溶血對生化檢驗準(zhǔn)確性的影響及糾正探析

徐建新

（湖南省邵陽縣人民醫(yī)院 湖南 邵陽 422100）

溶血指的是血細(xì)胞中的某些成分進入血漿和血清，使得試驗樣本中出現(xiàn)紅色增加的情況。在生化檢驗中，溶血是對血液標(biāo)本進行臨床檢驗時經(jīng)常發(fā)生的現(xiàn)象之一，標(biāo)本出現(xiàn)溶血的現(xiàn)象，會造成生化檢驗的結(jié)果出現(xiàn)誤差，從而導(dǎo)致臨床診斷出現(xiàn)一定的失誤。

1 資料與方法

1．1 資料：選取我院2012年6月進行體檢的健康人員60例，其中男38例，女22例，年齡均在24－48歲之間，檢測對象各項身體檢查結(jié)果均正常。儀器設(shè)備使用美國貝克曼DXC－600生化分析儀，以及其相應(yīng)的配套試劑。

1．2 方法

1．2．1 標(biāo)本制備：體檢者在24h之內(nèi)沒有進食高脂的飲食，采取清晨空腹采血的方法，使用真空采血管，對60例體檢者分別抽取兩支靜脈血，每支3ml，將其中一支在室溫條件之下放置15min，然后進行離心處理，制備血清。另外一支置于冷凍室中進行1h的冷凍，然后取出進行解凍離心處理，取得上層發(fā)生溶血的血清。分為不同體積的樣本加入正常的血清之中，制成有著不同程度溶血現(xiàn)象的樣本。

1．2．2 檢測方法：依照說明書所標(biāo)注的方法，使用生化分析儀分別對試驗者的不同程度溶血的血清以及正常的血清的AST、ALT、ALP、GGT、ALB、TP、LDH、Ur、Cre、Glu、UA、TC、TG 等21 項生化指標(biāo)進行檢驗。并使用血細(xì)胞分析儀進行實驗者不同程度溶血以及正常血清的血紅蛋白的檢測。

2 結(jié)果

檢測分析結(jié)果表明，和正常血清相比，發(fā)生溶血現(xiàn)象的標(biāo)本中有11項生化指標(biāo)有顯著的差異，結(jié)果發(fā)生了降低或者升高，其中在電解質(zhì)、酶類以及膽紅素等方面有著較大的影響。臨床醫(yī)護人員應(yīng)該在最大限度上防止進行檢驗的標(biāo)本發(fā)生溶血現(xiàn)象，對于已經(jīng)發(fā)生溶血的標(biāo)本，生化檢驗操作人員應(yīng)該采取適當(dāng)?shù)姆椒▽ζ溥M行處理，使得溶血造成的結(jié)果誤差能夠降到最低。

3 討論

當(dāng)前的臨床生化檢驗中，標(biāo)本的溶血是最為常見的影響干擾因素之一。溶血現(xiàn)象可以分為體內(nèi)溶血和體外溶血兩種。體外溶血主要是由物理因素，比如溶血發(fā)生的原因，大部分是抽血過程的不順利，或者標(biāo)本在運送的過程中發(fā)生劇烈的震蕩，以及在血清的分離時其離心的速度過快等；化學(xué)因素，如血樣受到表面活性劑的影響；代謝因素，比如遺傳性的紅細(xì)胞增加等。而體內(nèi)溶血則由物理因素，比如進行血管手術(shù)之后；化學(xué)原因，如疾病以及藥物毒性等因素引起。

溶血對生化檢驗有著多方面的影響。首先，可能對血紅素紅色對比色的分析造成正干擾，使用兩點比色法以及標(biāo)本空白等方法可以部分消除這一干擾。然而血紅素中蘊含的正鐵離子可能和試劑中的氧化劑發(fā)生反應(yīng)，變?yōu)辄S褐色，造成兩點比色法的干擾。其次，血紅蛋白可能對蛋白質(zhì)分析造成正干擾，比如血紅蛋白電泳以及血清總蛋白的測定等方面。另外血紅蛋白還可能對膽紅素的測定產(chǎn)生負(fù)干擾。再次，血液中紅細(xì)胞含有高濃度的LDH、鉀、ACP，這些物質(zhì)在溶血現(xiàn)象中進入血清，會導(dǎo)致血清其濃度的升高，而紅細(xì)胞之內(nèi)某些物質(zhì)的濃度較低，隨著溶血現(xiàn)象，也可能造成血清中這部分物質(zhì)的稀釋，尤其是在重度溶血中，稀釋作用更加不能忽視。最后，紅細(xì)胞之內(nèi)還有著較多的非糖還原物質(zhì)或者有機磷酸酯等，這些物質(zhì)隨著溶血在血清中有著較高的濃度，會對某些檢驗的結(jié)果造成一定的干擾。另外和正常血清的標(biāo)本相比，發(fā)生溶血現(xiàn)象的標(biāo)本中DBIL、TBIL、AST、TP等項目的測定值有著顯著的升高，其原因在于和血漿之中比起來，紅細(xì)胞中LDH 其活性高出180倍，而ALT、AST 物質(zhì)的活性分別是7倍和38倍，CK 活性則比血漿高出14倍。當(dāng)RBC 發(fā)生破裂時，紅細(xì)胞之內(nèi)蘊含的高濃度鉀、血紅蛋白以及多種酶等進入血清，會導(dǎo)致其濃度指標(biāo)發(fā)生異常的增高。釋放進入血清的Hb中珠蛋白等成分可能造成ALB、TP的升高。另外Hb還會造成血清可見光譜中短波吸光度發(fā)生明顯的增高，所使用的分析方法不同，其受到的干擾程度也就不同，使用終點法所受到Hb吸光度的干擾最大，而動力學(xué)方法所受到的干擾則相對較小。

生化檢驗其結(jié)果能否對患者血清的情況進行真實的反映，對臨床治療有著重要的意義。從上述實驗來看，溶血現(xiàn)象幾乎會對所有的檢驗結(jié)果造成干擾和影響。因此在進行標(biāo)本采集、分離、運送以及檢測的過程中，相關(guān)部門應(yīng)該盡量防止人為原因造成標(biāo)本的溶血現(xiàn)象。在抽血之時應(yīng)該盡量選擇合理的穿刺部位，下針應(yīng)該盡量準(zhǔn)確，向試管之內(nèi)注血時不應(yīng)該過快，防止在試管中注入泡沫。在進行血液的存放時不應(yīng)該將在冰箱冷凍室進行存放，以避免融化之后引發(fā)溶血。最重要的一點進行血標(biāo)本的離心時，應(yīng)該使離心速度平穩(wěn)地升高和降低，使其能夠自然地停穩(wěn)。

綜上所述，為了減少誤差和失誤的概率，提高生化檢驗的準(zhǔn)確性，在檢驗中如果有溶血現(xiàn)象發(fā)生，應(yīng)該采取相應(yīng)的措施，首先對于輕度溶血的標(biāo)本可以進行校正，或者重新進行標(biāo)本的抽取，另外，能夠從方法學(xué)上對溶血的影響和干擾進行克服，比如在Hb對吸光度所造成的干擾等方面，能夠使用樣品空白的設(shè)置以及動力學(xué)方法的措施來進行避免。隨著近年來全自動的生化分析儀的不斷普及，對血清標(biāo)本進行溶血的檢查，已經(jīng)成為了試驗中非常重要的質(zhì)量控制環(huán)節(jié)之一。

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