使用熒光定量PCR檢測孕婦Uu和Ct感染情況分析

吳玉霞

(北海市第二人民醫院檢驗科，廣西 北海536000)

解脲脲原體(Ureaplasma urealyticum，Uu)和沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis，Ct)是可寄居于人體并能引起疾病的病原體。在婦女懷孕期間可導致母嬰傳播，對母體本身、胎兒及新生兒均可造成明顯的不良后果[1]。快速準確診斷非常重要，采用實時熒光定量PCR(Real-time quantity PCR)方法檢測臨床收集的2348份孕婦標本的Uu和Ct，分析孕婦Uu和Ct的感染情況，取得較好效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2006年7月至2013年1月在我常規產前檢查的孕婦2348例,年齡18～38歲。所有被檢查者在此研究前30d均無局部或全身使用抗菌素史。

1.2 標本處理 用無菌棉拭子輕輕擦取患者生殖道宮頸分泌物密閉送檢。將棉拭子放入0.5ml無菌生理鹽水中浸泡10min,充分擠壓洗脫棉簽,吸取200μl放置-20℃保存待檢。

1.3 方法

1.3.1 PCR法 儀器使用杭州博日Line Gene9620自動熒光PCR擴增儀，試劑盒由中山醫科大學達安基因診斷中心提供，操作嚴格按說明書。以Uu或Ct-DNA≥103copies/ml作為判斷陽性的標準。質控物由廣西臨床檢驗中心提供。

1.3.2 培養法 Uu培養、鑒定試劑盒由珠海浪峰生物技術有限公司提供，Ct培養試劑盒由珠海浪峰生物技術有限公司提供，操作嚴格按說明書。

1.3.3 統計分析 將得到的結果應用卡方χ2檢驗分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

檢測的2348例孕婦中，使用實時熒光定量PCR法檢出Uu陽性者920例 (39.18%),Ct陽性者286例 (12.18%)，Uu和 Ct混合陽性者 11例(0.47%)，合計檢出陽性者1217例(51.83%)。培養法檢出Uu陽性者406例 (17.29%)，CT陽性者44例(1.87%)，Uu和 Ct混合陽性者 9例 (0.38%)， 合計459例(19.54%)，結果實時熒光定量PCR法陽性檢出率明顯高于培養法(P<0.05)，見表1。

表1 PCR與培養法的陽性檢出率比較[n(%)]

3 討論

Uu、Ct是介于細菌和病毒之間的病原微生物，是人類泌尿生殖道最常見的寄生菌之一[2]。均能引起女性生殖道感染，相當部分為無癥狀攜帶者，因此令感染者未能引起重視而及時就醫。當孕婦感染時雖沒有不適，但Uu是引起自然流產,而Ct是引起先兆流產的危險因素。且孕婦感染Uu和Ct可引起胎膜早破[3]產生不良的妊娠結局 ,還可通過母嬰的垂直傳播使新生兒發病 ,如新生兒肺炎、結膜炎、中耳炎、陰道炎及腦膜炎等。有文獻報道20~40歲年齡組患者感染率為85.80%是發病的高危人群[4]，而此年齡段也是最佳生育期。本文檢測的2348例孕婦中，1017陽性占43.31，高于國內報道[5]，說明孕婦感染Uu和Ct的幾率相當高。

本文就目前Uu和Ct檢測常用的兩種方法實時熒光定量PCR法和培養法做比較，結果實時熒光定量PCR法陽性檢測率顯著高于培養法法 (P<0.05)。因此本文建議孕期應重視生殖道Uu和Ct感染的檢測，在產科門診建卡時對宮頸分泌物行Uu和Ct常規篩查，且選用實時熒光定量PCR法，及時發現及早治療無癥狀攜帶者，達到預防胎膜早破、早產，降低母嬰病率，提高圍產保健質量，達到優生優育目的。

[1]Mardh PA.Influence of infection with Chlamydia trachomatia on pregnancy outcome,infanl health and life-Jocg sequelac in infected offxpning[J].Best Pruct Res Clin Obatet Cynaecd,2002,16(6):847-864.

[2]馬曉波,宋秀宇,鄭燕青,等.專科患者解脲脲原體的培養結果及耐藥性分析[J].實驗與檢驗醫學,2009,27(6):681.

[3]尤莉芳,蔡惠萍.孕婦生殖道解脲支原體和沙眼衣原體感染與胎膜早破的關系研究[J].蘇州大學學報(醫學版)2011,31(4)684-685.

[4]姚曄,萬瓊,李志紅,等.345例支原體陽性患者病原體分布及藥敏分析[J].實驗與檢驗醫學,2010,28(1):84-85.

[5]梁寶珠,解脲脲原體沙眼衣原體與妊娠結局的關系[J].解脲脲原體沙眼衣原體與妊娠結局的關系[J].河北醫學,2006,(5):401-402.