新疆蜂膠提取物抗氧化活性及槲皮素和白楊素含量測定

布威海麗且姆·阿巴拜科日 木塔力甫·艾買提 阿米尼姑麗·買買提

尼砸木·艾海提 依米提·熱合曼

蜂膠的化學組分非常復雜，生物學活性多樣［1］?，F代藥理研究表明，蜂膠總黃酮具有抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、降血脂、調節機體免疫功能等多種生物活性作用［2］。國內外大量的科學研究證明，蜂膠對機體的諸多保健功效與其抗氧化活性有著密切的關系［1］。蜂膠中含有豐富的黃酮類化合物，其品種和含量之豐富，非植物藥所能相比，目前世界各地蜂膠樣品中分離出來的黃酮類化合物已有70多種［3］。新疆大學實驗室從新疆伊犁蜂膠的95％乙醇提取物中采用GC-MS法已鑒定了23種化合物，其主要成分為黃酮類物質［4］。蜂膠中的黃酮類化合物主要包括黃酮醇類、黃酮類和黃烷酮類。常見的黃酮醇類有槲皮素、良姜素、蘆丁等；黃酮類主要有芹菜素、白楊素等；二氫黃酮類主要有松屬素等；異黃酮有后莫紫檀素等［5-7］。多種藥用植物中的現有研究已表明，槲皮素具有抗氧化、抗炎、抗過敏、抗菌、抗病毒、抑制惡性腫瘤生長和轉移等多方面藥理作用，能提高免疫能力、對冠心病及高血壓患者也有輔助治療作用，成為近年來國內外學者研究的熱門課題［8］。大量研究表明，白楊素還具有抗病毒［9］、抗高血壓［10］、抗糖尿病［11］、抗菌抗過敏［12］等作用。由于白楊素對常見病、多發病所具有的重要的生理作用，也引起了人們的廣泛關注。目前，對蜂膠成分的分析主要采用高效液相色譜法［13-15］。蜂膠中的黃酮類化合物、咖啡酸酯類等成分都具有較強的清除自由基和抗氧化能力［16］。蜂膠抗氧化活性的測定方法，包括清除羥自由基和氧自由基能力測定法、β-胡蘿卜素一亞油酸法、清除1，1-二苯基苦基苯肼（1，1-Diphenyl-1-picrylhydrazyl，DPPH）自 由 基 法、2-連氮-雙（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）［2，2-azinobis（3-ethly-binzothiazoline-6-sulfonic acid），ABTS2］ 陽離子脫色法、鐵還原抗氧化能力測試法（ferric reducing antioxidant power，FRAP）、氧化自由基吸收能力測定法（oxygen radical absorption capacity，ORAC）等［17］。蜂膠的化學成分及其各種生物學活性取決于其收集產地［18］，因此，產地是影響蜂膠抗氧化活性的重要因素之一。有關研究證明，澳大利亞、中國、匈牙利、新西蘭的蜂膠清除DPPH自由基的能力較強，清除能力達60％以上。不同蜂膠樣品中清除DPPH自由基活性和總多酚含量之間呈正相關R2=0.762。多酚含量與抗氧化作用具有顯著性相關R2=0.671［19］?？梢?，清除DPPH自由基法是檢測抗氧化活性的有效、快速方法。

王小平等［20］對河南、山東、甘肅、內蒙產的蜂膠中的槲皮素含量進行測定分析，由于新疆所處的特殊地理位置和氣候條件，就藥用植物的種類與其他省、自治區相比有較大的差異，很多種類屬新疆特有種，蜜源植物是蜜蜂賴以生存，及蜂臘、蜂膠等各種蜂產品的物質基礎。新疆野生蜜源植物比較豐富，約有200種。由于受生態系統和氣候條件的影響，植物滲出物和分泌物的不同導致了不同地區采集的蜂膠化學成分的差異，生物學活性也因此有所變化，所以新疆產蜂膠的化學成分與生物學活性與其他種類也必然存在較大的差異。就這一科研領域，尚未見有關基于新疆產蜂膠進行抗氧化活性及其活性成分槲皮素和白楊素含量測定研究的報道。本研究首先從新疆產蜂膠有效成分的提取及其抗氧化作用著手，采用超聲波提取法和不同有機溶劑提取蜂膠，檢測其對DPPH自由基的清除能力和抗亞油酸過氧化能力，進一步檢測其生物活性物質——黃酮類化合物，將其開發成天然抗氧化物質；其次利用比較先進的研究方法對新疆產蜂膠活性成分槲皮素和白楊素的含量進行分析，旨在對新疆產蜂膠產品產業化、標準化提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 原料及來源 蜂膠取自新疆伊犁尼勒克縣和阿克蘇庫車縣養蜂場，采集時間：秋季。純度均為98％的槲皮素對照品和白楊素對照品（金測分析技術天津有限公司）。

