Bio-Oss結合Bio-Gide修復牙槽臨界骨缺損的效果

李 晉 王秉新 (武警總醫院臨床教研室，北京 100039)

很多口腔急癥都會造成牙列或牙槽骨局部缺損，或長期牙缺失等造成牙槽嵴吸收變窄變平，使修復治療及正畸治療難以實施，嚴重影響患者的生活質量和心理健康〔1〕。重建缺損牙槽突的方法主要有自體骨移植、引導性骨組織再生、牽引成骨等。近年來，應用具有骨誘導性、骨傳導性以及骨生成性的植入材料充填骨缺損，引導骨再生已成為研究的熱點〔2，3〕。Bio-Oss骨粉是一種自體骨替代物質及骨組織再生支架，是很好的骨移植材料，而Bio-Gide膜是一種可吸收生物膜，被宿主吸收不需取出，為骨細胞提供附著載體，不僅利于成骨，而且能夠加速骨缺損愈合〔4〕。兩者聯合應用，對骨缺損及再生有積極促進作用。本實驗通過動物自身對照，觀察Bio-Oss/Bio-Gide在兔下頜牙槽骨臨界骨缺損修復中的成骨效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 健康成年新西蘭大白兔8只，雌雄各半，體重2.0～2.7 kg，4～6月齡，由蘭州大學醫學實驗中心提供。

1.1.2 藥品及試劑 Bio-Oss骨粉，Bio-Gide骨膜(北京雅特盛邦科技有限公司);無水CaCl2分析純(北京天然生物有限公司);3.8%枸櫞酸鈉(北京康普匯維科技有限公司);速眠新Ⅱ(北京豐臺區動物衛生監督所);利多卡因(山東華魯制藥有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 建立兔下頜牙槽骨臨界骨缺損模型 動物稱重，以速眠新Ⅱ按0.30 ml/kg的劑量，肌肉注射麻醉。常規消毒，鋪巾，于下頜第一磨牙近中牙槽嵴頂及頰舌側局部麻醉，暴露下頜第一磨牙牙頸部及近中牙槽嵴頂骨質，高速渦輪牙鉆機鉆骨，使骨段恰好分離，撬斷骨連續，大約深6 mm，去骨完成后，消除尖銳骨嵴，使其平整，手術形成長×寬×高為5 mm×4 mm×6 mm的骨缺損〔5，6〕。整個手術過程嚴格無菌操作，防止感染。

1.2.2 分組及干預 采取自身對照，隨機選擇一側下頜骨，以Bio-Oss/Bio-Gide修復骨缺損為實驗側;另外一側只給予生理鹽水不進行修復設為對照側。實驗側:先給予Bio-Oss骨粉混合(約0.05g/術區)，形成凝膠狀，再覆蓋 Bio-Gide骨膜約6 mm×6 mm，覆蓋范圍超出骨缺損邊緣2 mm以上〔7〕，褥式縫合固定骨膜，間斷縫合牙齦。對照組給予等量的生理鹽水同上方法及步驟植入縫合。

1.2.3 術后處理 連續1 w給予青霉素40萬單位，肌肉注射，1次/d預防感染。觀察感染狀況，因兩側下頜骨均有創傷，對照觀察創傷恢復狀況，適量給予流質飲食，持續1～2 w，視其飲食及創傷恢復情況，再恢復正常喂食。

1.2.4 標本采集與處理 于分別于1、4、7、10 w處死動物，每個時間點各處死2只，取下頜植骨區包括周圍牙齒、牙齦，10%甲醛溶液固定，常規脫鈣，脫水，石蠟包埋，連續切片，行蘇木精-伊紅染色，光鏡下觀察牙周缺損愈合情況。

1.2.5 觀察指標 定性分析:新骨形成組織學觀察，植骨材料的吸收降解情況。定量分析:隨機取2張切片選擇3個視野，測定兩組新骨形成面積占視野總面積的百分比。

1.3 統計學方法 應用SPSS13.0軟件進行分析，數據資料以±s表示，采用t檢驗。

2 結果

2.1 大體標本觀察 新西蘭大白兔均存活，直到觀察點處死。缺損區軟組織愈合均良好，兩側均未見感染及糜爛。實驗側2只Ⅰ級愈合，1只Ⅱ級愈合，1只Ⅲ級愈合，對照側2只Ⅱ級愈合，2只Ⅲ級愈合。

