頂空氣相色譜法測定唑來膦酸中有機溶劑殘留量

2013-06-07 09:14:56李瑋玲

中國藥業 2013年22期

李瑋玲

(廣東省廣州市藥品檢驗所，廣東廣州 510160)

唑來膦酸是一種特異性地作用于骨的二磷酸化合物，能抑制因破骨活性增加導致的骨吸收，臨床用于治療惡性高鈣血癥，控制惡性腫瘤骨轉移，并能改善多發性骨髓瘤、前列腺癌、乳腺癌、肺癌等惡性腫瘤治療的療效[1－2]，目前主要有注射用唑來膦酸等制劑。唑來膦酸的制備工藝比較復雜，各個廠家所用到的溶劑略有差異，主要使用了甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷和正己烷等。筆者建立了頂空毛細管氣相色譜法測定唑來膦酸中的6種殘留溶劑，方法快速，準確，靈敏度高。

1 儀器與試藥

Aglient 7890A型氣相色譜儀;Aglient G1888頂空進樣器;氫火焰離子化檢測器。甲醇對照品(廣州化學試劑廠，批號為20090905－2，含量不低于99.5%);無水乙醇對照品(廣州化學試劑廠，批號為20100501－2，含量不低于99.7%);丙酮對照品(廣州化學試劑廠，批號為090201－2，含量不低于99.5%);乙腈對照品(天津市協和昊鵬色譜科技有限公司，批號為20090902－2;含量不低于 99.9%);正己烷對照品(Merck，批號為I270991601，含量不低于98.0%);唑來膦酸樣品[山東新時代(批號為090901)，諾華(批號為C0001)，南京制藥廠(批號分別為ZA20090801，ZA20090802，ZA20090803)];試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

采用氰丙基苯基(6%)－二甲基聚硅氧烷(或極性相近，94%)為固定液的毛細管柱為色譜柱;程序升溫:起始溫度40℃，維持10 min，再以每分鐘35℃的速率升溫至220℃，維持5 min;進樣口溫度為250℃;氫火焰離子化檢測器(FID);檢測器溫度為280℃;采用恒壓模式，柱前壓為15 psi，分流比為10∶1;頂空瓶平衡溫度為80℃，平衡時間為30 min，傳輸管溫度為90℃。

2.2 溶液制備

分別取甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷與正己烷各適量，精密稱定，用N，N－二甲基甲酰胺溶液定量稀釋制成每l mL中分別含甲醇 0.3 mg，乙醇 0.5 mg，丙酮 0.5 mg，乙腈 0.041 mg，二氯甲烷0.06 mg和正己烷0.029 mg的混合溶液，搖勻，精密量取2 mL，置頂空瓶中，密封，作為對照品溶液。取樣品約0.2g，精密稱定，置頂空瓶中，精密加入N，N－二甲基甲酰胺溶液2 mL，密封，作為供試品溶液，色譜圖見圖1。

圖1 氣相色譜圖

2.3 方法學考察

線性關系考察:取甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷與正己烷對照品約 1，1.6，1.6，0.14，0.2，0.1 g，精密稱定，置 100 mL 量瓶中，用N，N－二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液，分別取上述貯備液 1，2，3，5，10 mL，分別置 100 mL 量瓶中，用N，N－二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取2 mL，置頂空瓶中，密封，進樣，按上述色譜條件測定峰面積。以對照品質量濃度作橫坐標(X)、峰面積作為縱坐標(Y)，得到各成分測定的線性方程、相關系數及線性范圍見表1。

精密度試驗:分別制備對照品溶液6份，進樣，記錄色譜圖，測定峰面積值。結果甲醇的 RSD為0.8%，乙醇的 RSD為0.8%，丙酮的 RSD為0.7%，乙腈的 RSD為1.2%，二氯甲烷的 RSD為1.0%和正己烷的 RSD為1.0%，表明方法的進樣重復性良好。

穩定性試驗:取同一對照品溶液，分別于0，6，12 h時進樣，記錄色譜圖，測定峰面積值。結果峰面積沒有顯著性變化，表明對照品在12 h內穩定。

表1 殘留溶劑測定線性試驗結果

加樣回收試驗:按標示量的100%設計回收試驗，共測定6份樣品。結果甲醇平均回收率為100.7%，RSD為0.9%;乙醇平均回收率為101.3%，RSD為0.8%;丙酮平均回收率為100.7%，RSD為0.7%;乙腈平均回收率為97.5%，RSD為1.6%;二氯甲烷平均回收率為102.3%，RSD為1.2%;正己烷平均回收率為96.9%，RSD為1.0%。

檢出限測定:在擬訂色譜條件下，在色譜圖主成分的峰高為基線噪音3倍時，甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷和正己烷的檢出限分別為 75.0，60.5，44.6，6.98，11.7 ng/mL 和 7.86 pg/mL。