1.1.2 儀器和試劑 篩子（60-120目）；PYX-DHS-40X50-B型隔水式電熱恒溫培養箱；λ-17型紫外可見光譜儀（PE美國，波長范圍190-900nm，準確度±0.3）；HP1100高效液相色譜儀（安捷倫科技公司，原惠普公司）；JY92-2D型超聲波細胞破碎儀（寧伯新芝生物科技股份有限公司）；2GKC14型控溫水浴鍋、冷柜、定量濾紙、容量瓶、電子天平、燒杯、移液管；DPPH（1，1-二苯基苦基苯肼，C18H12N5O6，相對分子質量394.3，Fluka公司）、硫代巴比妥酸（2-Thiobarbituric acid，TBA）、亞油酸、無水乙醇、茶多酚、乙酸乙酯、正丁醇、三氯乙酸、醋酸鉀、丙酮等試劑均為國產分析純。

1.2 方法

1.2.1 蜂膠的提取

1.2.1.1 預處理 將原料蜂膠放入冰箱冷凍5h（蜂膠在15℃以下變硬變脆，在此溫度以上具有黏性，不便粉碎），粉碎，過40目篩。分別標準稱取3g伊犁和庫車原蜂膠并加上150mL蒸餾水，在65℃放置4h后拋棄蜂蠟和濾雜，備用。

1.2.1.2 蜂膠的各溶劑提取 分別稱取預處理過的蜂膠→分別加入15倍體積的各溶劑（80％乙醇、丙酮、乙酸乙酯和正丁醇）→在超聲波細胞粉粹機處理20min（20℃）→過濾→放65℃水浴鍋，干燥→稱重（計算提取率）→避光處保存，備用。1.2.2 清除DPPH自由基能力的測定

1.2.2.1 測定原理 DPPH自由基在有機溶劑中是一種穩定的自由基，其孤對電子在517nm附近有強吸收（顯深紫色）。當有機清除劑存在時，孤對電子被配對，吸收消失或減弱，通過測定吸收減弱的程度，可評價自由基清除劑的活性。

1.2.2.2 測定方法 秤取將茶多酚和已提取備用的蜂膠用80％乙醇配制成質量濃度為10、20、40、60、80和100μg/mL的系列樣品。準確稱取DPPH試劑0.098 6g，用無水乙醇溶解定容至500mL容量瓶中，得到DPPH貯備液濃度為197.2mg/mL，搖勻置于冰箱中冷藏備用。使用時，將DPPH貯備液稀釋成濃度為39.44mg/mL DPPH溶液。

取2mL DPPH溶液溶解待測物，充分混合，靜置40min。在517nm處測定其吸光度。每個樣品平行做3次。各待測物對DPPH的清除率K，可由下列公式：

K=［1-（Ai-Aj）］/Ac×100％

其中，K為樣品對DPPH自由基的清除率；Ai為2mL DPPH溶液+ 2mL待測試液的吸光度；Aj為2mL待測試液+2mL乙醇的吸光度；Ac為2mL DPPH溶液+2mL乙醇的吸光度。

1.2.3 抗油脂過氧化力的測定［21］

1.2.3.1 測定原理 油脂發生過氧化反應從其化學本質來講，主要是油脂中含有不飽和脂肪酸。尤其是亞油酸和亞麻酸上含有的1，4戊二烯結構使它們對氧化的敏感性遠遠超過油酸中丙烯體系，這種氧化作用又受到金屬離子如Fe2+、Cu2+的催化，氧化反應一旦被啟動，很容易形成鏈式反應，加速油脂的氧化酸敗?？寡趸瘎┳鳛闅浣o予體和自由基接受體起著抑制鏈式反應的作用，從而使油脂過氧化反應的發生受到一定的限制。該方法的原理是［22］：丙二醛是油脂被氧化后的產物，它可以與TBA反應生成有色產物可在532nm下測定出其吸光值，吸光度值表示油脂氧化程度，其值越大，氧化程度越嚴重，當油脂中加入抗氧化劑時，就會減少氧化反應的發生從而降低丙二醛的含量。

