DNA定量分析在宮頸癌早期篩查中的應用價值

鐘鍇娜

宮頸癌是婦女最常見的惡性腫瘤，我國每年新發病例約3萬人，占世界宮頸癌新發病例的28.8%，為我國婦女惡性腫瘤第1位。對已婚婦女定期進行宮頸癌篩查是最有效控制宮頸癌的途徑，如何選擇高效、合理、規范、經濟的篩查方法是當前亟待解決的問題[1]。DNA定量分析方法、液基細胞學檢查、雜交捕獲HPV是用于宮頸癌診斷的常用方法，現將三種方法在宮頸癌早期篩查中的優劣性進行分析，并據此找出最佳的篩查手段。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年4月-2012年4月中山市人民醫院婦產科行常規婦檢患者1000例，年齡22~68歲，平均年齡（46.19±10.28）歲；其中<30歲124例，31~40歲284例，41~50歲315例，51~60歲255例，>61歲22例；所有患者均無子宮切除史、無身孕、無盆腔放射治療史。

1.2 研究方法 所有患者進行宮頸脫落細胞DNA定量分析方法、液基細胞學檢查、雜交捕獲HPV三種方法檢測。結果異常時，于陰道鏡下行宮頸定位活檢。病理為金標準，并作組間比較。分析其相關性及各組和相互聯合檢查在宮頸癌早期篩查中的優劣勢。

1.3 檢測方法

1.3.1 DNA定量分析方法 用DI代表細胞核的DNA含量，正常DI數值1~2，即2C~4C細胞。以Auer等的標準為依據，下列情況為不正常：DI>2.5，DI在1.5~2.5的3C、4C細胞，出現非整倍體細胞峰。

1.3.2 液基薄層細胞學方法 經巴氏染色制片，按照2001年TBS報告系統為標準，分為以下五個級別：正常或良性，不明意義的非典型鱗狀上皮，低級別鱗狀上皮內病變，高級別鱗狀上皮內病或原位癌，鱗狀上皮浸潤癌。

1.3.3 雜交捕獲HPV檢測方法 將標本離心后，取沉淀物用聚合酶鏈反應（PCR）檢測標本中的HR-HPV DNA，檢測目前已知的13種HR-HPV DNA（即16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68）。標本 DNA>1.0 ng/L 為陽性[2]。

1.4 統計學處理 采用SPSS 13.0統計學軟件對數據進行分析，計數資料組間比較采用字2檢驗，以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

宮頸脫落細胞DNA定量分析的敏感度、特異度、準確度分別為61.29%，67.52%，73.81%；液基細胞學檢查為77.95%，62.33%，60.57%；雜交捕獲HPV為86.33%，92.15%，90.21%。見表1。

表1 三種檢測方法敏感度、特異度、準確度比較 %

3 討論

傳統宮頸涂片檢查是宮頸癌篩查最常用的檢查方法之一，但該方法容易出現假陰性，診斷的準確率不高。全自動細胞DNA定量分析系統在傳統宮頸涂片的基礎上進行了改進，細胞制片和細胞閱片分析技術顯著提高。其原理為正常細胞（即DNA二倍體細胞）或腫瘤細胞在增殖時，細胞核內的DNA結構和含量都會發生變化。通過測定DNA的周期變化，能夠發現發生惡性增殖的腫瘤細胞。但DNA的含量無法直接用細胞圖像系統進行分析和測量，故先對細胞核染色，再用顯微鏡進行測定，同時用DI進行計量測定。DI=被測細胞DNA含量的數字/正常細胞DNA含量在G0/G1期間峰值的數字[3]。宮頸脫落細胞DNA定量分析與傳統宮頸涂片方法比較，靈敏度、特異度以及準確度均得到提高，但是細胞核的DNA含量容易受病理、化學、物理等因素的影響，如病毒感染、VitB12缺乏、放射線等，引起DNA含量的變化，因此，DNA定量分析仍不能達到準確診斷宮頸癌的要求。

液基細胞學檢查技術也是在傳統巴氏涂片檢測方法的基礎上發展起來的，是在標本取出后立即浸入細胞保存液中，有效避免了細胞過度干燥和丟失引起的誤差，將保存液中的細胞進行程序化處理，可做到薄層涂片均勻一致，方便了鏡下觀察，提高了宮頸異常細胞的檢出率，降低了假陰性的發生率，提高了靈敏度、特異度和準確度。本文研究中，液基細胞學檢查的敏感度高于DNA定量分析，但特異度和準確度低于DNA定量分析，可將兩者聯合應用，以提高診斷結果的準確性。

研究已經證明，HPV病毒感染是導致宮頸癌的重要因素，雜交捕獲HPV-DNA檢測是HPV基因分型檢測的新方法，并且HPV感染的陽性率隨宮頸上皮內病變程度的增加而增高，在宮頸癌發展的預測上有更大的作用[4]。本文研究顯示，雜交捕獲HPV的靈敏度、特異度及準確度均顯著高于DNA定量分析，說明雜交捕獲HPV-DNA在診斷宮頸癌方面具有一定的優勢，但是由于其價格較為昂貴，因此在普查中的應用率較低，可用于治療結果的判斷及預后的預測。

[1] 李沛，許云，杭國琴，等.TCT聯合高危型HPV DNA檢測在宮頸病變篩查中的診斷價值[J].國際檢驗醫學雜志，2012，33（9）：1123-1125.

[2] 侯安麗，張玉娟，邵雪齋，等.液基薄層細胞學和DNA定量分析方法在宮頸癌篩查中的對比分析[J].中國現代醫藥雜志，2012，14（1）：53-55.

[3] 戴永蘭，許霞.DNA定量分析在宮頸癌及癌前病變篩查中的應用[J].疾病監測與控制雜志，2011，5（2）：115-116.

[4] 余琦，李寧，楊江輝，等.TCT技術與HPV分型技術在子宮頸病變篩查中的應用價值[J].標記免疫分析與臨床，2010，17（3）：171-174.