冠心病患者微量白蛋白尿與可溶性糖基化終產物受體的關系研究*

張金霞，林仲秋，李丹輝，張瑩，陳竹君，周典華，周穎玲

研究表明與沒有慢性腎病患者相比，慢性腎病患者動脈斑塊的脂質成份較多，而纖維帽容積較薄，因此慢性腎病患者心血管事件風險明顯增加［1］。越來越多的研究證明，對于腎臟功能輕及受損或僅有微量白蛋白尿(MAU)的患者，即使腎功能正常，其心血管風險也明顯增加［2］。MAU還與動脈結構功能的異常明顯相關［3］，可獨立預測心血管疾病患者死亡風險。

可溶性糖基化終產物受體(sRAGE)是糖基化終產物受體(RAGE)胞外部分，許多臨床研究發現，在動脈粥樣硬化、高血壓、代謝綜合征、風濕性關節炎、老年癡呆癥及糖尿病等患者中，血漿水平明顯降低［4，5］。

冠心病患者中sRAGE水平與MAU的關系目前不明確。本研究旨在通過對冠心病患者進行MAU與sRAGE的關系進行分析，探討二者之間的相關性。

1 對象與方法

1.1 納入人群

自2010-02至2011-04共納入住廣州軍區廣州總醫院149例患者，男性 80例(53.7%)，女性 69例(46.3%);年齡39～80歲，平均年齡60.9歲。所有患者均行冠狀動脈造影。冠狀動脈造影采用經橈動脈入徑Judkins法，行多體位投照獲取照影圖像，由兩位經驗豐富的心導管醫師分別對右冠狀動脈、左主干、左前降支、左回旋支及主要分支管腔直徑狹窄程度進行評價，直徑狹窄＜50%為無意義狹窄，定義為冠狀動脈大致正常(非冠心病組，n=50)，直徑狹窄≥50%為病變血管，定義為冠心病(冠心病組，n=99)。將99例冠心病患者按照有無MAU分為冠心病MAU亞組(n=26)和冠心病非MAU亞組(n=73)。

入選條件:志愿參加臨床試驗并簽署知情同意書;無水、電解質、酸堿平衡失調;排除標準:繼發性高血壓和嚴重肝腎疾病，排除垂體、甲狀腺等內分泌疾病及免疫性和腫瘤性疾病;排除感染等急性疾病。排除大量蛋白尿患者。

1.2 方法

本研究采取觀察性研究，入院后取得患者一般情況(性別、年齡、吸煙史、飲酒史、既往病史)，所有患者測定身高、體重，并計算體重指數［BMI=體重/身高2(kg/m2)］。受檢者空腹12 h后采集清晨靜脈血5ml，置于干燥管中，用低速離心機離心分離血清，采用日本日立7600全自動生化分析儀及其配套的試劑盒統一檢測血常規、空腹血糖、糖化血紅蛋白、谷草轉氨酶、谷丙轉氨酶、總蛋白、白蛋白、甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、肌酐、尿酸等生化指標。餐后2 h血糖于早餐后2 h采集靜脈血3ml，置于干燥管中，離心分離血清后上述儀器分析得出。

MAU及高敏C-反應蛋白檢測方法:149例患者均于入院48 h內收集晚10點至次日晨6點的8 h尿，采用免疫比濁法測定尿蛋白，尿蛋白30～300mg/L定義為MAU。血清高敏C-反應蛋白水平采用免疫比濁法測定。

sRAGE水平檢測:所有入選的患者均采集清晨空腹靜脈血5ml，置于普通離心管，以3000 r/min離心10 min分離血清，以Eppendorf管分裝后置于－70℃冰箱凍存待測。血清sRAGE水平檢測采用酶聯免疫吸附(ELISA)法，試劑盒購自美國R＆D公司。嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

統計學方法:調查資料經質量檢查后進行數據錄入，用SPSS18.0建立數據庫。所用分析方法有:計數資料采用百分率描述，服從正態分布的資料采用均數及標準差描述。計數資料的比較用χ2方法，兩組計量資料的比較用t檢驗，對于非正態分布資料，行對數轉換后，再行t檢驗。冠心病患者MAU與sRAGE關系分析采用多因素logistic回歸分析，取雙側觀察，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 冠心病組和非冠心病組一般情況比較

冠心病組和非冠心病組比較，冠心病組較非冠心病組白細胞高、高密度脂蛋白膽固醇低、甘油三酯高、MAU高，差異均有統計學意義(P均＜0.05)。表1

表1 冠心病組與非冠心病組一般情況比較()

