石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇），并采用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，采用葉碟浸漬法分別測(cè)定5種提取物對(duì)潛葉跳甲（Argopistes tsekooni）的殺蟲活性。結(jié)果表明，5種處理液均有較好的殺蟲活性，且濃度越高殺蟲活性越強(qiáng)。石油醚提取物的殺蟲活性最好，濃度達(dá)到200 mg/mL以上時(shí)處理96 h的校正死亡率達(dá)到100%，其次為氯仿提取物。毒力測(cè)定結(jié)果表明，石油醚提取物L(fēng)D50最小，為32.82 mg/mL。因此，香榧假種皮提取物表現(xiàn)出較好的抑蟲活性，具有進(jìn)一步研究開發(fā)的價(jià)值。

關(guān)鍵詞：香榧（Torreya grandis cv. Merrilli）假種皮；提取物；女貞潛葉跳甲（Argopistes tsekooni Chen）；殺蟲活性

中圖分類號(hào)：S482.39 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2013）09-2060-03

香榧（Torreya grandis cv. Merrilli）又名“中國榧”，也被稱為榧樹、玉榧、野杉子等，為紅豆杉科（Taxaceae）榧屬（Torreya）常綠喬木，中國原產(chǎn)樹種，是世界上稀有的經(jīng)濟(jì)樹種之一[1]。主要分布在中國南方較為濕潤的地區(qū)，主產(chǎn)江蘇南部、浙江、福建、江西、安徽、湖南、貴州等地。香榧種子的外層為較厚的肉質(zhì)化假種皮，約占種子鮮重的50%～60%[2]。一直以來，假種皮被視為廢棄物堆棄在房前屋后和溪流邊，通常會(huì)散發(fā)出濃重的異味，污染環(huán)境。如何開發(fā)利用香榧假種皮，防止其造成環(huán)境污染，一直是榧農(nóng)關(guān)注且亟待解決的問題。目前對(duì)香榧假種皮的開發(fā)利用研究尚處于起步階段，少數(shù)學(xué)者正在從事關(guān)于香榧假種皮精油的化學(xué)成分以及藥理的研究，香榧假種皮中含有醇、酮、醛、烯等20余種芳香油成分[3]，用途廣泛，可用于調(diào)制花香、清香型香精，在化妝品、肥皂、日用香料等行業(yè)逐步得到重視。

金葉女貞（Ligustrum vicaryi）嫩梢金黃，近年來被廣泛應(yīng)用在街道、公園、廣場(chǎng)的綠化中，但其深受潛葉跳甲（Argopistes tsekooni）危害。金葉女貞葉片受害后由金黃色變?yōu)楹稚?，并大量干枯脫落，?yán)重影響金葉女貞長勢(shì)和綠化效果[4]。迄今為止，鮮有關(guān)于金葉女貞上潛葉跳甲的防治研究報(bào)道。為了更充分地利用香榧這一植物資源，本研究考察了香榧假種皮提取物對(duì)園林害蟲潛葉跳甲的殺蟲活性，為新植物源殺蟲劑的開發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

香榧假種皮收集自浙江省紹興市，經(jīng)紹興文理學(xué)院元培學(xué)院金自學(xué)教授鑒定為香榧假種皮，置于陰涼通風(fēng)處自然陰干，備用。潛葉跳甲成蟲采自野外金葉女貞樹，經(jīng)專家鑒定為潛葉跳甲，挑選大小、活性基本一致的成蟲，饑餓24 h供試。

1.2 方法

1.2.1 香榧假種皮提取物及揮發(fā)油的制備 取粉碎后的香榧假種皮樣品400 g，用體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇進(jìn)行回流提取，并減壓濃縮。取浸膏分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)行萃取，減壓濃縮后得石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇4種溶劑提取物浸膏，放入冰箱冷藏備用。

采用蒸餾法對(duì)香榧假種皮進(jìn)行精油提取：稱取香榧假種皮的干粉50 g，置圓底燒瓶中，加入適量的蒸餾水，提取4 h，分離出揮發(fā)油層，用無水硫酸鈉干燥，收集于磨口試管中，備用。

