室內質控和室間質評在微生物檢驗中的應用分析

蘇新娣

室內質控和室間質評是進行臨床微生物檢驗質量控制的兩個大關鍵環節，室間質評需要在室內質控的基礎進行，其水平的高低不僅反映實驗室標本鑒定能力高低的一種重要指標，更是提高檢驗人員工作能力、提高室內質控工作的重要保證[1]。為進一步提高實驗室標本鑒定檢測質量，同時為其他相關單位提供有益借鑒，本研究總結并分析了本實驗室的微生物實驗室室間質評結果。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 室間質評標本來源于X省臨床檢驗中心，時間跨度為 2007～2011 年，共 125 株質控菌株，其中 5 株轉種失敗。本實驗室的儀器和試劑主要包括API微生物臨定系統、全自動微生物分析儀、藥敏試紙、微量生化管以及成品干粉培養基，儀器和試劑均完全符合相關規定，滿足實驗操作要求。

1.2 方法 所有菌株的鑒定依照臨床標本的鑒定要求。依照不同標本轉種不同培養基，依照國家標準培養溫度，將鑒定標本分別放置于（36±1）℃環境當中[2]，標本放置 24 h，對菌落形態進行認真觀察并記錄，如果某些細菌生長不良，則可以根據實際情況適當延長培養時間。革蘭染色之后對菌體形態進行認真觀察，通過菌落形態以及染色性來對其進行初步鑒定，利用API微生物臨定系統或者是全自動微生物分析儀對分純之后的細菌進行全面鑒定；需要進行手工鑒定的個別菌株參照（《全國臨床檢驗操作規程（第 3 版）》，中華人民共和國衛生部醫政司編著）當中的相關規定執行[3]。抗生素敏感試驗的參照標準為美國臨床和實驗室標準協會（CLSI）標準[4]，采用全自動微生物分析儀、ATB試條或者是藥敏試紙擴散法進行檢測。

2 結果

2007～2011 年共接受 125 株質控菌株（5 株轉種失敗）；其中 120 株菌株當中鑒定失誤 12 株（12/120，10.0%），鑒定正確 108 株（90.0%，108/120），其中革蘭陰性球菌鑒定符合率 100%（11/11），革蘭陰性桿菌符合率 92.2%（59/64），革蘭陽性桿菌符合率 76.0%（38/50）；108 株菌株進行抗菌素敏感試驗，總符合率為 94.4%（102/108），革蘭陽性球菌的藥敏符合率 94.1%（48/51），革蘭陰性桿菌的藥敏符合率為 94.7%（54/57）；其中 6 株鑒定失誤，失誤率為 5.6%（6/108），青霉素為失誤率最高的抗菌素，失誤率為 50.0%（3/6）。細菌鑒定失誤原因分析見表 1。

表1 細菌鑒定失誤結果及其原因分析（n=12）

3 討論

微生物實驗室室間質評鑒定失誤原因如下。首先，鑒定手段不完善。診斷血清不全，導致病牛沙門菌等鑒定錯誤。流感嗜血桿菌的鑒定用手工法是比較容易的，由于當時無X因子和V因子，加上過于依賴儀器，最后得出錯誤結論[5]。其次，認知不足。如有些芽孢桿菌需培養 72 h以上才可見芽孢，若取培養 24 h的菌落做革蘭染色必然產生鑒定的方向性錯誤；革蘭染色是細菌鑒定中最基本最簡單的試驗之一，也是最重要的鑒定步驟，如將C群鏈球菌錯檢為溶血隱秘桿菌就屬此。最后，室內質控不到位。靛基質試驗、氧化酶試驗、血漿凝固酶試驗是細菌鑒定最基本也是最重要的幾個試驗，應每周用標準菌株進行監測，防此試劑失控，本室早期對此重視不足，致使出現新型隱球菌錯誤鑒定為白色隱球菌等錯誤鑒定。在藥敏試驗方面，青霉素屬于不穩定的藥物，本室對其監測不嚴，加之無低溫冰箱導致保存不當，故錯誤率較高；其次藥敏紙片質控不嚴導致其余藥敏試驗失誤的原因，所以，日常工作中嚴格規范的操作，做好藥敏紙片室內質量控制，不合格的紙片及時報廢處理[6]，并做好記錄，購買時要做好計劃，不宜購買過多，另購買藥敏紙片時不要選擇在炎熱的夏天購買，否則會造成一些藥敏紙片失效，并且建議選擇一些藥敏紙片種類齊全的有資質的廠家，便于監控。

要解決以上問題，首先，微生物室的專業技術人員要不斷進行知識更新，人員要相對穩定，穩定便于經驗的積累，只有及時地了解和掌握新的理論知識與先進的檢測技術，才能夠不斷提高檢測水平。其次，微生物室要不斷完善檢測手段。要加強與臨床的聯系，了解其需求，開設更多的新檢測項目，以提供更準確、更快捷、更完善的報告服務于臨床。最后，室內質量控制制度和SOP文件建立后必須嚴格執行，在執行的過程中要不斷的對其進行修訂和完善。

總之，實驗室菌株鑒定、藥敏試驗均會出現一定的失誤，導致實驗室細菌鑒失誤的原因較多，為了提高微生物實驗室的常規工作水平、細菌學診斷水平、質量控制水平以及工作人員專業能力水平，非常有必要開展微生物室間質量評價工作。

[1]牛華，王天朝，謝穎夫，等.室內質控實時在線監控方案的設計和實施[J].臨床檢驗雜志，2011，29（7）：490-491.

[2]萬臘根，張世錕，胡意，等.兩種方法設置室內質控限值時室內質控的結果分析[J].國際檢驗醫學雜志，2011，32（6）：692-693，695.

[3]衛生部醫政司.全國臨床檢驗操作規程[M].南京：東南大學出版社，2006：30.

[4]Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) Performance goals for the internal quality control of multichannel hematology analyzers;Approved Standard H26-A.940 1996

[5]虎淑妍.微生物實驗室 5 年室間質評結果總結分析[J].國際檢驗醫學雜志，2012，33（15）：1869-1870.

[6]閻金香，徐超，周曉滬，等.臨床生化檢驗室間質控三年結果的評價[J].新疆醫科大學學報，2009，32（6）：739-740，743.