高同型半胱氨酸血癥與認知損害的關系研究

楊增云 張?zhí)m娥?盧國華?何冰?范靜波

[摘要] 目的 探討高同型半胱氨酸血癥（hyper-homocysteinemia，Hhcy）與認知損害的關系并探明引起認知損害的機制。 方法 采用酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）檢測30名MCI患者和45名正常老年人的血清同型半胱氨酸（Hcy）、S-腺苷甲硫氨酸（SAM）和S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）的濃度。 結果 MCI組血清Hcy濃度（31.03±12.42）μmol/L、SAH濃度（6.63±1.72）μmol/L與正常組相比差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。SAM濃度（80.10±12.13）μmol/L及MMSE評分（25.45±1.22）分均低于正常組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。同時MCI組Hcy濃度與SAM濃度及MMSE評分均呈負相關，與SAH濃度呈正相關（r=-0.61、-0.57、0.62，P<0.05）。 結論 血清Hcy、SAM和SAH濃度與輕度認知功能障礙具有相關性，Hcy通過抑制甲基化進程影響認知損害。

[關鍵詞] 高同型半胱氨酸血癥；輕度認知功能障礙

[中圖分類號] R743 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2013）06-13-03

輕度認知功能障礙（mild cognitive impairment，MCI）是介于正常衰老和癡呆之間的一種認知缺損狀態(tài)。Petersen等追蹤研究發(fā)現(xiàn)，MCI患者每年約有10%～15%轉化為AD，是AD的高危人群[1]。由于認知功能障礙癥狀給患者本人、家庭及照顧者均造成極大的影響，因此這方面的研究已經(jīng)越來越受到研究人員的關注[2]。多項臨床及基礎研究都已證實Hhcy可致動脈硬化，且為心腦血管疾病的獨立危險因素之一[3-4]。在MCI眾多危險因素中，Hhcy是一個可以有效干預與預防的因素，且MCI階段是預防癡呆的一個最佳時期。本研究通過觀察Hhcy與MCI的關系，了解其對認知損害的影響并為臨床防治MCI提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

于2012年1～2月，參照歐洲AD協(xié)會MCI工作組2006年

提出的新的診斷標準[5]，從濰坊某3個大型社區(qū)選取30例MCI老人，其中男17例，女13例；年齡55～75歲，平均（65.01±8.52）歲；文化程度：小學及以下12例，初中9例，高中6例，大專及以上3例，平均受教育年限（6.50±2.29）年；MMSE評分（25.45±1.22）分。納入標準：（1）患者或親屬主訴認知障礙；（2）患者或親屬報告其認知功能在過去1年里與以往相比出現(xiàn)衰退；（3）臨床評定證明存在認知障礙；（4）沒有嚴重的日常生活能力減退；（5）沒有癡呆。MMSE≥24，CDR=0.5，ADL≤26（21項版本）。排除標準：（1）嗜酒；（2）長期服用精神病藥物；（3）嚴重頭部外傷史；（4）抑郁癥，精神分裂癥，甲狀腺疾病，貧血，維生素B12及葉酸缺乏；（5）糖尿病伴并發(fā)癥；（6）心，肝，腎功能障礙者及近1個月內服用影響血漿Hcy水平的藥物者嚴重的視力和聽力障礙者。選擇同期健康體格檢查者45例為對照組，其中男28例，女17例：年齡55～75歲，平均（67.80±7.23）歲；文化程度：小學及以下18例，初中14例，高中10例，大專及以上3例，平均受教育年限（6.26±3.19）年；MMSE評分（28.65±0.18）分。兩組人員的性別、年齡、受教育程度、身體狀況等一般資料，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。入選老人均知情并同意參與實驗。