2.1 香榧假種皮提取物對(duì)潛葉跳甲的殺蟲活性

香榧假種皮提取物對(duì)潛葉跳甲的殺蟲活性見表1。從表1可以看出，各處理對(duì)潛葉跳甲均有不同程度的殺蟲活性。其中，石油醚提取物的活性最強(qiáng)，當(dāng)濃度達(dá)到200 mg/mL時(shí)處理96 h的校正死亡率達(dá)到100%；其次是氯仿提取物，高濃度（400 mg/mL）的氯仿提取物處理96 h后，校正死亡率也達(dá)到100%。正丁醇和乙酸乙酯提取物的殺蟲活性相對(duì)較低，但高濃度（400 mg/mL）的乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物處理96 h后，校正死亡率也分別達(dá)到了72.22%和88.89%。揮發(fā)油的殺蟲活性也較強(qiáng)，僅次于氯仿提取物，400 mg/mL的揮發(fā)油溶液處理96 h，校正死亡率高達(dá)94.44%。同時(shí)從表1可以看出，隨著處理時(shí)間的延長，成蟲死亡率增加。在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)香榧提取物對(duì)潛葉跳甲的抑制作用主要是拒食，而對(duì)照組明顯有啃食痕跡。各提取物及揮發(fā)油對(duì)潛葉跳甲都有一定的拒食活性，且濃度越高對(duì)潛葉跳甲的拒食率越高，部分藥物高濃度組的葉片基本沒有被啃食的跡象，并最終導(dǎo)致害蟲死亡。

2.2 香榧假種皮提取物對(duì)潛葉跳甲毒力測(cè)定結(jié)果

3 小結(jié)與討論

化學(xué)農(nóng)藥用于防治作物害蟲以來曾為農(nóng)業(yè)增產(chǎn)做出了巨大的貢獻(xiàn)，但如何減少或避免長期廣泛使用農(nóng)藥帶來的殘留、抗性、再猖獗等問題，是世界各國農(nóng)藥研究的發(fā)展趨勢(shì)，而植物來源的殺蟲劑存在著極大的開發(fā)潛力。

本研究利用香榧生產(chǎn)過程中的廢棄物——香榧假種皮提取物，測(cè)定其對(duì)潛葉跳甲成蟲的殺蟲活性。結(jié)果表明，石油醚提取殺蟲物效果最好，且隨著處理時(shí)間的延長成蟲死亡率增加。不同溶劑的提取物的殺蟲效果之間存在差異性，有些組的葉片被啃食較多，而殺蟲效果好的幾組葉片基本沒有被啃食，這可能與各溶劑提取物中的活性物質(zhì)有關(guān)。潛葉跳甲的取食行為被抑制的原因可能是感受器信息輸入中斷，也可能是中樞神經(jīng)特化的“抑食細(xì)胞”受到刺激，亦或兩者兼而有之[8]，生物活性物質(zhì)不同，其作用方式和機(jī)制不同，就會(huì)產(chǎn)生很大的生物學(xué)效應(yīng)差異[9]，都需要作進(jìn)一步研究。

試驗(yàn)中觀察到石油醚提取物飼喂和氯仿提取物飼喂4 d后的死亡率最高，筆者認(rèn)為造成這種現(xiàn)象的原因除了提取物本身的毒性外，還因?yàn)榫苁匙饔檬瓜x體處于饑餓狀態(tài)，體質(zhì)下降而引起死亡。

用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇4種溶劑從香榧假種皮中提取的活性成分及揮發(fā)油均具有殺蟲活性，說明香榧假種皮含有抑制潛葉跳甲的活性成分。本試驗(yàn)確定石油醚以及氯仿提取物的殺蟲效果最好，但目前還無法確定是哪種化學(xué)成分起到殺蟲效果，對(duì)于香榧假種皮殺蟲活性成分的分離純化及鑒定需要進(jìn)一步研究。以上試驗(yàn)結(jié)果均為室內(nèi)生物測(cè)定所得，相關(guān)的田間試驗(yàn)有待進(jìn)一步研究。

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