無花果葉中芳香物質的提取工藝研究

3山東省農業(yè)科學院農業(yè)資源與環(huán)境研究所，山東濟南250100）

摘要：采用不同方法對當年采集的新鮮無花果葉中芳香族成分進行萃取，并利用HPLC技術對無花果葉初提物、減壓蒸餾及真空干燥提取物主要成分進行歸一化分析，以補骨脂素得率為指標，探討了不同抽提方法的優(yōu)劣。正交試驗表明，將無花果葉細碎20目，8倍乙醇索氏抽提，回流2次，每次提取2 h補骨脂素及乙醇抽提物得率較高。

關鍵詞：補骨脂素；索氏抽提；真空干燥

中圖分類號：S663.3文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2013）05-0100-03

無花果樹為多年生落葉灌木，其特殊的芳香味不吸引蟲害。現(xiàn)代醫(yī)學研究發(fā)現(xiàn)，無花果葉提取物具有抗腫瘤、抗菌、降血糖、降血脂等多項藥理作用[1，2]。無花果葉揮發(fā)油中主要含酯和醇類，主要成分是香豆素類，其中補骨脂素占很大比例。無花果葉與果實提取物中的天然補骨脂素、佛手柑內酯、苯甲醛已經被證明具有明顯的抗癌活性，目前已作為抗腫瘤治療輔助藥物應用于臨床[3]。

水蒸氣蒸餾是將水蒸氣通入不溶于水或難溶于水但具有一定揮發(fā)性的有機物質中（無花果葉精油具有一定揮發(fā)性）， 使該有機物質在低于100℃的溫度下隨水蒸氣一起蒸餾出來， 再經進一步分離獲得較純物質。

有機溶劑提取法是用適宜的揮發(fā)性有機溶劑直接浸泡無花果葉，經滲透、溶解、分配、擴散等一系列物理過程，將精油從無花果葉中提取出來。用有機溶劑提取無花果葉精油可同時將低沸點和高沸點組分提取出來，從而減少芳香油成分的損失，所得精油的香氣更接近天然無花果的香氣，得率也更高。

本試驗分別用水和乙醇對無花果葉進行初提，然后分別用乙酸乙酯進行減壓蒸餾和用乙醇真空干燥進一步提取香氣的有效成分，并借助高效液相色譜對不同提取方法下無花果葉中補骨脂素的含量進行了測定，最終確定了最佳提取工藝條件。

1試驗材料、設備及主要工藝流程

11試驗材料

以當年從常州日升生態(tài)農業(yè)有限公司無花果基地采集的新鮮無花果葉為試材。

12主要設備

實驗室用提取罐、旋轉真空濃縮器、高效液相色譜。

13工藝流程

新鮮無花果葉→清洗→剪切→殺青烘干→破碎→提取→濃縮。

2試驗方法

將新鮮無花果葉清洗后剪切成2 cm寬的葉條，置于70～75℃烘箱干燥4 h，冷卻后備用。

21無花果葉初提物提取

211水蒸氣蒸餾提取1 kg無花果葉粉碎后水蒸氣蒸餾，按100～200 kg/h 通入蒸氣， 經蒸氣夾帶，精油與蒸氣混合蒸出， 通過冷凝器冷凝變成油水混合液流出。餾出液溫度不高于40℃，得200 g初提物。

212乙醇蒸餾提取200 g無花果葉粉碎后用95%乙醇1 600 ml回流提取2 h。

22初提物中芳香物質的再提取

221乙酸乙酯萃取將水蒸氣蒸餾所得初提物繼續(xù)用乙酸乙酯萃取，體積比（初提物 ∶乙酸乙酯）為2 ∶1。無水硫酸鈉處理后，用減壓蒸餾的方法進一步抽提，溫度50～60℃。

222乙醇萃取將乙醇初提物每次加入1 L 95%乙醇，在80℃下蒸餾2 h，蒸2次。將抽提液采用旋轉真空濃縮器真空濃縮，得到的粘稠狀物質真空干燥8～12 h，濃縮溫度、干燥溫度均設定為45℃。

23芳香物質的化學成分分析

采用GC/MS對無花果葉芳香物質化學成分進行分析。

24不同方法提取的抽提物中補骨脂素的含量測定

采用高效液相色譜法的測定。具體步驟如下。

241標準樣液制備配制補骨脂素標準溶液：補骨脂素200 mg溶解，轉移至500 ml容量瓶中定容，得到04 mg/ml的補骨脂素標準樣液。

242供試品溶液供試品溶液Ⅰ：水蒸氣蒸餾得到的初提物；供試品溶液Ⅱ：乙酸乙酯減壓蒸餾萃取得到的抽提物；供試品溶液Ⅲ：乙醇蒸餾萃取得到的抽提物。

243結果處理記錄峰面積，以補骨脂素標準樣液的濃度為橫坐標，峰面積值為縱坐標，繪制標準曲線，求出每個供試品溶液中補骨脂素的濃度。