銀杏胞質(zhì)抗壞血酸過(guò)氧化物酶基因（APX）克隆及表達(dá)特性分析

程華 李琳玲等

摘 要： 【目的】分離和克隆銀杏細(xì)胞質(zhì)抗壞血酸過(guò)氧化物酶基因GbAPX1 （GenBank 登錄號(hào)為 FJ555021），了解其在銀杏正常組織發(fā)育以及響應(yīng)環(huán)境脅迫和逆境相關(guān)激素誘導(dǎo)的表達(dá)情況。【方法】利用同源克隆及RACE技術(shù)從銀杏葉片細(xì)胞質(zhì)中分離得到GbAPX1全長(zhǎng)cDNA序列，用生物信息學(xué)方法對(duì)獲得的cDNA序列及推測(cè)的氨基酸序列進(jìn)行分析，并用實(shí)時(shí)定量PCR方法研究GbAPX1在不同組織、不同激素和脅迫處理下的表達(dá)模式。【結(jié)果】克隆GbAPX1基因全長(zhǎng)cDNA序列為965 bp，包含一個(gè)759 bp的最大讀碼框，編碼252個(gè)氨基酸；預(yù)測(cè)該基因編碼蛋白質(zhì)分子量為27.6 kDa，其等電點(diǎn)為5.81。系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析表明， GbAPX1和其他裸子植物同源性較高并聚為一類(lèi)。qRT-PCR分析結(jié)果顯示，GbAPX1表達(dá)具有組織和發(fā)育時(shí)期差異性，在成熟葉片和雄蕊中具有最高表達(dá)水平，在莖和嫩葉中表達(dá)水平較低。誘導(dǎo)表達(dá)分析表明，GbAPX1受到激素和環(huán)境壓力誘導(dǎo)。其中，脫落酸、水楊酸、茉莉酸甲酯和紫外輻射均能誘導(dǎo)其轉(zhuǎn)錄上升，而乙烯利和傷害處理對(duì)GbAPX1轉(zhuǎn)錄水平無(wú)顯著影響。【結(jié)論】確認(rèn)獲得序列為GbAPX1基因cDNA序列；GbAPX1不僅參與了銀杏正常的組織生長(zhǎng)發(fā)育，還與一些環(huán)境脅迫和逆境相關(guān)激素誘導(dǎo)表達(dá)有關(guān)。

關(guān)鍵詞： 銀杏； 胞質(zhì)APX1； 脅迫和激素； 調(diào)控

中圖分類(lèi)號(hào)：S664.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1009-9980