比較P C R檢驗法和細菌培養法用于陰道細菌檢驗的效果

王一葉

廣州市廣空后勤醫院，廣東廣州510000

陰道炎為婦女最為常見疾病之一，由于其起病緩慢，不易引起患者的注意，嚴重會導致腹部及盆腔疾病，甚至不孕[1]。因此對于該病及時有效的診斷，明確致病菌對治療顯得尤為重要[2]。該研究選取該院2012年9月—2013年5月收取的100例患者，于患者陰道后穹窿出采集陰道分泌物，分別用PCR檢查法與細菌培養法做陰道細菌學檢查，比較兩組方法所得結果。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究選取該院收取的100例患者，全部為育齡期婦女，年齡24～48歲，平均年齡（34.13±3.12）歲。所有患者均存在外陰瘙癢、異味、陰道炎以及白帶分泌物增多等現象。

1.2方法

根據該研究所選患者，在其陰道后穹窿處用無菌棉簽取其分泌物放入無菌鹽水中保存，分別用PCR檢驗法和細菌培養法做陰道細菌檢查。

1.2.1 PCR檢驗法 取1 000 μL混有生理鹽水的陰道分泌物置于離心管中離心，1 200 r/min，持續15 min，離心后將所得上清液全部去除。向所得分泌物中加入組織裂解液，放于60℃水浴鍋中，10～15 min 后取出，1 200 r/min，離心 10 min，所得上清液取少許即可用來制作DNA模板。在進行DNA擴增對細菌進行陽性與陰性比較的時候要選取制作一個作為陰性對照，里面除了不加入模板DNA外，其余均相同。在擴增模板DNA時，向其中加入引物、緩沖對、雙蒸餾水以及模板等，放入PCR儀中進行循環。

1.2.2 細菌培養法 將放入生理鹽水中的棉簽上面的陰道分泌物取出，放于培養基中，在CO2孵箱中進行培養，時間為48 h。待長成菌落后將上面光滑、灰色、露滴狀以及半透明樣的菌群挑取出來進行生化鑒定，并且嚴格按照標準執行。

1.3 觀察指標

在兩種實驗方法中，對所測得的細菌種類進行分析統計。

1.4 統計方法

數據全部采用SPSS16.0進行數據分析，計數資料采用χ2檢驗。

2 結果

PCR檢驗法和細菌培養法兩種檢驗方法結果經實驗后得出數據，PCR檢驗法檢驗結果呈陽性者共有78例，其中棒狀桿菌13例，戛納桿菌55例，腸球菌10例，陰性20例，檢出率為79.6%；細菌培養法檢驗結果呈陽性者共有67例，其中棒狀桿菌10例，戛納桿菌50例，腸球菌7例，陰性31例，檢出率為68.3%。由此我們可以得出，PCR檢查法在臨床療效上較細菌培養檢查法有更加準確的檢出率，并且該法在臨床中操作簡便易行，無論是大中型醫院還是社區醫院均可以實行，相反，細菌培養法要求較高，難以廣泛開展。經比較，PCR檢驗法和細菌培養法兩種檢驗方法檢出率差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

表1 PCR檢驗法和細菌培養法兩種檢驗方法結果對照[n(%)]

3 討論

白帶能夠在一定程度上反映婦女的健康狀況，當婦女白帶分泌物增多時應該引起婦女的重視，并到醫院進行檢查。近幾年，由于婦女生活習慣等因素的改變致使婦女患陰道類疾病逐年增加[3]。陰道炎等婦科疾病主要是由于陰道內寄生菌群的失衡引起，正常情況下，陰道內寄居的各種菌群相互平衡，分泌各種物質共同維護著陰道內的菌群穩定，特別是陰道桿菌以及陰道上皮細胞在其中起到關鍵性的作用[4]。當各種因素致使陰道內菌群的失衡，陰道桿菌大量死亡，致使致病菌群在陰道內大量繁殖，消耗了大量糖原等營養物質，是陰道上皮細胞失去應有的代謝而使陰道內酸堿平衡發生紊亂，陰道上皮細胞失去正常的保護屏障功能，引發炎癥，致使陰道炎，外陰瘙癢以及白帶增多等現象[5]。由于其起病緩慢，不易引起患者的注意，嚴重會導致腹部及盆腔疾病，甚至不孕。因此對于該病及時有效的診斷，明確致病菌對治療顯得尤為重要[6]。因此，在日常生活中婦女應該重視外陰的清洗，保持陰道內菌群的正常及穩定。細菌培養法在臨床中一直以來被認為是臨床檢查婦女陰道菌群的金標準，但由于其操作相對PCR檢驗法麻煩，不易操作，實驗室要求相對較高，難以大范圍推廣。PCR檢驗法是臨床中目前新出現的一種檢驗技術，由于其檢出率高，精度準以及較易開展等優點在臨床中近期得到了廣泛的應用[7]。

經實驗后得出數據，PCR檢驗法檢驗結果呈陽性者共有78例，其中棒狀桿菌13例，戛納桿菌55例，腸球菌10例，陰性20例，檢出率為79.6%；細菌培養法檢驗結果呈陽性者共有67例，其中棒狀桿菌10例，戛納桿菌50例，腸球菌7例，陰性31例，檢出率為68.3%。由此我們可以得出，PCR檢查法在臨床療效上較細菌培養檢查法有更加準確的檢出率，并且該法在臨床中操作簡便易行，無論是大中型醫院還是社區醫院均可以實行，相反，細菌培養法要求較高，難以廣泛開展。經比較，PCR檢驗法和細菌培養法兩種檢驗方法檢出率差異有統計學意義（P<0.05）。

綜上所述，在PCR檢驗法和細菌培養法兩種檢驗方法中，應選擇PCR檢驗法。該法有效地避免了臨床中傳統檢查方法費時間，操作過程復雜以及難以在小型醫院以及醫療衛生所中檢出。

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