稽留流產的胚胎絨毛染色體分析

徐婉芳

（東莞市婦幼保健院，廣東 東莞 523700）

稽留流產的胚胎絨毛染色體分析

徐婉芳

（東莞市婦幼保健院，廣東 東莞 523700）

目的 稽留流產是婦科最常見的疾病之一，近幾年來不斷呈現上升趨勢。探討胚胎染色體異常與稽留流產之間的關系。方法 在無菌條件下采集稽留流產患者的胚胎絨毛，利用培養法進行絨毛染色體檢測，并進行分析。結果 在采集的 100例絨毛標本中，成功培養 94例。檢出絨毛染色體異常核型有 62 例，其中數目異常造成的絨毛染色體異常高達 90.32%。結論 染色體異常是導致稽留流產的重要因素之一。胚胎染色體異常的研究，對于了解稽留流產發生的原因以及指導下一次正常懷孕有著非常重要的意義。

稽留流產胎兒；胎兒絨毛；染色體分析

稽留流產（MAB，missed abortion）是自然流產的一種特殊類 型，又稱過期流產或者死胎不下，是臨床妊娠的并發癥之一。稽留流產在早期自然流產中占了一半以上的比例，并且近幾年來不斷呈現上升趨勢。隨著研究的深入，人們發現胚胎染色體異常是導致稽留流產的最為常見的原因之一。染色體異常與稽留流產的關系越來越引起人們的重視[1]。為了探討胚胎染色體異常與稽留流產之間的關系和在分析稽留流產原因中的價值，我們在本院抽取了100名稽留流產患者的胎兒絨毛進行了絨毛染色體檢測，并進行分析。

表1 62例稽留流產胎兒絨毛染色體異常分析結果

1 臨床病例與標本處理

1.1 病例來源

這次抽取的100名患者都是從2011年3月至2012年6月到我院婦科門診就診的稽留流產患者。這些患者年齡均在20～44歲，平均年齡為33歲。患者在懷孕期間感到下腹疼痛的有34人，占到34%的比例，陰道出血有53人，占到53%的比例。這53個人，陰道出血時間最短的是1d，最長的是26d，平均出血4.5d。患者的胚胎已經停止發育，但是胚胎仍然稽留在宮腔里面，經過臨床診斷確定是稽留流產。

1.2 標本處理

絨毛采集一般是在進行無菌人流手術的時候進行。挑選絨毛時應該挑選枝狀絨毛，以防止母體細胞的感染。由于稽留流產通常壞死組織和血塊較多，對采集出來的胎兒絨毛，應先用生理鹽水反復漂洗干凈，再在解剖鏡下仔細分離，挑取絨毛組織。絨毛染色體檢測可以分為直接法和培養法兩種。直接法操作快捷方便，但是難以獲得染色體的中期分裂相，成功率較低。培養法所需時間較長，但是絨毛染色體標本制作成功率很高。在挑取絨毛組織之后把絨毛組織剪成糊狀，放在濃度為0.09mg/mL膠原酶的PRIM-1640中，在37攝氏度恒溫的狀態下靜置0.5～1h。離心11000轉5min，清洗干凈之后再次離心清洗。將絨毛組織分布均勻的接種到培養瓶中，在二氧化碳培養箱中培養3～4d，直至看見絨毛細胞克隆后，再次更換液體。在看到圓形及雙圓形細胞后，按照常規羊水細胞的收獲方法處理絨毛染色體，用固定液固定、離心、滴片。最后，制作成G顯帶染色體，在顯微鏡下分計數10～20個分裂相，分析5～10個細胞的核型，對染色體核型進行命名，Leica染色體分析系統拍照保存。

2 結 果

在對100例稽留流產患者的絨毛染色體檢測中，成功培養94例，培養成功率高達94%。失敗6例，占6%的比例。在94例培養成功的病例中，檢出絨毛染色體異常核型有62例，正常核型32例。在染色體異常中，以數目異常居多，檢測出56例，其中常染色體三體又占據了絕大比例。異常染色體核型具體情況列表如下表1。

3 結 論

精神壓力過大，遺傳基因缺陷，環境因素，母體的不良習慣都會造成稽留流產。稽留流產不僅給患者，也給患者的家庭帶來極大的痛苦和負擔。近幾年來，稽留流產不斷呈現上升趨勢。研究稽留流產的原因已經是當今醫學研究刻不容緩的事情。研究表明，絨毛細胞具有和胚胎組織一樣的遺傳性。人們發現胎兒遺傳因素的缺陷，胚胎染色體異常是導致稽留流產的最為常見的原因之一。大約有一半的稽留流產的原因是因為染色體的異常引起的。染色體異常與稽留流產的關系越來越引起人們的重視。

分析表明，胚胎早期死亡與染色體異常有關，其中數目異常造成的絨毛染色體異常高達90.32%。而在數目異常中，常染色三色體異常所占比例最大。共有38例，約占66%的比例。這主要是因為生殖細胞在減數分裂的時候，染色體沒有進行分離，染色體增多或者減少。這之中，只有大約20%的21三體可以存活出生，其他常染色體的三體性大多會造成流產。在常染色三體中，16號染色體發生異常的概率最高，檢測出8例，占到21%左右。這也可能與16號染色體發生異變頻率較高有關系。這也就說明，染色體異常的胚胎流產也是對胎兒的優勝劣汰的過程。胚胎染色體異常的研究，對于了解稽留流產發生的原因以及指導下一次正常懷孕有著非常重要的意義。

絨毛染色體的長期培養已經在國外成為常規的產前診斷。但在我國，只有是多次稽留流產的患者才會進行胎兒絨毛染色體的分析。而且我國常用的絨毛染色體檢測方法熒光原位雜交技術和微陣列比較基因組雜交技術的檢測費用高昂，如何能夠結合實際，使絨毛染色體的檢測更為快速、簡便，更為普通民眾的經濟能力所能接受，是我們在將來急需解決的問題。

[1]張 穎 新.51例 稽 留 流 產 胎兒 絨 毛 染 色體 分 析[J].臨 床 輸 血與 檢驗,2011,13(2):157-159.

Embryonic Villi Chromosome Analysis of Missed Abortion

XU Wan-fang
(Doangguan Maternal and Child Health Hospital, Dongguan 523700, China)

ObjectiveMissed abortion is one of the most common gynecological diseases, in recent years, constantly showed a rising trend. To explore the embryo chromosome abnormality and the relationship between the missed abortion.MethodsUnder aseptic conditions acquisition missed abortion patients embryonic nap, use culture method for villi chromosome detection, and to carry on the analysis.ResultIn the collection of 100 cases of villi specimens, 94 cases of successful culture. Detection villi anomaly of chromosome karyotype 62 cases, including number abnormality in the nap of chromosome abnormality is as high as 90.32%.ConclusionChromosome abnormality is the leading cause of missed abortion is one of the important factors. Embryonic chromosome abnormality of research, to understand the cause of missed abortion and guiding the next normal pregnancy has a very important significance.

Missed abortion fetal; Fetal nap; Chromosome analysis

R714.21

：B

：1671-8194（2013）05-0048-02