1.2.3.2 測定方法［23］秤取將已提取備用的伊犁和庫車蜂膠用95％乙醇配制成質量分數為0.2％的蜂膠提取液。配制2.5％的亞油酸和95％乙醇溶液作底物溶液，分別加入已配好的0.2％蜂膠和95％乙醇提取物（1∶1），蜂膠的終質量分數為0.1％，向空白組不加蜂膠提取液?；靹蚝笾糜谂囵B箱中于（40±1）℃下培養，定時取待測樣品1mL，加入1mL 25％的三氯乙酸，混勻，放置，終止反應。然后加入1mL0.67％ TBA，于沸水浴中加熱10min。取出冷卻后加入4mL正丁醇，搖勻，于4000r/min離心10min，取上層正丁醇液，于532nm處測定光吸收值A，同時測定不加抗氧化物（蜂膠提取液）空白組的光吸收值A，吸光值越小表明抗氧化能力越強。

1.2.4 高效液相色譜（High performance liquid chromatography，HPLC）法分析蜂膠提取液的活性成分槲皮素和白楊素的含量

1.2.4.1 測定原理 當流動相（液體）中攜帶的混合物流經固定相時，其與固定相發生相互作用。由于混合物中各組分在性質和結構上的差異，與固定相之間產生的作用力的大小、強弱不同，隨著流動相的移動，混合物在兩相間經過反復多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時間不同，從而按一定次序由固定相中流出。與適當的柱后檢測方法結合，實現混合物中各組分的分離與檢測。

1.2.4.2 測定方法

（1）測定波長的選擇：取一定濃度的槲皮素對照品溶液和白楊素甲醇溶液分別置于190-400nm和200-600nm波長范圍內進行光譜掃描，結果分別在370nm和268nm波長處有最大特征光吸收，此時檢測基線穩定，槲皮素峰和白楊素峰前后雜質峰干擾小，因此，對于槲皮素選擇370nm、對于白楊素選擇268nm作為測定波長。

（2）原料預處理：將原料伊犁蜂膠放入冰箱冷凍5h（蜂膠在15℃以下變硬變脆，在此溫度以上具有黏性，不便粉碎），取原蜂膠5g，用研缽磨碎，過40目篩，加入50mL水，放入65℃水浴中4h，充分攪拌，除去蜂蠟和雜質，置于順風處，以便干燥備用。

（3）蜂膠的提?。簻蚀_稱取干燥并恒重的伊犁蜂膠樣品2g于燒杯中，分別精密加入50mL的70％乙醇和甲醇，稱定重量，超聲處理30min（20℃，600W），冷卻，再稱定重量，分別用70％乙醇和甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取濾液25mL，置于分液漏斗中，加石油醚（60-90℃）萃取2次，每次25mL。棄去石油醚液，分別取70％乙醇和甲醇液，置水浴上蒸干。將粉碎的伊犁蜂膠稱2.5g分別加入5倍的一定濃度的70％乙醇和甲醇提取溶液中，超聲處理30min（20℃，600 W）。30℃浸漬 48h，提出浸液，減壓回收70％乙醇和甲醇。

（4）供試品溶液的制備：精密稱取槲皮素和白楊素樣品0.2g，分開置于50mL 容量瓶中分別加70％乙醇和45mL甲醇使溶解，分別用70％乙醇和甲醇定容至劃度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，濾液作為供試品溶液，注入HPLC色譜儀，測定。

（5）對照品溶液的制備：精密稱取槲皮素對照品5.0mg，置200mL容量瓶中，加70％乙醇166mL并搖勻，即得槲皮素對照品（濃度為30μg/mL）。精密稱取白楊素對照品5.0mg，置125mL 容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得白楊素對照品溶液（濃度為 40μg/mL）。

（6）色譜條件：測定槲皮素的色譜條件-色譜柱 ：Spherisorb（5μm，250mm×4.6mm）；流動相 ：甲醇-16.7％四氫呋喃的0.4％磷酸溶液（38∶62）；流速：1.0mL/min；檢測波長：370nm；柱溫：40℃。測定白楊素的色譜條件-色譜柱：Diamonsil CL8（5μm，4.6mm×200mm）；流動相：甲醇 - 水（35：25）；流速1.0mL/min；檢測波長：268nm；柱溫為25℃。

