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五加參沖劑抗疲勞作用研究*

2013-07-20 03:20:30朱愛華張藝芳秦永剛周新民何愛武陜西中藥研究所咸陽712000
陜西中醫(yī) 2013年8期
關(guān)鍵詞:小鼠劑量

朱愛華 張藝芳 楊 鈞 秦永剛 周新民 何愛武 陜西中藥研究所(咸陽712000)

五加參沖劑是在繼承祖國傳統(tǒng)養(yǎng)生理論的基礎(chǔ)上,結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)研究成果,選用陜西地產(chǎn)五加—倒卵葉五加莖為主要原料,配以麥冬、五味子,研制而成的具有抗疲勞作用的保健功能食品。該產(chǎn)品主要原料倒卵葉五加[Acanthopanax obovatus hoo]為五加科植物,主要分布于陜西、甘肅等地區(qū),具有扶正固本、補腎健脾、益智安神功能[1][2],近年藥理研究表明可增強機體非特異性防御能力,具有免疫調(diào)節(jié)、抗衰老、抗疲勞的作用[3]。本實驗旨在研究倒卵葉五加與麥冬、五味子組成的復(fù)方制劑五加參沖劑的抗疲勞作用,為市場應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1 材料和方法 1.1樣品五加參沖劑呈棕色顆粒狀,由陜西利威爾制藥有限公司提供,以蒸餾水配制各劑量濃度,人體推薦用量為14g/人/d。成品中含白砂糖量65%。

1.2 試驗動物 小鼠,雄性,昆明種,由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供,許可證號SCXK(陜)2007-001,體重18~22g。

1.3 儀器與試劑 游泳箱、電子秤、扭力天平、鉛箔、724-1型分光光度計、BS224型半自動生化分析儀、尿素氮試劑盒(北京中生生物研究所生產(chǎn))、血乳酸試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))。

1.4 分組及劑量 將小鼠分為4項試驗。每項試驗50只小鼠,分為5組,每組10只小鼠。五加參沖劑3個劑量組分別為高劑量(7.2g/kg)、中劑量(3.6g/kg)和低劑量(1.8g/kg),溶劑對照組(蒸餾水)和輔料對照組(白砂糖)。其中,五加參沖劑各組分別相當(dāng)于人體推薦用量的30倍、15倍和7.5倍。

1.5 實驗方法[4]購回試驗小鼠后,先進行預(yù)游泳試驗進行篩選。將篩選后小鼠按上述劑量每天灌胃1次,連續(xù)21d,分別對動物進行以下各項指標(biāo)的測定。

1.5.1 負(fù)重游泳試驗:末次給予受試物30min,作小鼠負(fù)重(5%體重鉛箔)游泳試驗,水溫25℃,水深55cm,各組同時進行,記錄各組小鼠游泳時間,計算各組平均游泳時間,結(jié)果進行方差分析。

1.5.2 血清尿素氮測定:末次給予受試物后30min,各組小鼠游泳30min,不負(fù)重,水溫30℃。撈出擦干,摘眼球采血,用BS224型半自動生化分析儀測血清尿素氮,結(jié)果進行方差分析。

1.5.3 肝糖元的測定:末次給予受試物后次日,各組小鼠不游泳,不負(fù)重,處死后解剖取肝200mg,加5%三氯醋酸4mL勻漿1min,3000轉(zhuǎn)/min離心15min后按程序步驟進行肝糖元測定,結(jié)果進行方差分析。

1.5.4 血乳酸測定:末次給予受試物后30min,各組小鼠負(fù)重2%體重鉛箔,水溫30℃,游泳30min,后撈起擦干,安靜15min后摘眼球采血,加抗凝、離心、取血漿按程序用724分光光度計測定血乳酸,結(jié)果進行方差分析。

2 結(jié) 果 2.1 五加參沖劑對小鼠負(fù)重游泳時間的影響

表1 五加參沖劑對小鼠負(fù)重游泳時間的影響(±s)

表1 五加參沖劑對小鼠負(fù)重游泳時間的影響(±s)

注:組間進行方差分析,與輔料對照組比△P<0.05,▲P<0.01;與溶劑對照組比◇P<0.05,◆P<0.01。

組別劑量g/kg n游泳時間(min)溶劑對照-10 14.1±7.22輔料對照-10 14.3±7.21五加參沖劑1.8 10 18.5±9.96五加參沖劑3.6 10 20.5±11.00五加參沖劑7.2 10 25.6±13.45△◇

由表1可見五加參沖劑各劑量組游泳時間均長于輔料對照組和溶劑對照組,高劑量組與輔料對照組、溶劑對照組相比,差異顯著(P<0.05)。

2.2 疲勞小鼠血清尿素氮測定。

表2 五加參沖劑對小鼠血清尿素氮含量的影響(±s)

