青霉素鈉和頭孢唑林鈉與脂肪乳配伍時的含量測定＊

李穎華 ，馬玉樊 ，王 熒 ，張志剛 ，張 宏 ，盧婷利 ，陳 濤 ，3

(1.西北工業大學明德學院，陜西 西安 710124;2.西北工業大學生命學院，陜西 西安 710072;3.陜西脂質體工程技術研究中心，陜西 西安 710075)

青霉素鈉、頭孢唑林鈉是臨床常用的抗生素，使用時大多以葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液等溶劑進行溶解，且以葡萄糖注射液為主，因其除起溶劑作用外還能為患者提供能量。但一些危重患者對葡糖糖的代謝機能受損，持續滴注葡糖糖注射液會造成高血糖癥，甚至酸中毒[1]。脂肪乳注射液是一種胃腸外能量補給劑，具有良好的生物相容性，且對于危重患者能被優先吸收利用[2]。它以大豆油為主要成分，以精制卵磷脂為乳化劑、甘油為等滲劑，經高壓均質而成[3]，臨床上廣泛用于危重患者手術前后的能量供給、營養支持及改善腫瘤患者對化學治療、放射治療的耐受性[4－6]。基于脂肪乳的諸多臨床優點，若其可與抗生素配伍使用，則既具有效兼顧治療和防治感染又能提供身體恢復所需營養和能量的雙重功效，更好地滿足臨床上一些危重患者的需求。因此，本試驗中模擬臨床用法，建立了檢則這兩種常用抗生素分別與10%，20%，30%脂肪乳配伍時含量的方法，同時考察了配伍后24 h內兩種抗生素的含量變化，結果其配伍后穩定性良好，粒徑、電位與pH均不發生改變，對體內外抑菌效果也無影響[7－8]，現報道如下。

1 儀器與試藥

Waters 2695型高效液相色譜儀;Waters 2996型紫外檢測器;Waters 717型自動進樣器;Waters Millennium色譜工作站;TG16A－WS型臺式高速離心機;德國Sartorius pH計。注射用青霉素鈉(華北制藥有限公司，批號為S0911316);注射用頭孢唑林鈉(石藥集團中諾藥業＜石家莊＞有限公司，批號為100208018);10%，20%，30%脂肪乳(西安力邦制藥有限公司，批號分別為1003171，1003083，0910093);乙腈為色譜純，磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、枸櫞酸均為分析純，水為超純水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

青霉素鈉:色譜柱為Agilent HC C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流動相為 0.1 moL/L 磷酸二氫鉀溶液(pH=2.5)－乙腈(70 ∶30)，流速 1.0 mL/min，檢測波長為 225 nm，柱溫為 25 ℃，進樣量為 20 μL。

頭孢唑林鈉:色譜柱為Agilent HC C18柱(250 mm ×4.6 mm，5μm)，流動相國磷酸氫二鈉－枸櫞酸水溶液(各3.8×10－3mol/L)－乙腈(88 ∶12)，流速為 1.0 mL/min;檢測波長為 254 nm，柱溫為25 ℃，進樣量為 10 μL。

2.2 干擾試驗

青霉素鈉:將注射用青霉素鈉按擬訂的流動相稀釋成質量濃度為0.2 g/mL的供試品溶液，用0.22 μm的濾膜過濾后待用。分別精密吸取10%，20%，30%脂肪乳注射液100 μL，置1 mL的離心管中，加流動相至刻度，搖勻后置離心機中8000 r/min離心30 min，取下層澄清溶液用0.22 μm濾膜過濾，備用。將注射用青霉素鈉分別與10%，20%，30%的脂肪乳配伍，質量濃度為1 g/L。將配伍后的溶液各精密吸取100 μL，置1 mL的離心管中，加流動相至刻度，搖勻后置離心機中8 000 r/min下離心30 min，取下層澄清溶液用0.22 μm濾膜過濾，備用。將上述待測液按擬訂色譜條件進樣，結果青霉素鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳配伍后的色譜圖相同;10%、，20%，30%脂肪乳的色譜圖相同。其中青霉素鈉、10%脂肪乳及青霉素鈉與10%脂肪乳配伍后的色譜圖見圖1。可見，10%，20%，30%脂肪乳對脂肪乳中青霉素鈉的檢測無干擾。

圖1 青霉素鈉干擾試驗高效液相色譜圖

頭孢唑林鈉:將注射用頭孢唑林鈉按擬訂的流動相稀釋成質量濃度為0.1 g/L的供試品溶液，0.22 μm濾膜過濾后待用。分別精密吸取10%，20%，30%脂肪乳注射液100 μL，置1 mL的離心管中，加2.1.2項下的流動相至刻度，搖勻后置離心機中8 000 r/min離心30 min，取下層澄清溶液用0.22 μm濾膜過濾，備用。將注射用頭孢唑林鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳配伍，質量濃度為1 g/L。將配伍后的溶液各精密吸取100 μL，置1 mL的離心管中，加擬訂的流動相至刻度，搖勻后置離心機中8 000 r/min離心30 min，取下層澄清溶液用0.22 μm濾膜過濾，備用。將上述待測液按擬訂色譜條件進樣，結果頭孢唑林鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳配伍后的色譜圖相同;10%，20%，30%脂肪乳的色譜圖相同。其中頭孢唑林鈉、10%脂肪乳及頭孢唑林鈉與10%脂肪乳配伍后的色譜圖見圖2。可見，10%，20%，30%脂肪乳對頭孢唑林鈉的檢測無干擾。