（7）標準曲線的制定：在選定的色譜條件下，分別精密吸取槲皮素對照品溶液（0.03mg/mL）4、8、12、16、20μL 和白楊素對照品溶液（0.04mg/mL）2.5、5.0、10.0、15.0、20.0μL，以依次注入 HPLC 色譜儀進行測定，記錄其色譜峰的峰面積積分值。以進樣量濃度（μg/mL）為橫坐標，相應的峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。

（8）精密度試驗：精密度是指在規定的測試條件下，同一個均勻供試品，經多次取樣測定所得結果之間接近的程度［24］，一般用相對標準偏差（Relative standard deviation，RSD）表示，其數值一般不大于2.0％。RSD越小說明精密度越高，公式：

RSD=標準偏差/平均值×100％

本試驗分別精密吸取槲皮素和白楊素對照品溶液，重復進樣5次，每次10μL，測定峰面積，記錄色譜，計算其RSD值。

（9）穩定性試驗：精密吸取各樣本供試品溶液，進樣量為10μL，每隔4h測定一次，總共測24h，記錄色譜，計算結果。

1.2.5 統計學處理 各組數據以Microsoft Excel和SPSS 10.0版統計分析程序對各組數據進行相對標準偏差分析。

2 結果

2.1 不同提取方式對蜂膠提取率的影響

各溶劑提取物分別加入已準確稱重的干燥空燒杯中，放在65℃水浴鍋，待干燥后稱重，減去空燒杯的重量，所得的蜂膠提取率結果如表1所示。

由表1可知，庫車蜂膠的提取率高于伊犁蜂膠，對伊梨蜂膠正丁醇提取法的提取率（26％）最高，正丁醇可做為最佳提取溶劑；對庫車蜂膠丙酮提取法的提取率（36％）最高，丙酮可做為最佳提取溶劑。

表1 蜂膠在不同提取法中的提取率

2.2 不同蜂膠提取物對DPPH自由基的清除作用

當伊犁和庫車蜂膠各溶劑提取物系列濃度為10-100μg/mL時，對DPPH自由基的清除能力結果（表2）顯示，伊犁和庫車蜂膠各溶劑提取物和茶多酚的各濃度液對DPPH清除率的均值比較，蜂膠在有機溶劑正丁醇里溶解成分的抗氧化能力最強。從表中可以看出伊梨蜂膠各溶劑提取物濃度為10-100μg/mL時對DPPH自由基的清除能力為：80％乙醇＞正丁醇＞丙酮＞乙酸乙酯，清除率越高就表明抗氧化能力越強；結果表明在此濃度的4種提取溶劑里80％乙醇提取物的抗氧化能力最強；與對照品（茶多酚）相比，80％乙醇提取物的抗氧化能力在6種濃度梯度下都高于茶多酚。庫車蜂膠各溶劑提取物系列濃度為10-100μg/mL時對DPPH自由基的清除能力為：正丁醇＞丙酮＞乙酸乙酯＞80％乙醇，結果表明在此濃度的4種提取溶劑里正丁醇提取物的抗氧化能力最強，與對照品（茶多酚）相比正丁醇提取物的抗氧化能力在6種濃度梯度下都高于茶多酚。

表2 伊梨蜂膠和庫車蜂膠各溶劑提取物及茶多酚對DPPH自由基的清除率

2.3 蜂膠的抗油脂過氧化作用

如圖1所示，532nm處吸光值隨油樣作用時間的延長而升高。0.1％蜂膠+95％乙醇提取物作為抗氧化劑添加到油樣中，提高了油樣的抗氧化性，吸光值低于未加抗氧化劑組（空白）。

從圖1可知在第6天時亞油酸氧化達到最高值，伊犁蜂膠提取物的A值比庫車蜂膠提取物的A低，表明其抗氧化效果較好。隨著氧化的后期，由于分解的醛類物質受到再氧化生成酸，因此油脂酸敗至一定程度時，其丙二醛物質生成減少，TBA值有下降的趨勢，即測得的A值下降，表明油脂已劇烈酸敗。