1.2 方法

（1）生物學指標測定：受檢對象于清晨空腹抽取周圍靜脈血4 mL，置于加有促凝劑的一次性采血管中靜置1～2 h待血液凝固后3000 r/min離心15 min，分離出血清標本，置于-70℃冰箱保存待測并排除溶血標本。采用ELISA法測定血清Hcy、SAM、SAH的濃度。測定儀為美國Bia-Rad Coda公司生產(chǎn)的全自動板式酶標儀及其配套試劑盒，各項操作具體程序嚴格按照試劑盒的說明書進行。本試劑盒Hcy≥15 μmol/L為Hhcy。每批測定均包括質控樣品。（2）MMSE評分檢查：被檢者同時由研究人員進行MMSE評分測試。MMSE評分包括定向力、記憶力、注意力和計算力、回憶能力、語言能力，共包括5個維度，總分0～30分，每個問題回答正確記1分，回答錯誤或拒絕回答均不得分，評分越高代表認知能力越好[6]。本量表為國際通用的認知功能篩查量表，均經(jīng)過信度和效度的檢驗。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行分析，兩組檢測指標比較采用t檢驗，相關性采用Person相關分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清Hcy、SAM、SAH濃度測定結果及MMSE評分結果

MCI組老人血清Hcy、SAH濃度高于正常組老人，血清葉酸、SAM濃度低于正常組老人，MMSE評分檢查的結果顯示，MCI組老人的得分低于正常組老人的得分，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。見表1。

2.2 相關性分析

將MCI組Hcy濃度與SAM濃度及MMSE評分進行相關分析，結果發(fā)現(xiàn)，MCI組Hcy濃度與SAM濃度及MMSE評分均呈負相關性，與SAH濃度成正相關性，r=-0.61、-0.57、0.62，均P<0.05。

3 討論

同型半胱氨酸（Hcy），是一種含硫氨基酸，是蛋氨酸循環(huán)的重要環(huán)節(jié)和蛋氨酸代謝的中間產(chǎn)物。其合成的具體過程是：蛋氨酸首先形成S-腺苷甲硫氨酸（SAM），SAM去甲基生成S-腺苷同型半胱氨酸（SAH），再進一步脫去腺苷生成Hcy。自從Aba lan等首次報道Hhcy可能是AD的危險因素后，Hcy與認知功能損害及AD的關系逐漸成為廣泛關注的焦點[6]。本研究發(fā)現(xiàn)，MCI組老人血清Hcy、SAH濃度較正常組升高，SAM濃度較正常組降低，結果與以往的研究結果一致[7-10]，表明Hhcy與MCI的發(fā)病有相關性，因此推測低或者正常的Hcy水平可能有效防止MCI向AD轉化，這為臨床治療MCI提供了一個新的方向。研究還發(fā)現(xiàn)，Hhcy患者MMSE的評分顯著低于正常組且Hcy濃度與MMSE評分成負相關，表明Hhcy可能與認知功能的損害有關，Hcy濃度升高一方面抑制SAH的分解而使其水平增高，而SAH作為一種強效甲基轉移酶抑制劑，能減慢腦組織中甲基化過程，使神經(jīng)元對損害和凋亡更加敏感。另一方面Hhcy引起甲基供體SAM缺乏，導致尿嘧啶錯配同時影響了嘌呤和胸腺嘧啶修復DNA損傷的能力，使得神經(jīng)細胞對Aβ所致細胞死亡的敏感性增強，造成Aβ對DNA不可逆的損傷引起認知功能的損害。

綜上Hcy作為甲基循環(huán)的中間產(chǎn)物，主要通過細胞內Hcy濃度升高使細胞內的SAH增加，SAM的含量降低，SAM/SAH的比例降低，導致體內許多甲基化酶如苯基乙醇胺N-甲基轉移酶和兒茶酚-O-甲基轉移酶等的活性降低[11]，抑制體內許多重要的甲基化作用[12-13]，這些重要底物的低甲基化均可導致神經(jīng)細胞功能受損引起認知功能的損害。本研究從高Hcy抑制甲基化過程的機制出發(fā)闡明Hhcy引起MCI認知損害的一個機制，為延緩MCI的認知損害及預防癡呆的發(fā)生起到了重要作用。

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（收稿日期：2013-02-28）