圖2 頭孢唑林鈉干擾試驗高效液相色譜圖

2.3 線性關系考察

青霉素鈉:精密稱取注射用青霉素鈉9.6 mg，用流動相溶解并制成質量濃度為 9.6，4.8，2.4，1.2，0.6，0.3，0.15，0.07 5，0.037 5，0.018 7 g/L 的溶液，進樣測定，將峰面積(A)與藥物濃度(C)進行線性回歸，得回歸方程 A=177 490 C+11 142，r=0.999 8。結果表明，青霉素鈉質量濃度在 0.075 ～4.8 g/L 范圍與峰面積呈良好線性關系。

頭孢唑林鈉:精密稱取頭孢唑林鈉16 mg，用流動相溶解并制成質量濃度為 16，8，4，2，1，0.5，0.25，0.125，0.062 5，0.031 3，0.015 6，0.007 8，0.003 9，0.001 9 g/L 的溶液，進樣測定，將峰面積(A)與藥物質量濃度(C)進行線性回歸，得回歸方程為 A=1×106C －98 555，r=0.999 8。結果表明，頭孢唑林鈉質量濃度在0.007 8～8.0 g/L范圍內與峰面積呈良好線性關系。

2.4 加樣回收試驗

精密量取已知含量的各配伍液，準確加入高、中、低3種不同質量濃度的各溶液，測定峰面積(A)，分別代人各自回歸方程計算含量。結果見表1和表2。結果表明，青霉素鈉及頭孢唑林鈉的檢測方法準確可靠。

2.5 精密度試驗

分別取1.0 g/L青霉素鈉溶液及1.0 g/L頭孢唑林鈉溶液，按擬訂色譜條件和方法，連續重復進樣6次，以峰面積考察進樣精密度。結果青霉素鈉平均峰面積為188 412，頭孢唑林鈉平均峰面積為1 432，表明進樣精密度良好。

青霉素鈉:取青霉素鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳的配伍液，在 4 ℃和 25 ℃條件下，分別于 0，2，4，6，24 h 時取樣，按擬訂項下色譜條件檢測并記錄峰面積，代入標準曲線計算青霉素鈉的含量，其含量及隨時間變化情況見表3。經SPSS 17.0統計分析，這些含量間的變化差異無統計學意義。

表1 青霉素鈉加樣回收試驗結果(n=6)

表2 頭孢唑林鈉加樣回收試驗結果(n=6)

表3 青霉素鈉與脂肪乳配伍后24 h內的含量變化(%)

頭孢唑林鈉:取頭孢唑林鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳的配伍液，在 4℃和 25℃條件下，分別于 0，2，4，6，24 h時取樣，按擬訂色譜條件檢測并記錄峰面積，代入標準曲線計算頭孢唑林鈉的含量，其含量及隨時間變化情況見表4。經SPSS 17.0統計分析，這些含量間的變化并差異無統計學意義。

表4 頭孢唑林鈉與脂肪乳配伍后24 h內的含量變化(%)

3 討論

注射用青霉素鈉、注射用頭孢唑林鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳配伍后24 h內配伍液的外觀、pH及粒徑均無明顯變化，表明青霉素鈉、注射用頭孢唑林鈉與脂肪乳配伍不會引起脂肪乳變性，配伍后24 h內未出現漂油和破乳現象。經高效液相色譜法檢測藥物含量沒有因為與脂肪乳配伍而產生變化，并未出現其他吸收峰，表明抗生素沒有發生降解。配伍后脂肪乳和藥物都非常穩定。體外抑菌試驗結果表明，青霉素鈉與頭孢唑林鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳配伍后對藥物的抑菌作用均無影響[7－8]。

本研究為脂肪乳的應用提供了一個新思路，其既保持了本身的補充營養功能又能用作抗生素的溶劑。這樣，既可避免葡萄糖注射液溶解抗生素用于危重患者所帶來的副作用，還可為患者提供足夠的營養支持，改善患者的淋巴細胞活性，有助于患者康復。

[1]Wirtisch M，Wessner B，Spittler A，et al.Effect of different lipid emulsions on the immunological function in humans:A systematic review with metaanalysis[J].Clinical Nutrition，2007，26(3):302 －313.

[2]Bistrian BR.Novel lipid sources in parenteral and enteral nutrition[J].Proc Nutr Soc，1997，56(1B):471 － 477.

[3]陳亭苑，張思源.靜脈脂肪乳劑的應用和進展[J].腸外與腸內營養，1995，2(4):247 －252.

[4]蔣朱明，張思源，王秀榮，等.中鏈甘油三酯對手術后接受腸外營養患者代謝的影響[J].中華外科雜志，2001，39(9):694－697.

[5]黎介壽.我國臨床營養支持的現狀與展望[J].腸外與腸內營養，2000，7(1):1 －3.

[6]Gobel Y，Koletzko B，Bohles HJ，et al.Parenteral fat emulsions based on olive and soybean oils:a randomized clinical trial in preterm infants[J].J Pediatr Gastroenterol Nutr，2003，37(2):161 － 167.

[7]馬玉樊，盧婷利，王汝濤，等.注射用頭孢唑林鈉與脂肪乳的配伍穩定性及對體內外抑菌活性的影響[J].中國新藥與臨床雜志，2012，31(7):406－411.

[8]馬玉樊，趙 雯，王汝濤，等.注射用青霉素鈉與脂肪乳的配伍穩定性及體外抑菌活性檢測[J].中國藥業，2012，21(16):35－36.