圖10.1％蜂膠+95％乙醇提取物對亞油酸抗氧化作用

2.4 HPLC法測定蜂膠提取液的活性成分槲皮素和白楊素的含量

2.4.1 標準曲線的制定 在選定的色譜條件下，分別精密吸取槲皮素對照品溶液（0.03mg/mL）4、8、12、16、20μL和白楊素對照品溶液（0.04mg/mL）2.5、5.0、10.0、15.0和 20.0μL，以依次注入 HPLC色譜儀，進行測定，分別記錄其色譜峰的峰面積積分值。濃度與峰面積線性關系見表3。

分別以濃度（μg/mL）為橫坐標，相應色譜峰峰面積積分值為縱坐標，繪制標準曲線。槲皮素回歸方程：y=15.464x+2.7166，R2=0.9994；白楊素回歸方程：y=5.9351x-9.7648，R2=1，式中 x為濃度（μg/mL），y為峰面積。槲皮素和白楊素含量分別在1.91-19.11μg/mL和37.24-372.40μg/mL范圍內顯示良好的線性關系，其標準曲線如圖2所示。

表3 槲皮素、白楊素濃度與峰面積線性關系

2.4.2 槲皮素及白楊素樣品含量的測定 按“供試品溶液的制備”方法制備供試品溶液。精密吸取各供試品溶液20μL，注入HPLC色譜儀，測定。結果（表4）表明，伊犁蜂膠中與槲皮素相比白楊素的含量較高；對槲皮素而言，與乙醇提取劑相比，以甲醇為提取溶劑時蜂膠中槲皮素的含量較高、樣品提取率高、提取效果好；而對白楊素而言，與未經脫脂的甲醇提取液相比未經脫脂的乙醇提取液里樣品中白楊素的含量較高；分別將乙醇和甲醇提取液直接注入HPLC色譜儀進行分析，樣品中槲皮素和白楊素含量較低。但經采用石油醚萃取，脫脂，除去脂溶性雜質，此時樣品中槲皮素和白楊素含量都比未經脫脂的高，分離效果最佳。

圖2 槲皮素（A）和白楊素（B）標準曲線

表4 槲皮素、白楊素樣品含量測定

2.4.3 對照品的HPLC分析 按以上選定色譜條件，分別精密吸取槲皮素和白楊素對照品溶液20μL注入HPLC色譜儀，測定。槲皮素和白楊素的保留時間分別為t=3.983min、t=10.374min，結果如圖3、圖4所示。

2.4.4 樣品的HPLC色譜分析 分別精密吸取未經脫脂的乙醇蜂膠提取液、未經脫脂的甲醇蜂膠提取液、經脫脂的乙醇蜂膠提取液、經脫脂的甲醇蜂膠提取液各吸取20μL，注入HPLC色譜儀，測定結果如圖5 -圖8所示，相應的保留時間見表5。

圖 3 槲皮素對照品的HPLC分析圖

圖4 白楊素對照品的HPLC分析圖

由圖5-圖8可以看出，各蜂膠提取液中有很多成分，此結果與槲皮素和白楊素對照品的HPLC色譜分析圖相比，未經脫脂的乙醇蜂膠提取液、未經脫脂的甲醇蜂膠提取液、經脫脂的乙醇蜂膠提取液、經脫脂的甲醇蜂膠提取液都包含槲皮素和白楊素。表5說明蜂膠經過脫脂，除去脂溶性雜質以后，縮短了出現槲皮素峰和白楊素峰的保留時間。

圖 5 未經脫脂的乙醇提取液的HPLC分析圖

圖 6 經脫脂的乙醇提取液的HPLC分析圖

圖 7 未經脫脂的甲醇提取液的HPLC分析圖

圖 8 經脫脂的甲醇提取液的HPLC分析圖

2.4.5 精密度試驗 精密吸取槲皮素和白楊素對照品溶液，重復進樣5次，每次的進樣量均為10μL注入HPLC色譜儀進行分析，記錄色譜，結果（表6）顯示，槲皮素峰的平均峰面積值為60.96，RSD為0.86％；白楊素峰的平均峰面積值為431.16，RSD為0.26％。試驗結果表明，該法測定蜂膠中槲皮素和白楊素含量的重復性良好，儀器的精密度較高。

