紫外分光光度計(jì)法測(cè)定石淋通分散片中蘆丁的含量

宋志釗 劉 元* 文志云

1.廣西中醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530022;2.廣西中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530022

石淋通分散片由廣金錢草等藥材組成，是由中華人民共和國(guó)藥典2010一部收載品種——石淋通片改劑型而來，具有清熱利尿，通淋排石之功效。用于濕熱下注所致的熱淋、石淋，癥見尿頻、尿急、尿痛或尿有砂石;尿路結(jié)石、腎盂腎炎見上述證候者［1］。為了控制其質(zhì)量，筆者增加了石淋通分散片中指標(biāo)成分蘆丁的含量測(cè)定方法，結(jié)果令人滿意。

1 儀器與試藥

島津UV-2550紫外分光光度計(jì);HH-s恒溫?cái)?shù)顯水浴鍋 (江蘇金壇儀器廠);水為超純水;其余所用試劑均為分析純。蘆丁對(duì)照品 (中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，供UV含量測(cè)定用，批號(hào)為110753-200413);石淋通分散片3批，批號(hào)為：110905、110906、110907，由貴港市冠峰制藥有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱定在120℃干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品15.2mg，置10ml量瓶中，加65%乙醇5ml，微熱使溶解，放冷，加65%乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，置50ml量瓶中，加30%乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得每 1ml含蘆丁 60.8μg。

2.2 紫外最大吸收波長(zhǎng)及線性范圍考察 精密量取對(duì)照品溶液 1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、6.0 ml分別置10ml容量瓶中，各加醋酸-醋酸鈉緩沖液 (取0.2mol/L醋酸鈉溶液45.2ml，緩緩攪拌加入0.2mol/L冰醋酸溶液至pH5.5，即得)1ml、0.1mol/L 三氯化鋁溶液 1ml，搖勻，加30%乙醇稀釋至刻度，搖勻，在200～400nm范圍內(nèi)掃描其紫外最大吸收波長(zhǎng)，確定為273nm;照分光光度法 (中國(guó)藥典2010年版一部附錄Ⅴ)，以相應(yīng)的試劑為空白，在273nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程 Y=0.035X-0.0067，相關(guān)系數(shù) r=0.9997。結(jié)果表明：蘆丁濃度在 6.08～36.48μg/ml范圍內(nèi)，與吸光度呈良好線性關(guān)系。

2.3 供試品溶液的制備 取本品20片，研細(xì)，混勻，取0.2g，精密稱定，置索氏提取器中，加65%乙醇加熱回流4小時(shí)，提取液濃縮至小體積，轉(zhuǎn)移至100ml量瓶中，放冷，加65%乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，備用。精密量取續(xù)濾液0.8ml，置10ml量瓶中，照測(cè)定法項(xiàng)下的方法，自“加醋酸-醋酸鈉緩沖液 (pH5.5)1ml起，依法測(cè)定吸收度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出供試品中于蘆丁的含量，即得。

2.5 精密度試驗(yàn) 分別吸取同一供試品溶液 (110905)，連續(xù)測(cè)定6次即得。測(cè)得供試品RSD為0.61%。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào) (110905)樣品，按供試品溶液制備方法制備6份，分別進(jìn)樣，測(cè)定，即得。結(jié)果測(cè)得蘆丁為24.8mg/片，RSD=1.88%(n=6)。表明該方法重復(fù)性良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液分別于0、15、30、60、90、120min進(jìn)行測(cè)定，即得。結(jié)果供試品中蘆丁含量的RSD為0.62%，表明供試品溶液在2h內(nèi)保持穩(wěn)定。

2.8 加樣回收試驗(yàn) 取已測(cè)知含量 (24.8mg/片，批號(hào)110905)的供試品0.1g，精密稱定，精密加入13.24mg/ml蘆丁對(duì)照品溶液0.9ml，按供試液制備項(xiàng)下的方法制備。結(jié)果蘆丁平均回收率為97.9%，RSD為1.10%(n=6)，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收試驗(yàn)測(cè)量結(jié)果 (n=6)

2.9 樣品測(cè)定 按供試液的制備及檢測(cè)方法，測(cè)定3批石淋通分散片中蘆丁含量 (mg/片)分別為 25.1、23.6、22.7。

3 討論

采用超聲處理30min、加熱回流1h、索氏提取4h進(jìn)行提取方法考察，結(jié)果采用索氏提取測(cè)得含量結(jié)果最高，故采用索氏提取為提取方法。采用水、65%乙醇、無水乙醇作提取溶劑進(jìn)行考察，用65%乙醇提取所得含量比高，且雜質(zhì)較少，故采用65%乙醇作為提取溶劑。以索氏提取2h、4h、6h，進(jìn)行提取時(shí)間考察，索氏提取4h，測(cè)得含量結(jié)果最高，故索氏提取以4h為好。本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)含量測(cè)定方法合理可行，達(dá)到預(yù)期目的。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典 (2010年版一部)［S］：632.