表1 冠心病組與非冠心病組一般情況比較()

項目 非冠心病組(n=50)冠心病組(n=99) P值年齡(歲) 58.9±10.8 61.9±11.1 0.119腹圍(cm) 87.3±11.0 88.7±8.5 0.494白細胞(109/L) 6.8±1.6 8.0±2.4 0.016紅細胞(1012/L) 4.4±0.6 4.5±0.7 0.618血紅蛋白(g/L) 129.6±16.8 136.7±16.3 0.051血小板(109/L) 216.8±68.1 216.8±62.0 1.000谷丙轉氨酶(U/L) 34.6±39.7 36.7±45.1 0.835谷草轉氨酶(U/L) 25.8±14.6 30.0±29.7 0.490總蛋白(g/L) 62.5±5.3 62.0±5.3 0.696白蛋白(g/L) 35.9±4.2 35.6±3.4 0.643總膽固醇(mmol/L) 4.3±1.2 4.1±1.0 0.363低密度脂蛋白膽固醇(mmol/L) 2.6±1.0 2.3±0.7 0.191高密度脂蛋白膽固醇(mmol/L) 1.0±0.3 0.9±0.2 0.042甘油三酯(mmol/L) 1.2±0.8 1.5±0.8 0.049肌酐(μmol/L) 78.4±19.4 97.6±76.4 0.790尿素氮(mmol/L) 5.0±1.7 6.4±3.2 0.275尿酸(μmol/L) 336.6±94.6 368.0±89.8 0.405空腹血糖(mmol/L) 4.8±0.9 4.9±0.7 0.209餐后2 h血糖(mmol/L) 7.1±2.6 6.9±2.1 0.256糖化血紅蛋白(%) 6.4±1.1 7.1±2.0 0.127高敏C-反應蛋白(mg/L) 2.2±5.3 8.3±19.1 0.058尿微量白蛋白(mg/L) 13.1±8.0 38.5±81.3 0.027

2.2 冠心病微量白蛋白尿亞組與冠心病非微量白蛋白尿亞組一般情況比較

冠心病兩個亞組間比較，冠心病MAU亞組較冠心病非MAU亞組白細胞低、lg高敏C-反應蛋白高，差異均有統計學意義(P＜0.05)。表2

表2 冠心病微量白蛋白尿亞組與冠心病非微量白蛋白尿亞組一般情況比較()

表2 冠心病微量白蛋白尿亞組與冠心病非微量白蛋白尿亞組一般情況比較()

注:MAU:微量白蛋白尿

變量 冠心病非MAU亞組(n=26)冠心病MAU亞組(n=73)P值年齡(歲) 62.6±10.4 61.6±11.4 0.704腹圍(cm) 88.0±8.2 89.0±8.6 0.594白細胞(109/L) 8.9±2.6 7.6±2.2 0.024紅細胞(1012/L) 4.3±1.0 4.6±0.6 0.188血小板(g/L) 133.6±20.9 137.8±14.4 0.272總膽固醇(mmol/L) 4.4±1.0 4.0±0.9 0.172低密度脂蛋白膽固醇(mmol/L) 2.3±0.7 2.3±0.7 0.803高密度脂蛋白膽固醇(mmol/L) 0.9±0.2 0.9±0.2 0.471甘油三酯(mmol/L) 1.7±0.9 1.5±0.8 0.180肌酐(μmol/L) 95.8±22.8 79.0±18.7 0.330尿素氮(mmol/L) 5.0±1.5 4.8±1.7 0.061 lg高敏C-反應蛋白(mg/L) 0.29±0.58 0.62±0.73 0.037

2.3 各組可溶性糖基化終產物受體的比較

各組間sRAGE比較:冠心病組(732.6±133.2)明顯低于非冠心病(1055.5±279.5)，冠心病MAU亞組(655.3±121.4)明顯低于冠心病非MAU亞組(760.1±127.0)，差異均有統計學意義(P均＜0.001)。

2.4 冠心病合并微量白蛋白尿與可溶性糖基化終產物受體的logistic回歸分析

對冠心病合并MAU患者進行相關分析，發現尿微量蛋白與sRAGE、白細胞、高敏C-反應蛋白之間有相關性，使用logistic回歸進一步校正白細胞、高敏C-反應蛋白后發現尿微量白蛋白與sRAGE仍有明顯的負相關性(P=0.018，95%可信區間0.992～0.999)。表3

