梔子水提取物對實驗性2型糖尿病大鼠血糖及同型半胱氨酸水平的影響

周瑞華，王虹玉，喇萬英，唐詠梅，寧鴻珍，康瑞雪，夏 青

河北聯合大學，唐山 06300

隨著我國人口老齡化及生活方式的改變，糖尿病(diabetes mellitus，DM)［1］也已經成為一種常見病和多發病。糖尿病導致的病殘、病死率僅次于癌癥和心血管疾病，成為危害人類健康的第三頑癥，嚴重危害社會和家庭，已受到世界各國的高度重視，其中糖尿病慢性并發癥特別是糖尿病大血管病變，是糖尿病病人致殘和死亡的主要原因。

梔子(Gardenia jasminoides Ellis)為茜草科植物梔子的干燥成熟果實。早在《藥性論》中有記載“除熱及消渴口干”，其中解消渴與2型糖尿病有關。日本學者 Kimura［2］和 Miura［3］最早報道了梔子中的環烯醚萜苷具有降糖作用。本實驗的目標就是研究和探討梔子提取物對實驗性2型糖尿病大鼠的血糖、血脂及同型半胱氨酸的作用。

1 試驗材料

1.1 動物

SPF級健康雄性wistar大鼠，體重(180±20)g，購自北京華阜康生物科技股份有限公司，中國醫學科學院中國協和醫科大學實驗動物研究，合格證號為SCXK(京)2010-0004。

1.2 藥品

梔子購自安國市，經喇萬英教授鑒定為正品。制備方法:水提2次，合并濾液過濾，濃縮，干燥，粉碎。鹽酸二甲雙胍，規格0.5 g/片，20片/盒，由中美上海施貴寶制藥有限公司提供，批號1007000。

1.3 試劑

鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)Sigma公司提供，批號S0130，購自北京博愛港商貿中心，-24℃保存。用檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液冰浴下配置成1%的STZ溶液，現配現用;STZ緩沖液，包括檸檬酸(FW:210.14)及檸檬酸鈉(FW:294.10)，天津市北方天醫化學試劑廠生產，批號20090302。其配法:0.1 mol/L的檸檬酸及檸檬酸鈉溶液，按1:1的比例混合，調節 pH4.2 ～4.5［4］，并用孔徑為 0.45 μm 的微孔濾膜過濾。AGM-2300型唐博士血糖儀(A8H4316)及唐博士血糖試紙(北京唐博士醫學科技有限公司)，血糖試紙，批號 S09F15202;膽固醇(TC)試劑盒，批號20100907;甘油三酯(TG)試劑盒，批號20100728;高密度脂蛋白膽固醇(HDLC)試劑盒，批號20100702;低密度脂蛋白膽固醇(LDLC)試劑盒，批號20100702;均為北京北化康泰臨床試劑有限公司出品;大鼠同型半胱氨酸試劑盒(Hcy)。

1.4 儀器

AGM-2300型唐博士血糖儀(A8H4316)及唐博士血糖試紙(北京唐博士醫學科技有限公司)，血糖試紙，批號S09F15202;北京唐博士醫學科技有限公司;FDV型原泰奇氣引式粉碎機，佑崎有限公司;JM5102型電子天平及JM型電子分析天平，浙江余姚紀銘稱重校驗設備有限公司;日立7180全自動生化分析儀，日本日立公司。

2 試驗方法

2.1 分組與造模

正常Wistar大鼠70只，適應性喂養1周后，隨機抽取10只作為正常對照組，普通維持飼料喂養，其余大鼠高糖高脂飼料喂養，喂養4周后，禁食不禁水12 h 后，ip 30 mg/kgSTZ 造模［5］，7 d 后，尾靜脈采血測血糖，其空腹血糖≥11.1 mol/L為造模成功。棄掉未成模大鼠，將成模大鼠隨機分為模型對照組(ig同體積生理鹽水)、鹽酸二甲雙胍組ig 0.5 g/kg、梔子提取物組(低、中、高劑量組以生藥計分別為 0.2、0.4、0.6 g/kg)，每組 10 只。