表 5 樣品的HPLC色譜分析表

表 6 精密度試驗結果

2.4.6 穩定性試驗 精密吸取槲皮素和白楊素供試品溶液，進樣量均為10μL，注入HPLC色譜儀進行分析，每隔4h測定一次，總共測24h，記錄色譜。測定結果（表7）顯示，槲皮素峰平均峰面積值為169.03，RSD為1.89％；白楊素峰的平均峰面積值為1631.73，RSD為1.11％。試驗結果表明，本品溶液在24h內基本穩定，其峰面積基本不變。

表 7 穩定性試驗結果

3 討論

蜂膠的化學成分復雜，迄今已發現300多種成分［18］。隨著人們對蜂膠的認識和研究的深入，經過充分的考核考察，蜂膠有可能因其資源豐富、效果顯著、提取方便等優點而成為具有前途的天然抗氧化劑新資源［25］。

蜂膠的功效成分主要是黃酮類化合物，如槲皮素、白楊素等和酚類化合物，本研究首先針對新疆伊犁和庫車蜂膠采用4種不同溶劑進行提取得到一系列蜂膠提取物，對其進行了抗氧化活性的測定，并進一步定性分析了黃酮類物質；其次采用高效HPLC色譜法對新疆伊梨蜂膠中槲皮素和白楊素的含量進行了測定。新疆伊犁蜂膠和庫車蜂膠的提取率具有一定的差異，即庫車蜂膠的提取率較高，但它們的抗氧化活性之間無明顯差異，表明蜂膠提取率和抗氧化活性之間沒有相關性，原蜂膠的雜質成分可能影響了其提取率。蜂膠的收集產地和原蜂膠的不同溶劑法提取可能會引起蜂膠提取物在活性成分含量的差異，很可能正是這種差異影響了其抗氧化能力。本次試驗中新疆兩個地區蜂膠抗氧化活性之間無明顯差異，而且這兩個地區的地理環境和植被分布很相似，表明其蜂膠活性成分也很相近。

蜂膠是含有樹脂狀物的黏性物質，不溶于水，易溶于甲醇、乙醇和甘油等有機溶劑。本試驗用70％乙醇和甲醇作為提取溶劑從新疆伊犁蜂膠中提取槲皮素和白楊素。結果表明，伊犁蜂膠中與槲皮素相比白楊素的含量較高；對槲皮素而言，與乙醇提取劑相比，以甲醇為提取溶劑時蜂膠中槲皮素的含量較高、樣品提取率高、提取效果好；而對白楊素而言，與未經脫脂的甲醇提取液相比未經脫脂的乙醇提取液里樣品中白楊素的含量較高。經過HPLC分析，活性成分槲皮素和白楊素從新疆伊梨蜂膠樣品中可被檢測出，而二者在本研究的色譜條件下，分離度、重現性、穩定性好等優點，并且峰形對稱，無拖尾現象，雜質也無干擾。通過穩定性及回收率試驗，顯示本方法操作簡便，重現性好。用不同的方法提取的蜂膠中槲皮素和白楊素的含量也不同，即分別將乙醇和甲醇提取液直接注入HPLC色譜儀進行分析，樣品中槲皮素和白楊素含量較低，但經采用石油醚萃取、脫脂、除去脂溶性雜質，此時樣品中槲皮素和白楊素含量都比未經脫脂的高，分離效果最佳，并縮短了出現槲皮素峰和白楊素峰的保留時間。

新疆具有豐富的蜂膠資源，蜂膠的生物學活性與化學成分受生態系統和氣候條件的影響。蜂膠成分主要取決于其收集產地，對新疆產蜂膠抗氧化活性及活性成分槲皮素和白楊素的含量分析研究，以及開發具有醫療營養保健功能的蜂膠產品及其制品，盡快實現新疆蜂膠產品產業化、標準化，將具有理論意義和現實意義。

4 結論

通過對蜂膠中活性物質的提取與其抗氧化作用的初步研究表明，采用超聲波提取的蜂膠各溶劑提取物具有比較強的抗氧化能力，能明顯清除DPPH自由基；蜂膠的采樣地點和提取溶劑不同，其抗氧化能力也有所不同，待進一步進行新疆蜂膠新活性成分的分離純化和產業化。測定波長分別為370nm和268nm時，經過HPLC分析活性成分槲皮素和白楊素從新疆伊犁蜂膠樣品中可被檢測出；槲皮素和白楊素濃度分別在1.91-19.11μg/mL和37.24-372.40μg/mL范圍內濃度與峰面積呈良好的線性關系，其相應的R2值為0.9994和1。

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