2.2 Bio-Oss、Bio-Gide修復前后臨界骨缺損模型改變 實驗建立的臨界骨缺損模型，對照組自行修復11 w后，缺損區只見短而小的骨小梁，骨髓腔彌散稀薄，甚至局部缺如，未形成骨橋連。見圖1a。Bio-Oss/Bio-Gide修復術后1 w，可見復合材料周圍有一薄層新骨，成骨細胞排列規則有序，纖維結締組織包繞的新骨和骨粉顆粒明顯可見，成骨活躍(圖1b);術后4 w時，較對照側新骨形成多，成骨細胞多見，成骨活躍(圖1c)。術后7 w時，新骨形成逐漸增多，骨邊緣規則，骨小梁連接成網狀結構，植骨材料逐漸減少，吸收邊緣可見(圖1d);術后10 w時，大片的骨組織形成，骨板排列更加規則，且血供豐富，植骨材料可見更少，吸收更多(圖1e)。

2.3 缺損區組織形態學計量結果 實驗側每個時間的新生骨面積百分比均大于對照側(P＜0.01)，且隨時間延長，新骨生成逐漸增多。見表1。

圖1 Bio-Oss、Bio-Gide修復前后臨界骨缺損模型

表1 實驗側和對照側新生骨面積百分比(%，±s)

表1 實驗側和對照側新生骨面積百分比(%，±s)

修復時間 實驗側 對照側 P值1 w 10.23±1.46 7.17±0.94 ＜0.01 4 w 16.28±1.31 12.43±0.98 ＜0.01 7 w 21.45±1.27 16.01±1.03 ＜0.01 10 w 26.33±1.64 20.35±1.12 ＜0.01

3 討論

骨量充足不僅能滿足口腔美學的要求，還為種植體提供了生物力學方面的支持。為解決種植區骨量不足問題，臨床多采用自體骨移植、同種異體骨移植和異種骨移植來補充植骨區的骨量不足〔8，9〕。但不論是自體骨移植還是異體骨移植均有一定缺陷，如自體骨移植來源有限、異體骨移植會存在骨缺損區排斥反應等。因此，目前誘導成骨成為口腔臨床醫學研究的熱點〔10〕，在新骨形成的同時，誘導材料逐漸被生新骨取代，與宿主相容。

大量研究表明，Bio-Oss骨粉的多孔狀結構能為新骨生長提供良好的空間支架，對維持間隙起重要作用。Bio-Oss骨粉是凍干的小牛骨通過脫有機質制成，具有良好的生物相容性，已成為公認的良好的骨替代材料以及組織工程支架材料〔11〕。而Bio-Gide骨膜是一種膠原可吸收膜，在骨缺損部位具有引導組織再生功能及骨修復和膜屏障的雙重作用，對重建的組織起支持作用，引導骨再生〔12〕。本實驗選擇 Bio-Oss骨粉結合 Bio-Gide骨膜，修復骨缺損，誘導骨再生，正是利用了Bio-0ss骨粉作為骨移植材料填充拔牙窩及骨缺損區，利用Bio-Gide膜可吸收性并誘導新骨形成的兩大優勢，很好地解決了牙槽骨的缺損和修復。目前，也有一些實驗將一些生長因子與Bio-Oss/Bio-Gide或骨形成蛋白+Ⅰ型膠原+天然珊瑚等混合后對牙槽組織進行修復，利用復合材料的協同性可能更利于新骨的成長。

總之，Bio-oss/Bio-Gide復合材料修復牙槽骨的損傷，具有良好的生物組織相容性，并具有刺激骨再生、誘導成骨的效果，為口腔臨床種植牙缺損提供了良好前景，但骨種植區的感染或相關不良反應還有待于進一步長時間的觀察。

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