2.2 觀察指標

給藥4周后，腹主動脈取血測空腹 FBG、TC、TG、LDLC、HDLC 及 Hcy。

2.3 數據處理

3 試驗結果

3.1 對FBG的影響

表1的結果顯示，用藥前，與正常組相比，模型組大鼠的血糖值顯著升高，說明造模成功。梔子提取物3個劑量組用藥4周后，均可使糖尿病大鼠的血糖明顯降低，并且用藥前后大鼠的血糖值有顯著性差異(P ＜0.05)。

表1 梔子提取物對糖尿病模型大鼠血糖的影響(n=10，)Table 1 Effect of gardenia extract on blood glucose of diabetic rats(n=10，)

表1 梔子提取物對糖尿病模型大鼠血糖的影響(n=10，)Table 1 Effect of gardenia extract on blood glucose of diabetic rats(n=10，)

注:▲表示與正常對照組比較，P＜0.01;*表示與模型對照組比較，P＜0.01;#表示用藥前后組間比較，P＜0.05，下同。Note:Compare with normal comparison group，▲meant P ＜ 0.01;Compare with model treatment group，*meant P ＜ 0.01;Compare with between group，#meant P ＜0.05，below was the same.

組別Group數量No.用藥前空腹血糖值The fasting blood glucose before administration(mmol/L)用藥后空腹血糖值The fasting blood glucose after administration(mmol/L)正照組 Normal comparison group 10 5.10 ±0.48 5.14 ±0.19*模 型 組 Model treatment group 10 20.39 ±1.23▲ 22.91 ±1.70#梔子低劑量組 gardenia-L 10 20.30 ±1.54▲ 12.98 ±1.67*#梔子中劑量組 gardenia-M 10 20.54 ±1.83▲ 12.19 ±1.63*#梔子高劑量組 gardenia-H 10 20.83 ±1.85▲ 10.88 ±1.25*#鹽酸二甲雙胍組 metformin hydrochloride group 10 21.90 ±6.13▲ 11.23 ±1.24*#

3.2 對 TC、TG、LDLC、HDLC 的影響

由表2的結果可見:與正常對照組相比，模型對照組組大鼠的TC、TG、LDL含量均顯著升高(P＜0.01)，HDL明顯下降(P ＜0.01);給藥后各組大鼠的TC、TG、LDL含量均降低，HDL含量升高，與模型對照組大鼠相比，有顯著性差異(P＜0.01);各給藥組間比較，差異無顯著性(P＞0.05)。

表2 梔子提取物對糖尿病大鼠血脂的影響(n=10，)Table 2 Effect of gardenia extract on blood lipids of diabetic rats(n=10，)

表2 梔子提取物對糖尿病大鼠血脂的影響(n=10，)Table 2 Effect of gardenia extract on blood lipids of diabetic rats(n=10，)

組別Group數量No.膽固醇cholesterol(mmol/L)甘油三酯triglycerides(mmol/L)高密度脂蛋白High density lipoprotein(mmol/L)低密度脂蛋白Low density lipoprotein(mmol/L)11 0.92 ±0.05 0.87 ±0.12模型組 Model treatment group 10 5.48 ±0.34▲ 2.26±0.25▲ 0.41±0.05▲ 2.04±1.58▲梔子低劑量組 gardenia-L 10 2.87±0.26▲＊ 1.67±0.21▲＊ 0.77±0.06▲＊ 1.62±0.14▲＊梔子中劑量組 gardenia-M 10 2.90±0.26▲＊ 1.67±0.18▲＊ 0.75±0.08▲＊ 1.65±0.08▲＊梔子高劑量組 gardenia-H 10 2.85±0.21▲＊ 1.67±0.18▲＊ 0.77±0.09▲＊ 1.62±0.06▲＊鹽酸二甲雙胍組 metformin hydrochloridegroup 10 2.80±0.31▲＊ 1.66±0.11▲＊ 0.71±0.10▲＊ 1.56±0.05正常組 Normal comparison group 10 1.71 ±0.09 0.89 ±0.▲＊

3.3 對Hcy的影響

由表3的結果可見:模型對照組大鼠的同型半胱氨酸顯著高于正常對照組大鼠(P＜0.05)，給藥后，各組的同型半胱氨酸降低，與模型對照組相比，有顯著性差異(P＜0.05)，但與正常對照組比較，仍有差異(P ＜0.05)。

