理囊散中不同提取物的促孕活性研究

李炳　曾云軍　陳韓英　谷新利

摘要：試驗(yàn)比較了中藥復(fù)方理囊散揮發(fā)油提取物、乙醇提取物、水提取物對(duì)21日齡雌性昆明種小鼠子宮系數(shù)和卵巢卵泡發(fā)育的影響。結(jié)果顯示，理囊散乙醇提取物組、揮發(fā)油提取物組小鼠的子宮系數(shù)及大型卵泡的百分比與空白組小鼠相比差異顯著（P<0.05），理囊散水提取物組與空白組相比差異不顯著（P>0.05）。表明乙醇提取物是中藥復(fù)方理囊散中起主要作用的成分，揮發(fā)油提取物次之。

關(guān)鍵詞：理囊散；提取物；小鼠；子宮系數(shù)；卵泡發(fā)育

中圖分類號(hào)：S859.79+3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2013）09-2104-03

中藥復(fù)方理囊散由香附子、女貞子、益智仁等10余味中藥組成，主要用于治療卵巢囊腫和排卵延遲等原因造成的奶牛不孕癥。臨床應(yīng)用證明該復(fù)方促孕效果顯著[1]，副作用小[2]。但作為純中藥散劑，理囊散用藥量大，灌服困難，藥材利用率低，有效成分不明確，不利于質(zhì)量控制和推廣應(yīng)用。

本試驗(yàn)中，通過觀察小鼠子宮系數(shù)和卵巢的變化，比較中藥復(fù)方理囊散揮發(fā)油提取物、乙醇提取物、水提取物的作用效果，旨在為篩選出理囊散的主要活性成分及研制新劑型提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

昆明種21日齡雌性小鼠220只（由石河子大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，分籠飼養(yǎng)，自由飲水和進(jìn)食）。

1.2 藥物與試劑

理囊散揮發(fā)油提取物（自制，每毫升含生藥1.00 g）；理囊散乙醇提取物（自制，每毫升含生藥1.00 g）；理囊散水提取物（自制，每毫升含生藥1.00 g）；苯甲酸雌二醇注射液（上海通用藥業(yè)股份有限公司，每支1 mL，含雌二醇2 mg，批號(hào)：110514）；蒸餾水（自制）。

1.3 儀器

1.4 方法

1.4.1 理囊散不同提取物對(duì)小鼠子宮系數(shù)的影響試驗(yàn) 取21日齡健康雌性昆明種小鼠，體重9～12 g，隨機(jī)分為揮發(fā)油提取物組、乙醇提取物組、水提取物組，每組各設(shè)高、中、低劑量組（劑量分別為6、4、2 g/kg），同時(shí)設(shè)空白對(duì)照組及雌二醇陽性對(duì)照組。空白對(duì)照組灌服等體積蒸餾水；陽性對(duì)照組前3 d灌服等體積蒸餾水，從第四天開始每天腹腔注射雌二醇0.5 mg/kg，連續(xù)給藥7 d。其他各組按不同劑量灌服給藥，每天1次，連續(xù)給藥7 d。各組小鼠于末次給藥后24 h頸椎脫臼處死，剖開腹腔，摘取子宮，除去脂肪組織迅速稱子宮濕重，并計(jì)算子宮系數(shù)（子宮系數(shù)=子宮濕重/體重×100%）[3，4]。

2 結(jié)果與分析

2.1 理囊散不同提取物對(duì)小鼠子宮系數(shù)的影響

2.2 理囊散不同提取物對(duì)小鼠卵巢的影響

理囊散不同提取物對(duì)小鼠卵巢的影響結(jié)果見表2。由表2可見，理囊散乙醇提取物在促進(jìn)小鼠卵泡增長發(fā)育方面效果最好，其次是揮發(fā)油提取物，最后是水提取物。乙醇提取物組、揮發(fā)油提取物組與空白對(duì)照組相比，其大型卵泡的百分比差異顯著（P<0.05），且乙醇提取物組優(yōu)于揮發(fā)油提取物組；水提取物組與空白對(duì)照組相比其大型卵泡的百分比沒有顯著差異（P>0.05）。進(jìn)一步表明理囊散中起主要作用的是乙醇提取物，其次是揮發(fā)油提取物。

3 小結(jié)與討論

采用小鼠子宮增重法檢測藥物的雌激素活性作為一種最常用的評(píng)價(jià)雌激素作用的方法，它具有經(jīng)濟(jì)、方便、省時(shí)、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，某些需要在體內(nèi)代謝、活化才有雌激素活性的物質(zhì)和中間代謝產(chǎn)物也可用該方法檢測[7-9]。其主要原理是子宮含有大量的雌激素受體，雌激素或具有雌激素活性的化合物通過與該受體結(jié)合，可誘發(fā)細(xì)胞內(nèi)反應(yīng)，表現(xiàn)為子宮組織增生[10]。為了減少內(nèi)源性雌激素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響，本試驗(yàn)選用了剛剛斷乳、未性成熟的21日齡雌性小鼠。試驗(yàn)結(jié)果表明，雌性小鼠灌服理囊散乙醇提取物后，其子宮系數(shù)明顯增加，理囊散揮發(fā)油提取物作用效果次之，提示理囊散乙醇提取物和理囊散揮發(fā)油提取物有明顯促進(jìn)小鼠子宮生長的作用。卵泡成熟的程度是衡量卵巢發(fā)育的重要依據(jù)之一[11]，本試驗(yàn)中小鼠卵巢的變化結(jié)果顯示，理囊散乙醇提取物組小鼠成熟卵泡所占的比例最高、卵泡直徑大，與空白對(duì)照組相比差異顯著（P<0.05），其次是揮發(fā)油提取物組，水提取物組成熟卵泡的比例與空白對(duì)照組相比沒有顯著差異（P>0.05）。說明理囊散乙醇提取物、揮發(fā)油提取物能促進(jìn)小鼠卵巢發(fā)育并出現(xiàn)排卵，促使性成熟形態(tài)學(xué)特征提前出現(xiàn)，啟動(dòng)新的發(fā)情周期。

本試驗(yàn)通過測定理囊散不同提取物對(duì)小鼠子宮系數(shù)和卵泡發(fā)育的影響，確定了中藥復(fù)方理囊散中起主要作用的是乙醇提取物，揮發(fā)油提取物次之。該結(jié)果對(duì)改革傳統(tǒng)中藥制備工藝，實(shí)現(xiàn)中獸藥安全、穩(wěn)定、高效、可控的質(zhì)量要求提供了理論支持。但理囊散乙醇提取物、揮發(fā)油提取物都是一種粗提物，其具體有效成分和起主要作用的有效成分尚不明確，還需對(duì)其分離純化后進(jìn)行更進(jìn)一步的研究。

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