兩種肺炎支原體特異性抗體IgM檢測方法的比較

王旭華

肺炎支原體(mycoplasma pneumoniae，MP)是一種能在無生命培養(yǎng)基上自行生長繁殖，介于病毒和細(xì)菌之間最小的不易染色的無細(xì)胞壁原核微生物[1]。通過飛沫以氣溶膠微粒的形式傳播，可引起肺炎支原體肺炎(MPP)。MPP約占各類肺炎總數(shù)的20%以上，5～20歲年齡段的發(fā)病率較高，且一年四季均可發(fā)病。近年來，其感染發(fā)生率呈上升趨勢。由于肺炎支原體感染的臨床癥狀不明顯，X射線征象缺乏特異性，臨床常采用實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)方法檢查予以確診。為了確保臨床對肺炎支原體感染檢測的及時(shí)準(zhǔn)確，選用一種高靈敏、高特異性、快速、經(jīng)濟(jì)的方法顯得尤為重要[2]。本文采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)與免疫膠體金法(GIA)對我院2011年10月至2012年8月540份疑似MP感染患者血清標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行平行檢測，并依據(jù)檢測結(jié)果對兩種方法的診斷效果及臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行分析評估，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器 科華ST-360全自動(dòng)酶標(biāo)儀，瑞美RW-1600自動(dòng)洗板機(jī)。

1.2 標(biāo)本來源 選自2011年10月至2012年9月烏蘭察布市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科采集的門診及住院疑似MP感染患者血清標(biāo)本540份。血清采集后，即置-20℃保存。

1.3 試劑 酶聯(lián)免疫法(ELISA)采用上海滬尚生物科技有限公司生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫法測定抗肺炎支原體(IgM)試劑盒;免疫膠體金法(GIA)采用福建三明博峰生物科技有限公司生產(chǎn)的肺炎支原體IgM抗體檢測試劑盒。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法 ①先將采集的540份血清標(biāo)本用被動(dòng)顆粒凝集法(PPA)(采用利弗奧(香港)醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)的賽樂迪亞MYCOII肺炎支原體抗體診斷試劑盒)結(jié)合CRP測定、血象分析及肺部X線檢查進(jìn)行定性檢測。②將采集的疑似MP感染患者血清標(biāo)本540份，分別進(jìn)行酶聯(lián)免疫法(ELISA);及免疫膠體金法(GIA)肺炎支原體特異性抗體IgM平行檢測，具體檢測方法、結(jié)果判斷，均嚴(yán)格按照相應(yīng)試劑盒說明書執(zhí)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清屬性測定結(jié)果 經(jīng)上述綜合檢測分析，測定疑似MP感染患者血清標(biāo)本540份，其中，MP陽性174份，陰性366份，將此次綜合檢測結(jié)果作為比對的參照標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 兩種血清學(xué)檢測方法結(jié)果的比較 酶聯(lián)免疫法(ELISA)在真陽性(TP)、假陽性(FP)、真陰性(TN)、假陰性(FN)等方面與免疫膠體金法(GIA)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，檢測結(jié)果見表1。

2.3 兩種血清學(xué)檢測方法評價(jià)指標(biāo)的比較 評價(jià)指標(biāo)包括:假陽性率(FPR)、假陰性率(FNR)、敏感度(Sen)、特異度(Spe)、陽性似然比(+LR)、陰性似然比(-LR)、陽性預(yù)測值(PPV)、陰性預(yù)測值(NPV)、約登指數(shù)(Youden index)及總符合率(Coincidence rate)等10項(xiàng)，經(jīng)對比檢測結(jié)果表明，酶聯(lián)免疫法(ELISA)在各項(xiàng)指標(biāo)對比中優(yōu)于免疫膠體金法(GIA)。見表2。

表1 兩種血清學(xué)檢測方法結(jié)果的比較(n)

表2 三種血清學(xué)檢測方法評價(jià)指標(biāo)的比較(n，%)

3 討論

肺炎支原體(MP)是引起支原體肺炎的病原體，是介于細(xì)菌和病毒之間的具有厭氧性并能獨(dú)立生存最小微生物。無細(xì)胞壁，含有DNA及RNA，通過飛沫以氣溶膠微粒的形式傳播。肺炎支原體侵入呼吸道后其表面膜上的P1蛋白質(zhì)粘附于呼吸道上皮細(xì)胞表面，并伸出微管插入細(xì)胞內(nèi)吸取營養(yǎng)、損傷細(xì)胞黏膜，繼而釋放出核酸酶、過氧化氫等代謝產(chǎn)物引起上皮細(xì)胞的溶解、腫脹直至壞死，而引起肺炎支原體肺炎(MPP)[3]。由于MP感染的臨床表現(xiàn)及X線征象均缺乏特異性，只能通過實(shí)驗(yàn)室對病原體分離與培養(yǎng)、血清學(xué)檢驗(yàn)及PCR技術(shù)等診斷方法進(jìn)行確診。實(shí)驗(yàn)室MP的分離培養(yǎng)的方法雖然可以作為臨床確診的依據(jù)，但標(biāo)本分離操作復(fù)雜，并需要較長時(shí)間培養(yǎng)且陽性檢出率低，不易作為臨床快速診斷的方法[4]。PCR診斷技術(shù)檢測的敏感度(Sen)、特異度(Spe)均高于其他方法，但費(fèi)用相對較高，不適于基層醫(yī)院開展。目前，MP的診斷主要依靠血清學(xué)檢測IgM方法，而MP-IgM是機(jī)體被肺炎支原體感染后最早出現(xiàn)的抗體，選擇一種能快速、高效檢測MP-IgM的方法，有利于早期診斷[5]。本文采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)與免疫膠體金法(GIA)2種目前實(shí)驗(yàn)室檢測MP-IgM常用的方法，對540份疑似MP感染患者血清標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行平行檢測，結(jié)果顯示，2種方法都具有高敏感度、高特異度且操作簡便，均可用于臨床早期快速診斷MP，通過對2種檢測方法10項(xiàng)評價(jià)指標(biāo)的比較，ELISA法優(yōu)于GIA法，2種方法聯(lián)合應(yīng)用可為臨床提供更客觀、更準(zhǔn)確的檢測結(jié)果，提高M(jìn)P診斷符合率，以減少假陰性(漏診率)和假陽性(誤診率)的危害。

[1]楊雪梅，陳永權(quán)，顧德林.252例支原體肺炎血清抗體檢測報(bào)道.臨床肺科雜志，2009，14(12):1580-1581.

[2]俞善春，張宏俠，尹敢，等.三種血清學(xué)實(shí)驗(yàn)方法對肺炎支原體抗體檢測的比較.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(1):85-86.

[3]孔東輝，王輝，李榮利，等.兩種肺炎支原體測定方法在臨床診斷中的應(yīng)用.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8(22):2813-2814.

[4]吳曉，鄭穎，趙志鋼，等.被動(dòng)凝集法檢測肺炎支原體抗體的實(shí)驗(yàn)室研究.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2009，19(12):2886-2888.

[5]熊偉，鄒麗芬，趙心宇.兒科呼吸道疾病中肺炎支原體感染的結(jié)果分析.中國微生態(tài)學(xué)雜志，2009，21(12):1123-1124.