表3 梔子提取物對糖尿病大鼠同型半胱氨酸的影響(n=10，)Table 3 Effect of gardenia extract on homocysteine of diabetic rats(n=10，)

表3 梔子提取物對糖尿病大鼠同型半胱氨酸的影響(n=10，)Table 3 Effect of gardenia extract on homocysteine of diabetic rats(n=10，)

組別Group數量No.同型半胱氨酸Homocysteine(μmol/L)正常組Normal comparison group 10 5.46 ±1.35模型組Model treatment group 10 10.25 ±1.28▲梔子低 劑量組gardenia-L 10 8.21±1.51▲＊梔子中劑量組 gardenia-M 10 8.26±1.81▲＊梔子高劑量組 gardenia-H 10 7.56±1.48▲＊鹽酸二甲雙胍組metformin hydrochloride group 10 7.35 ±1.21▲＊

4 討論

2型糖尿病動物模型的建立，是研究糖尿病發病機制及治療糖尿病的藥物篩選的基礎。高脂高糖飲食誘導結合STZ建立的2型糖尿病動物模型［7］，不僅縮短了造模時間，而且成功率高，方法簡單易行，是最接近人類2型糖尿病的模型。

近年來，國內外很多學者在研究糖尿病與血脂代謝的關系時發現，大部分糖尿病病人伴有繼發性高脂血癥，因此動脈粥樣硬化的發病率較高。又有研究表明，同型半胱氨酸是心血管疾病發病的一個獨立危險因素。本實驗結果表明，梔子提取物各治療組均能降低由鏈脲佐菌素導致的糖尿病大鼠的血糖水平，還能降低LDLC及升高HDLC，調節大鼠的血脂，并且降低糖尿病大鼠同型半胱氨酸水平，對預防和治療糖尿病和糖尿病并發癥有一定的作用。

糖尿病是目前尚無根治方法的一種慢性代謝性疾病，需長期甚至終身用藥?；瘜W藥物在治療糖尿病及并發癥方面雖效果明顯，但長期服用可能會損害肝腎，引起過敏，腹脹、惡心嘔吐、乳酸性酸中毒等不良反應。梔子作為國家衛生部規定的藥食同源食品之一，既是藥物，又是食物，長期服用無毒副作用。綜上所述，本次實驗為以后開發研制藥食同源的輔助降血糖、降血脂及治療和預防并發癥的保健食品提供了實驗基礎。

1 Jiang P(姜斐)，Shi H(士輝).Traditional Chinese medicine in the treatment of diabetes overview.Chin Wild Plant Res(中國植物野生資源)，2009，28(5):1-5.

2 Kimura Y，Okuda H，Arichi S.Effect of geniposide isolated from Gardenia jasminoides on Metabolil Allerations in high sugar diet-fed rats.Chem Pharm Bull，1982，30:4444-4447.

3 Miura T，Nishiyama Y，Ichimaru M，et al.Hypoglycemic activity and structure-activity relationship of iridoidal glycosides.Biol pharm Bull，1996，19:160-161.

4 Yang JJ(楊金晶)，Yang QP(楊秋萍).The study of the Streptozotocin induced diabetes animal model.J Kunming Med Univ(昆明醫學院學報)，2008，29(2B):164.

5 Sun GJ(孫桂菊)，Wang SK(王少康)，Zhang XQ(張小強)，et al.Type II diabetic rat model and the complications of diabetes elated indicators.Shanghai Lab Animal Sci(上海實驗動物科學)，2003，23(2):79.

6 Wang BW(王保偉)，Li Y(李穎)，Liu XH(劉曉紅)，et al.High fat feeding time and STZ doses in experimental type 2 diabetic rat model of influence.Health Res(衛生研究)，2011，40:100-106.

7 Shi H(施紅)，Jin GQ(金國琴)，Yu WZ(余文珍).Induction of constructing the best similar to human type 2 diabetes rat model method.Chin J Clin Rehab(中國臨床康復)，2005，9(39):69-71.