HMGB1在panc-1荷瘤裸鼠束縛應激模型移植瘤中的表達及意義

姜旭平，李玉軍 (青島大學醫學院附屬醫院病理科，山東 青島 266003)

胰腺癌是一種惡性度高、預后極差的惡性腫瘤，患者5年生存率不足2%，各種綜合因素導致腫瘤發生和惡化。筆者旨在探討心理應激對panc-1荷瘤裸鼠移植瘤中高遷移率族蛋白1(HMGB1)蛋白水平的影響，現將具體情況報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料:人胰腺癌細胞株panc-1(中國協和醫院微生物實驗室);BALB/C(nu/nu)裸小鼠，雄性，4～6周齡，體質量15～18 g(上海斯萊克實驗動物有限責任公司);HMGB1抗體和caspase3抗體(北京博奧森生物技術有限公司)等。

1.2 方法:①建立裸鼠胰腺癌移植瘤束縛應激模型:裸鼠飼養在相對無菌的環境中，將20只裸鼠隨機分為兩組:單純荷瘤組(a組)和荷瘤加應激組(b組)，每組10只。b組在腫瘤后給予束縛(每天10:00AM～6:00PM，共2周)，a組正常活動。結束后處死全部裸鼠，取移植瘤，具體步驟參考文獻［1-3］。②免疫組化:采用PV-6001法，按試劑盒說明書進行操作。結果判定:HMGB1表達于腫瘤細胞核，細胞質中有微量表達，具體判定標準按許良中等所述［4］。

1.3 統計學處理:所有數據采用 SPSS16.0軟件進行分析。數值資料以均數±標準差(±s)表示，采用t檢驗;等級資料采用非參數統計秩和檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 荷瘤裸鼠體質量和瘤質量:實驗前兩組裸鼠體質量差異無統計學意義，a組實驗后體質量為(21.78±1.40)g，b組實驗后體質量為(20.26±1.10)g，兩組比較差異有統計學意義(t=2.713，P＜0.05)，束縛應激使裸鼠體質量增長緩慢。與a組相比，束縛應激可使移植瘤質量明顯增加［(0.96±0.41)g比(1.45 ±0.42)g，t=-2.685，P ＜0.05］。

2.2 免疫組化結果:b組移植瘤組織中HMGB1的陽性表達顯著高于 a組(Z=-2.500，P ＜0.05)，詳見表1。

表1 兩組裸鼠移植瘤組織中HMGB1的表達

3 討論

HMGB1是與染色體結合的非組蛋白成分之一，對維持核小體結構的穩定有著非常重要的意義，HMGB1可積極參與DNA復制、轉錄和修飾，對類固醇激素受體、NF-kB、P53等蛋白的轉錄進行有效調節。有報道認為，HMGB1參與腫瘤發生發展的機制可能包括:①HMGB1的過表達引起某些基因表達失調，從而導致腫瘤表型;②HMGB1的過表達可使獲得腫瘤表型的細胞免于凋亡，導致腫瘤發生;③通過與相關受體相結合(主要為RAGE和Toll-樣受體4)、改變細胞性能、調節細胞外基質降解、調節血管新生、調節炎性微環境等方式促進腫瘤的侵襲和轉移。本實驗結果顯示，b組移植瘤組織中HMGB1的陽性表達顯著高于a組，提示應激能刺激腫瘤細胞產生HMGB1蛋白促進腫瘤的發生和發展。其機制可能是應激狀態引起神經內分泌及免疫功能改變，進而引起體內神經內分泌介質和細胞因子的釋放失控，而HMGB1基因的轉錄調控與幾種類固醇激素有關，其中包括GC，而且IFN-γ、TNF-α、成熟THP-1巨噬細胞中轉化生長因子-β和人外周血中單核細胞能上調HMGB1的轉錄［5］。

總之，本文研究結果表明，心理應激促進PANC-1荷瘤裸鼠移植瘤生長的機制可能是通過激活神經內分泌信號傳導通路，上調HMGB1的表達而實現的。

［1］黃 鵬，王春友，吳河水，等.胰腺癌細胞株PANC-1中腫瘤干細胞生物學行為的研究［J］.中國普通外科雜志，2008，17(9):865.

［2］湯志剛，孫振陽，胡何節，等.TFPI22對胰腺癌細胞體內和體外侵襲能力的影響［J］.中國普外基礎與臨床雜志，2008，15(1):46.

［3］余立群，劉福軍，高國蘭，等.人卵巢上皮性癌荷瘤裸鼠不良心理應激模型的建立［J］.中國腫瘤臨床，2009，36(20):1187.

［4］許良中，楊文濤.免疫組織化學反應結果的判斷標準［J］.中國癌癥雜志，1996，6(4):229.

［5］蘇衛民，畢明宏.高遷移率族蛋白B1的表達與腫瘤侵襲性的關系［J］.臨床肺科雜志.2011，16(2):245.