CD44v6和E-cad在舌鱗癌中的表達差異及意義

李正非劉佳柏* 郭婷婷

（1 吉林省通化市人民醫院口腔科，吉林 通化 134000；

2 吉林大學口腔醫學院，吉林 長春 130000；3 遼寧醫學院，遼寧 錦州 121000）

CD44v6和E-cad在舌鱗癌中的表達差異及意義

李正非1劉佳柏2* 郭婷婷3

（1 吉林省通化市人民醫院口腔科，吉林 通化 134000；

2 吉林大學口腔醫學院，吉林 長春 130000；3 遼寧醫學院，遼寧 錦州 121000）

目的 研究舌鱗癌組織中 CD44v6和 E-cad 的表達差異，評價其臨床意義。方法 免疫組化 SP 法檢測 60 例舌鱗癌組織中 CD44v6和 E-cad的表達，應用統計軟件分析數據。結果 CD44v6與臨床分期及頸淋巴轉移呈正相關，E-cad 與臨床分期及頸淋巴轉移呈負相關。CD44v6與 E-cad表達量呈負相關關系。結論 CD44v6與 E-cad 在舌鱗癌組織中表達差異存在統計學意義，兩者可能存在相互作用，共同在舌鱗癌的發生發展，侵襲轉移過程中起作用。

CD44v6；E-cad；舌鱗癌；侵襲轉移

舌鱗癌是口腔領面部常見的惡性腫瘤，在口腔癌中所占比率最高且近年來發病率呈快速上升趨勢。臨床上由于腫瘤生長快，易侵襲，有豐富的淋巴管和血液循環加之舌體的運動頻繁，早期就會發生頸淋巴結轉移，現今治療仍然是以手術切除為主，由于口腔是消化道的始端且組織有限，大范圍切除勢必會影響功能和美觀，給患者帶來極大的痛苦。因此早期診斷和控制舌癌的侵襲性可以提高患者的生存質量。本文通過對舌鱗癌組織中CD44v6和E-cad的表達情況分析探尋二者與舌鱗癌侵襲性的關系及二者之間的相關性。目的在于尋找腫瘤標志物及舌鱗癌侵襲轉移的證據。

1 方法與資料

1.1 標本選擇

選擇2003～2012年吉林省通化市人民醫院保留的76例舌鱗癌的石蠟切片為標本。所有病例術前均為行放化療，術后病理均為鱗狀細胞癌。均保留有完整的臨床資料；其中男69例，女7例，最大年齡82歲，最小年齡41歲，年齡平均為67歲；有淋巴結轉移的患者33例，無轉移者43例。取10例癌緣1cm外的正常組織做為對照。蠟塊制成連續切片，厚度為4μm。

1.2 試劑

鼠抗人CD44v6單克隆抗體上海恒斐生物科技有限公司，E-cad免疫組化SP超敏試劑盒和DAB顯色試劑盒購自北京中杉生物技術有限公司。

1.3 方法

以上所選標本采用免疫組化SP法檢測CD44v6和E-cad的表達，具體操作按照試劑說明書進行。光鏡下觀察，棕黃色顆粒為陽性，無染色者為陰性，陽性細胞的顯色部位為胞質。每張切片可觀察5個高倍視野（×400），每個視野計數200個細胞，共計1000個細胞。按照所染色強弱度及陽性細胞數所占腫瘤細胞總數的百分數計分。染色強度：未染色為0分，淡黃色計1分，棕黃色計2分，棕褐色計3分；陽性細胞數計算：＜5%為0分，5%～25%計1分，26%～50%計2分，＞50%計3分；染色強度得分和陽性細胞數得分相加，總分0～2分者為陰性（-），＞2分者為陽性（+）。

1.4 統計方法

應用SPSS15.0統計軟件，所有數據比較采用χ2檢驗，相關性分析采用列聯表的關聯性分析法，檢驗水準α=0.05，P＜0.05則說明差異有顯著性。

2 結 果

2.1 CD44v6和E-cad兩者表達差異與舌鱗癌臨床病理特點的關系

臨床分期Ⅲ～Ⅳ期的患者組織中的CD44v6的表達高于Ⅰ～Ⅱ期的患者（P＜0.001），組織分化程度低患者的組織中CD44v6表達高于組織分化程度高者（P＜0.001），有淋巴結轉移的患者的組織中CD44v6表達較無淋巴結轉移的患者高（P＜0.05），而組織中的E-cad結果與CD44v6相反。兩者在舌鱗癌組織的表達率與患者年齡不相關（P＞0.05）。見表1。

