QueCHERS法檢測毛豆中苯醚甲環唑的殘留量

毛久浪，王 玨，毛晨蕾，吳慧明

(浙江農林大學農業與食品科學學院，浙江臨安 311300)

苯醚甲環唑 (difenoconazole)，化學名為順，反-3-氯-4-［4-甲 基-2-(1H-1，2，4-三 唑-1-基 甲基)-1，3-二啞戊烷-2-基］苯基4-氯苯基醚，結構如圖1所示［1－2］。屬于三唑類內吸性殺菌劑，主要抑制麥角甾醇的生物合成，破壞細胞膜的結構與功能［3］。多用于防治豆類、小麥、馬鈴薯、瓜果類、果樹等作物的真菌病害。

圖1 苯醚甲環唑結構式

近年來，因出口毛豆中苯醚甲環唑殘留超標引發的外貿退賠問題時有發生，而商品毛豆中苯醚甲環唑殘留的檢測方法和相關標準未見報道。已報道的苯醚甲環唑殘留檢測方法多數是關于土壤和水體的［4－6］，或農產品中殘留的快速檢測［7］。

QuEChERS是近年使用的1種農藥殘留快速檢測方法，適用于各種分子結構和極性農藥殘留的提取凈化，具有提高分析速度、減少試劑用量、適于自動化分析，且靈敏、簡便、快速、高效等的獨特優勢［8］。運用QueCHERS法檢測苯醚甲環唑也有相關報道，但與氣相色譜-質譜的聯用［9－10］，使成本升高和普及性下降。因此，結合QuEChERS前處理的方法，優化儀器檢測條件，旨在通過建立普通GC-ECD法，快速準確檢測毛豆樣品中苯醚甲環唑的殘留量。

1 材料與方法

1.1 材料

采自杭州、臨安、寧波、諸暨4個產地的68批次毛豆產品。

1.2 儀器與試劑

島津GC2010氣相色譜儀 (ECD檢測器)帶自動進樣器，色譜柱 HP-1(30 m×0.32 mm×0.25 μm)，食品加工機 (4184，博朗電器)，高速勻漿機 (T25D，IKA)，TDL-5-A離心機 (上海飛鴿公司)，高速冷凍離心機 (R21，熱點)。

丙酮、乙酸乙酯、乙腈、氯化鈉和硫酸鎂均為市售化學純試劑;N-丙基乙二胺 (PSA，上海月旭)，苯醚甲環唑標準品 (≥98%，上海振翔)

1.3 樣品處理

1.3.1 樣品預處理

將待檢測的毛豆或帶莢毛豆樣品與純水按質量比1∶1混勻后，在食品加工機中勻漿混勻，取200 g混合物，待測。

1.3.2 樣品前處理

稱取勻漿后的樣品10 g，置于50 mL離心管內，加入10 mL乙腈，劇烈振蕩1 min，加入1 g氯化鈉和4 g硫酸鎂，劇烈振蕩1 min。3 000 r·min－1離心3 min，取1.5 mL上清液于裝有50 mg PSA和250 mg硫酸鎂的2 mL離心管中，劇烈振蕩1 min，4 ℃10 000 r·min－1離心1 min，取1 mL 上清液至試管，N2吹干后用1 mL乙酸乙酯溶解殘留物，待測。

1.4 儀器條件

色譜柱:Agilent HP-1石英毛細管柱 (30 m×0.32 mm×0.25 μm);載氣:高純N2(≥99.999%);進樣口280℃，檢測器290℃，柱箱初始溫度160℃，以20℃·min－1升到255℃，保持6 min，再以50℃·min－1升到270℃保持6 min;每分鐘柱流量5 mL，尾吹30 mL，不分流進樣1 μL。在上述儀器條件下，苯醚甲環唑的保留時間為9.8 min。

1.5 添加回收方法

稱取空白對照樣品10 g，分別添加適量的苯醚甲環唑標準溶液，將樣品中濃度設為0.001，0.010和0.100 mg·kg－1，每濃度重復5次，按1.3.2節方法測定苯醚甲環唑殘留量，并計算添加回收率。

2 結果與分析

2.1 標準曲線與線性相關性

準確稱取10 mg苯醚甲環唑標準品于10 mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容至刻度。用乙酸乙酯分別稀釋為0.001，0.005，0.010，0.050 和 0.100 mg·kg－1的標準溶液，并在上述儀器條件下進樣檢測，以進樣濃度為橫坐標，ECD響應值為縱坐標，繪制標準曲線 (圖2)。苯醚甲環唑的回歸方程為y=3 229x－0.366 2，相關系數r=0.999。