表2 五加參沖劑對小鼠血清尿素氮含量的影響(±s)

注:組間進行方差分析,與輔料對照組比△P<0.05,▲P<0.01;與溶劑對照組比◇P<0.05,◆P<0.01。

組別劑量g/kg n尿素氮(mg/dl)溶劑對照-10 24.1±2.22▲輔料對照-10 20.1±2.56五加參沖劑1.8 10 16.7±2.36▲◆五加參沖劑3.6 10 17.7±1.76△◆五加參沖劑7.2 10 14.3±1.67▲◆

由表2可見五加參沖劑各劑量組血清尿素氮含量均低于輔料對照組和溶劑對照組,高、低劑量組與輔料對照組相比,差異非常顯著(P ﹤0.01),中劑量組,差異具有顯著性(P ﹤0.05);與溶劑對照組相比,五加參沖劑高、中、低劑量組與其差異非常顯著(P ﹤0.01)。

2.3 疲勞小鼠肝糖元測定。

表3 五加參沖劑對小鼠肝糖元的影響(±s)

表3 五加參沖劑對小鼠肝糖元的影響(±s)

注:組間進行方差分析,與輔料對照組比△P<0.05,▲P<0.01;與溶劑對照組比◇P<0.05,◆P<0.01。

組別劑量g/kg n肝糖元(mg/100g肝)溶劑對照-10 1996±336輔料對照-10 2064±248五加參沖劑1.8 10 2154±211五加參沖劑3.6 10 2280±177△◇五加參沖劑7.2 10 2440±223▲◆

由表3可見五加參沖劑各劑量組肝糖元含量均高于輔料對照組和溶劑對照組,與各對照組相比,中劑量組與其差異顯著(P ﹤0.05),高劑量組與其差異非常顯著(P ﹤0.01)。

2.4 疲勞小鼠血乳酸測定

表4 五加參沖劑對疲勞小鼠血乳酸含量的影響(±s)

表4 五加參沖劑對疲勞小鼠血乳酸含量的影響(±s)

注:組間進行方差分析,與輔料對照組比△P<0.05,▲P<0.01;與溶劑對照組比◇P<0.05,◆P<0.01。

組別劑量g/kg n血乳酸(m.mol/l)溶劑對照-10 12.9±0.82輔料對照-10 12.5±0.72五加參沖劑1.8 10 12.3±0.89五加參沖劑3.6 10 11.9±0.79△◇五加參沖劑7.2 10 11.7±0.94△◇

由表4可見五加參沖劑各劑量組小鼠血乳酸含量均低于輔料對照組和溶劑對照組,高、中劑量組與其差異顯著(P ﹤0.05)。

討 論 本研究以負(fù)重竭力游泳時間為指標(biāo)測定小鼠運動耐力,利用血乳酸(LAC)、血尿素氮(BUN)和肝糖原試劑盒檢測與疲勞相關(guān)的生化指標(biāo),結(jié)果五加參沖劑各劑量組均能延長小鼠負(fù)重游泳時間,高劑量組作用顯著(P<0.05),具有提高小鼠運動耐力的作用,負(fù)重游泳結(jié)果為陽性;顯著提高小鼠體內(nèi)肝糖原的儲備量(P<0.05或P<0.01),降低游泳后小鼠血LAC和血清BUN 的含量(P<0.05 或P <0.01),肝糖原試驗、血LAC和血清BUN 試驗結(jié)果均為陽性結(jié)果。結(jié)論:由倒卵葉五加、麥冬、五味子為原料的五加參沖劑具有增強肌體運動耐力,抵抗疲勞產(chǎn)生和加速疲勞消除等作用。

倒卵葉五加、五味子擅長雙向調(diào)節(jié),增強抗應(yīng)激能力,改善缺氧狀態(tài),在解除骨骼肌疲勞方面作用顯著,麥冬甘、微寒,養(yǎng)陰益胃、潤肺清心,三藥合用相輔相乘,在增強倒卵葉五加的抗疲勞解乏作用的同時,又可減少其燥性。

[1] 李萬波,李強.五加本草考證及其原產(chǎn)地的品種調(diào)查[J].陜西中醫(yī),1984,5(5):40-41.

[2] 馬炳宣.倒卵葉五加對動物壽命的影響[J].西北藥學(xué)雜志,1986,1(1):18-19.

[3] 朱愛華,張藝芳,楊 釣.倒卵葉五加抗疲勞實驗研究[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2013,33(2):92-93.

[4] 衛(wèi)生部衛(wèi)生法制與監(jiān)督司編制.保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范[S].北京:中華人民共和國衛(wèi)生部,2003:87-93.

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