表1 不同臨床病理特點的舌鱗癌組織中CD44v6和E-cad的陽性表達率

2.3 CD44v6和E-ca表達與淋巴結轉移的關系分析

有淋巴結轉移的病例中CD44v6陽性表達時，E-cad陰性表達率較高為95.45%，CD44v6陰性表達時，E-cad陽性表達率相對較高為68.57%。統計分析顯示，列聯系數r=0.306，P=0.015＜0.05，說明在淋巴轉移的舌鱗癌中兩種蛋白表達具有關聯性。

表2 轉移病例中CD44v6和E-cad兩蛋白表達差異關系

3 討 論

本實驗發現不同的臨床病理學特點的舌鱗癌中CD44v6和E-cad的表達存在差異，臨床分期Ⅲ～Ⅳ期，分化程度低的患者組織中的CD44v6的表達高于Ⅰ～Ⅱ期，分化程度高的患者，而E-cad在Ⅲ～Ⅳ期分化程度低的患者中的表達則低于Ⅰ～Ⅱ期，分化程度高。在出現淋巴結轉移的患者中CD44v6表達明顯高于未出現淋巴結轉移的患者，而E-cad的表達也明顯降低。這與國內外的其他學者的結果相同。如袁天柱等通過免疫組化ABC法檢測肺鱗癌組織及其癌旁組織發現CD44v6不但與腫瘤的發生有關，其陽性還可能預示淋巴結轉移的風險[1]。Lee表明，E-cad在早期，分化高，無浸潤轉移的肺癌組織中表達水平較高，而在晚期分化水平低，有轉移的肺癌組織中表達水平低[2]。Prudkin等也發現肺鱗癌中E-cad表達降低明顯有統計學意義[3]。

CD44是細胞外基質的主要成分，在組織完整性上起作用，CD44v6由于編碼CD44基因片段功能區外的外顯子6發生可變拼接后轉錄而成，被認為與腫瘤的浸潤和轉移密切相關[4]。Stochler等認為CD44v6的過度表達，可使腫瘤細胞牢牢的固定在正常細胞基底膜與細胞外間質中。其穩定性為發展成癌灶創造條件，是腫瘤侵襲和轉移的基礎。同時其表達過度可使腫瘤細胞周圍的透明質酸濃度升高，細胞間質滲透壓升高，吸收過多水份造成細胞外間質結構的破壞，為腫瘤細胞侵襲創造條件[5]。Orian-Rousseau等認為，CD44v6通過與肝細胞生成因子HGF及酪氨酸激酶受體形成復合物來激活Ras信號通路。Ras被激活后會產生細胞增值及抗凋亡作用[6]。E-cad是一種主要表達在上皮細胞上的鈣依賴性跨膜蛋白。它主要起到介導細胞之間相互黏附的作用。同時也對保持細胞間的連接，維持上皮細胞的完整性，誘導上皮細胞分化[7]。二者協同促進轉移的機制可能是當E-cad表達降低時腫瘤細胞間黏附力下降，腫瘤細胞變得松散，單個的腫瘤細胞更容易浸潤到腫瘤周圍的正常組織中，加之高表達的CD44v6使腫瘤細胞固定可促進腫瘤細胞發展成癌灶，從而促進了轉移。

CD44v6和E-cad均與舌鱗癌的發生發展有關，且兩者在腫瘤轉移中存在密切關聯，兩者同時檢測可能更準確的反映預后，為臨床醫師提供更有意義的指導。

[1]袁天柱,賈育紅,楊鯤鵬,等.CD44v6在肺鱗癌中的表達[J].中國腫瘤雜志,2001,4(5):367-370

[2]Lee YC,Wu CT,Chen CS,et al,E-cadherin expression in surgicalogresected non-small cell lung cancers-a clinicopathological study [J].Thorac Cardiorasc Surg,2000,48(5):294-299.

[3]Prudkin L,Liu DD,Ozburn NC,et al.Epithelical-to-mesenchymal transition in the development and progression of adenocarcinoma and squamous cell carcinoma of the lung [J].Mod pathol,2009,22 (5):668-678.

[4]Le Bras GF,Allison GL,Richards NF.CD44 uprequlation in E-cadherin-negative esophageal cancers results in cell invasion[J]. PLoS One,2011,6(11):e27063.

[5]Stockler M,Wilchen NR,Ghersi D,et al.Systematic reviews of chemotherapy and endocrine therapy in metastatic breast cancer [J].Cancer Treat Rev,2000,26(3):151-168.

[6]Orian-Rousseau V,Morrison H,Matzke A,et al.Hepatocyte grouth factor-induced Ras activation requires ERM proteins linked to both CD44v6 and F-actin[J].Mol Biol Cell,2007,18(1):76-83.

[7]田茗源,王標輝,張雄,等腫瘤組織中E-cadherin和Vimentin的表達及其上皮-間質轉化的相關性[J].中國生物制品學雜志,2011, 24(9):1068-1071.

R739.86

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：1671-8194（2013）04-0193-02

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