骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在肝纖維化中的作用

李益飛 牟曉洲 項春生

浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，浙江杭州 310003；傳染病診治國家重點實驗室，浙江杭州 310003

臨床慢性肝病所有類型中，肝纖維化為共同病理基礎(chǔ)，可誘發(fā)上消化道出血、肝癌、肝腹水等惡性疾患，對患者的生命健康及生存質(zhì)量造成了嚴(yán)重威脅[1]。肝纖維化必經(jīng)的發(fā)展至肝硬化的階段，為肝臟對慢性損傷的修復(fù)反應(yīng)，在病程轉(zhuǎn)入肝硬化前，可能存在逆轉(zhuǎn)機(jī)會，故選擇一種有效的治療方案，可改善預(yù)后，阻斷惡性近展[2]。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BM-MSCs）在不同誘導(dǎo)條件下可分化成軟骨、脂肪、神經(jīng)等多種細(xì)胞，易分離，遺傳背景相對穩(wěn)定，可在體外大量擴(kuò)增，體內(nèi)植入反應(yīng)較弱，為肝硬化的治療開辟了新的途徑，本文就相關(guān)內(nèi)容綜述如下[3]。

1 肝纖維化中BM-MSCs的研究與臨床應(yīng)用

就目前的臨床研究與應(yīng)用現(xiàn)狀來看，BM-MSCs能夠改善患者肝臟功能，同時減輕肝纖維化程度，進(jìn)而延緩患者肝臟纖維化的發(fā)展進(jìn)程[4-7]。其中有研究證明，BM-MSCs在體內(nèi)外均能夠增強肝細(xì)胞的分化能力，而且還顯示出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝臟細(xì)胞的分化能力更為顯著，而且通過多次臨床試驗都得到證實，BM-MSCs的分化能力并未受到環(huán)境的影響。隨著臨床研究力度的加大，有不少學(xué)者提出，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞其實是一種具有表達(dá)肝系細(xì)胞的表型，在一定的外因作用下，它可以實現(xiàn)向肝細(xì)胞的分化[8-9]。而且在臨床應(yīng)用中，通過低密度脂蛋白與糖原貯積研究也得到證實，其中部分功能性肝臟細(xì)胞均可以經(jīng)過BM-MSCs細(xì)胞分化[10-11]。而這一臨床研究的提出，則為慢性肝臟疾病的臨床治療提供了有效依據(jù)。特別是一些臨床治療難度較大的功能性肝臟疾病，如肝硬化、肝腹水、肝癌等，都可以借助BM-MSCs分化功能來實現(xiàn)治療，并且為治療方法的選取提供了新路徑，進(jìn)而有效降低患者肝臟纖維化程度與進(jìn)展，以此確保患者的生存質(zhì)量[12-13]。以下則是筆者對BM-MSCs臨床應(yīng)用特點與分離方法進(jìn)行的簡要闡述。

2 BM-MSCs特點分析

根據(jù)相關(guān)研究資料顯示，除造血干細(xì)胞分布于骨髓外，還有間充質(zhì)干細(xì)胞存在（MSCs），具有多向分化潛能和自我增殖能力[14]。BM-MSCs除可對基質(zhì)細(xì)胞和血細(xì)胞分化外，還能夠有效的保持體內(nèi)細(xì)胞的內(nèi)胚層分化潛能，進(jìn)而促使上皮、肺臟、神經(jīng)細(xì)胞等細(xì)胞分化[15]。可能由特殘轉(zhuǎn)錄因子決定MSCs分化，誘導(dǎo)條件不同，分化方向也存有差異，誘導(dǎo)條件啟動轉(zhuǎn)錄因子，對分化方向發(fā)揮作用，BM-MSCs的可塑性對大腦、肝臟、心臟等一些器官和骨骼肌等功能和結(jié)構(gòu)恢復(fù)加以促進(jìn)[16]。BM-MSCs除具多向分化的潛能外，還為外源基因的表達(dá)和轉(zhuǎn)染提供了條件[17]。相關(guān)研究顯示，BM-MSCs有可能成為潛在的全身或局部基因治療的傳遞系統(tǒng)[18-19]。且其所攜帶的外源基因表達(dá)組織特異性較明顯，故基因治療和細(xì)胞治療中BM-MSCs均為理想靶細(xì)胞[20]。因此將其應(yīng)用到臨床治療中，就可以有效的提高治療有效性。

3 BM-MSCs分離及標(biāo)面標(biāo)志

臨床目前共4種對MSCs分離的方法，如密度梯度離心法、貼壁篩選法、免疫磁珠分離法和流式細(xì)胞儀分離法[21]。貼壁細(xì)胞分離法污染機(jī)會少、操作簡單，依據(jù)造血系細(xì)胞懸浮生長而BMMSCs貼壁生長特性完成，但所得細(xì)胞純度不足，成分復(fù)雜，可能有雜質(zhì)存在。免疫磁珠分離法和流式細(xì)胞儀分離法可致細(xì)胞完全失去活性，但所需骨髓量大，要求的實驗條件高，較難操作，故限制了臨床應(yīng)用[22]。密度梯度離心法純度高、簡便、對細(xì)胞活性未構(gòu)成明顯，使用最為廣泛。雖BM-MSCs分離培養(yǎng)已成熟，但尚無MSCs特異性標(biāo)志，均以一個細(xì)胞群體形式進(jìn)行，對貼壁篩選法和密度梯度離心聯(lián)合運用，將單個核細(xì)胞利用淋巴細(xì)胞分離液分離出來，再通過BM-MSCs的貼壁生長特性，將未貼壁細(xì)胞除去，以此獲得的BM-MSCs具有更高的性質(zhì)，在均一性、比例方面都顯著提高。不過就相關(guān)資料顯示，BM-MSCs具有非單一性的特征，而且尚無高度特異性表面抗原。

4 小結(jié)

現(xiàn)代組織工程和細(xì)胞工程如BM-MSCs等為人類肝纖維化、肝損傷等肝病的治療提供了新的科研方向。BM-MSCs實用、移植簡便、不存在免疫排斥、費用低，占有較大的優(yōu)勢，已前全球均在著力研究，隨著BM-MSCs定向分化條件和純化技術(shù)等研究的不斷深入，BM-MSCs作為基因和細(xì)胞治療將在臨床安全有效的應(yīng)用。

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