圖2 苯醚甲環唑標準曲線

2.2 方法的精確度與精密度

在上述樣品處理方法和儀器條件下，苯醚甲環唑的最低檢測濃度為0.001 mg·kg－1。當添加濃度為0.001，0.010和0.100 mg·kg－1時，按上述方法和步驟進行檢測。毛豆仁和帶莢毛豆的平均添加回收率80.8%～95.6%和90.7%～101.9%，相對標準偏差(RSD)為1.7%～4.9%和9.3%～14.8%(表1)。苯醚甲環唑的精確度和準確度，變異系數都在《農藥殘留試驗準則》允許范圍內，說明方法符合農藥殘留分析與檢測技術要求。

表1 苯醚甲環唑的添加回收

2.3 毛豆樣品中苯醚甲環唑殘留量的檢測

我國暫未規定毛豆中苯醚甲環唑的最大殘留限量標準 (MRL)，CAC則規定了干大豆中為0.020 mg·kg－1。將檢測結果從低到高列于表2中。結果顯示，在檢測的68批次樣品中 (20個毛豆仁樣品，48個帶莢毛豆)，毛豆仁中苯醚甲環唑的殘留量均低于 0.020 mg·kg－1，最高為0.011 mg·kg－1(寧波4);4個毛豆仁樣品中苯醚甲環唑殘留量低于0.001 mg·kg－1，占20%。13個帶莢毛豆樣品的苯醚甲環唑殘留量大于0.020 mg·kg－1，最高達到0.126 mg·kg－1，超標率達27.1%。

試驗結果顯示，杭州、臨安、寧波、諸暨4產地毛豆仁中苯醚甲環唑的殘留量都較小，只有寧波的1個樣品超出0.010 mg·kg－1，但低于MRL值。毛豆仁中平均殘留量以寧波略高，達0.005 mg·kg－1，杭州最小，為0.003 mg·kg－1。帶莢毛豆中苯醚甲環唑的殘留量明顯高于毛豆仁，杭州、臨安、寧波、諸暨4地的超標率分別為25%，25%，33%，25%，未檢出率分別為16.7%，25.0%，8.3%和16.7%;寧波和諸暨平均殘留量分別為0.023 和0.022 mg·kg－1，高于 MRL。

3 小結與討論

試驗結果表明，用QueCHERS和GC-ECD法可快速檢測毛豆樣品中苯醚甲環唑的殘留量。對68個不同產地的毛豆仁和帶莢毛豆檢測結果顯示，不同地區因耕作制度、用藥習慣、氣候條件等的差異，苯醚甲環唑在毛豆上的殘留量有一定差異。在諸暨和寧波，帶莢毛豆中的殘留量較高，12批次樣品的均值大于0.020 mg·kg－1;同時，帶莢毛豆殘留的苯醚甲環唑明顯高于毛豆仁。前者各地均值0.013～0.023 mg·kg－1，毛豆仁則為 0.003 ～0.005 mg·kg－1，僅為帶莢時的18% ～31%。由此表明，去莢可有效去除殘留于豆莢上殘留的苯醚甲環唑，降低食用毛豆時暴露于苯醚甲環唑的風險。

表2 毛豆和帶莢毛豆中苯醚甲環唑的殘留量

［1］Yu Y J，Shi D，Dai D J，et al．Pesticide was put into totally［M］．Beijing:Agicultural Press of China，2008:239－240．

［2］李海華，廖福廣，王鵬，等．殺菌劑苯醚甲環唑的制備［J］．北京理工大學學報，2006，26(4):365－368．

［3］Khan M F R，Smith L J．Evaluating fungicides for controlling Cerosporaleaf spoton sugar beet［J］．Crop Prot，2005，24:79－86．

［4］安晶晶，劉新剛，董豐收，等．苯醚甲環唑在番茄和土壤中的殘留動態研究［J］．環境科學研究，2009，22(7):688－692．

［5］張志勇，王冬蘭，張存政，等．苯醚甲環唑在水稻和稻田中的殘留［J］．中國水稻科學，2011，25(3)339－342．

［6］馮雪玲，紀然，曹維良，等．氣相色譜法測定水和土壤中苯醚甲環唑的殘留量［J］．化工環保，2007，27(1):93－96．

［7］王雯，梁穎，錢建亞，等．液相色譜-質譜聯用檢測番茄中苯醚甲環唑殘留 ［J］．江蘇農業學報，2011，27(3):668－671．

［8］邵華，金芬，楊錨，等．QuEChERS方法在我國農藥殘留分析中的應用與前景 ［J］．農藥質量標準，2007:120－122．

［9］薛曉航，戴守輝，張璐珊，等．QuEChERS/GC-MS快速分析土壤中的苯醚甲環唑殘留 ［J］．農藥學學報，2010，12(3):309－312．

［10］胡西洲，程運斌，胡定金．QuEchERS法測定蔬菜中有機磷類農藥多殘留分析 ［J］．中國測試技術，2006，32(3):132－133．