表3 99例冠心病合并微量白蛋白尿患者與可溶性糖基化終產物受體的logistic回歸分析

3 討論

本研究發現冠心病患者、尿微量白蛋白陽性患者sRAGE水平降低，冠心病合并MAU者sRAGE水平明顯低于單純冠心病患者。

心血管疾病嚴重威脅人類的健康，新的心血管危險因素的探索成為目前關注的熱點，最新的研究發現:MAU可能是心血管并發癥和死亡率的強有力的預測因子［6］。

高敏C-反應蛋白是炎癥反應的敏感標記物。全身和局部的炎癥反應都會成為動脈粥樣硬化的基礎，而這將進一步導致各種血管性的終末器官損傷［7］。有研究表明MAU可作為評價內皮功能不全以及亞臨床動脈粥樣硬化的可靠指標，一旦出現MAU，不僅表示腎臟出現了早期損害，同時也提示冠心病的發病風險將明顯增加［8］。

高敏C-反應蛋白和MAU同為心血管疾病的危險因素，有研究［9］顯示:在糖尿病、非糖尿病及肥胖的患者中兩者之間存在一定的關系，我們的前期研究也發現冠心病患者MAU及高敏C-反應蛋白明顯高于非冠心病患者，高敏C-反應蛋白和MAU隨血管病變嚴重程度增加呈現上升趨勢。

RAGE的主要配體有晚期糖基化終末產物(AGEs)、高遷移率族蛋白-1(HMGB-1)、S100/鈣粒蛋白及β淀粉樣肽等［10］。RAGE與配體結合形成受體—配體復合物后，可以通過激活下游的多條信號通路，引起局部氧化應激及炎癥反應水平增加，從而導致血管內皮細胞損傷、泡沫細胞內脂質增生、血液流變學異常等病理過程，參與冠心病的形成和發展［4］。在我們的研究中發現:冠心病患者sRAGE的數值要明顯的低于非冠心病患者，這與其他研究結果一致［4］。目前，sRAGE在冠心病患者中降低的原因尚不明確，但因為sRAGE可以作為誘餌受體與RAGE的配體結合，因此干擾了RAGE配體與RAGE的結合，減少了RAGE信號通路激活所導致的副作用，這說明sRAGE可能會拮抗粥樣硬化的發展。有研究發現:存在冠狀動脈復雜病變的穩定性心絞痛患者sRAGE水平較未存在復雜病變者明顯降低，低血清sRAGE水平是預測穩定性心絞痛患者存在冠狀動脈復雜病變的獨立危險因子，因此sRAGE的減少能促進動脈粥樣硬化的加重及冠心病的進展。

該研究同時顯示冠心病MAU亞組sRAGE水平較冠心病非MAU亞組明顯降低，提示sRAGE水平降低可以預測冠心病伴腎臟損害風險，因此sRAGE可能是預測冠心病風險敏感的新型生物標志物。許多動物實驗已經證明注入sRAGE可以減少炎癥反應，如在糖尿病小鼠中注入sRAGE可以使糖尿病小鼠微血管和大血管損傷均明顯減少［11，12］。在其他動物模型中，注入sRAGE可以阻止腫瘤組織的擴散，可以治療結腸炎，可以恢復傷口的延遲愈合。在轉基因動物模型中，sRAGE也可以減少淀粉樣β肽通過血腦屏障從而抑制老年癡呆癥病理過程。由此可見，sRAGE已經成為糖尿病實驗性治療的一個新方向，也可以成為其他一些血糖水平正常由RAGE介導的疾病的可能的新的治療方向。必須要強調的是，sRAGE除了與AGEs及一些促炎因子結合外，可能其自身還有其他的作用，有實驗也觀察血管細胞分泌sRAGE，因此，sRAGE自身可能也是一個免疫調節劑和活性因子［15］。

本研究顯示冠心病MAU亞組患者sRAGE水平明顯降低，因此研制各種藥物或治療方法提高體內sRAGE水平可能可以給冠心病非MAU亞組患者帶來更多獲益，減少終點事件風險。當然本研究樣本量偏少，仍需要進一步大規模的臨床試驗進一步驗證sRAGE與冠心病伴MAU關系并隨訪sRAGE與終點事件的相關性。干擾RAGE軸，可能成為治療冠心病，減少冠心病并發癥的新的研究方向。

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