對川渝兩地市售白芍飲片質量的調研

楊榮平， 嚴倩茹， 韓 麗， 王云紅， 黃 娟， 張小梅， 秦 劍

(1．重慶市中藥研究院，重慶400065;2．成都中醫藥大學，四川成都611137;3．重慶市食品藥品檢驗所，重慶401121)

白芍為毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall．的干燥根，具有養血斂陰、柔肝止痛、平抑肝陽等作用。其主要有效成分為芍藥苷，近年來研究表明芍藥苷具有抗傷害性疼痛、神經保護及調節離子通道等作用［1］，2010年版《中國藥典》 (以下簡稱藥典)以芍藥苷含有量作為評價白芍質量好壞的指標之一，規定白芍藥材含芍藥苷不得低于1.6%，飲片不得低于1.2%。筆者因課題需要購買了白芍飲片，實驗過程中發現所含芍藥苷低于藥典的規定，因此特意在四川和重慶兩地采購27批白芍飲片，以中國藥品生物制品檢定所提供的白芍藥材為對照，測定其中芍藥苷，對川渝兩地市售白芍飲片質量進行調研。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Waters 2695高效液相色譜儀，Waters 2996檢測器，Waters Empower化學工作站;KQ-50B型超聲波清洗器 (昆山市超聲儀器有限公司);AEG-45SM電子天平 (十萬分之一，日本島津公司)，BS224S(萬分之一，北京賽多利斯科學儀器有限公司)。

1.2 試藥 芍藥苷對照品 (中國藥品生物制品檢定所，批號110736-201035);白芍對照藥材 (中國藥品生物制品檢定所，批號120905-200508);乙腈、甲醇為色譜純 (美國TEDIA天地試劑公司);磷酸為分析純 (重慶申渝化學試劑廠);水為雙蒸水 (自制)。

1.3 藥材 市售白芍飲片購自成都荷花池中藥材市場、重慶桐君閣中藥批發商廠及桐君閣藥房等各大藥店，經重慶市中藥研究院李泉森研究員鑒定為毛茛科植物芍藥的根。為免造成不必要的商業利益沖突，本研究不公開生產廠家的名稱、批號及藥店名稱，下文中各樣品統一采用編號。

2 試驗方法與結果

2.1 色譜條件 采用Diamonsil C18色譜柱 (250 mm×4.6 mm，5μm);以乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)為流動相;體積流量為1 mL/min;柱溫25℃;檢測波長為230 nm。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取干燥至恒定質量的芍藥苷對照品14.56 mg至10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密移取0.5 mL至10 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，制成72.8 μg/mL的芍藥苷對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取白芍樣品1～27號中粉及對照藥材各約0.1 g，精密稱定，各置50 mL量瓶中，加稀乙醇35 mL，超聲處理20 min，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.4 線性關系的考察 精密吸取上述對照品溶液3、6、9、12、15、18μL，分別注入高效液相色譜儀，以對照品量 (μg)為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得線性回歸方程Y=1.0×106X－28 154，r=0.999 8。結果表明芍藥苷在0.218 4～1.310 4μg范圍內進樣量與峰面積呈良好的線性關系。

2.5 樣品測定 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL，注入高效液相色譜儀，測定，結果表明27批樣品中僅有1批合格，見表1。

表1 白芍飲片芍藥苷的測定結果Tab.1 Resu lts of content assay for paeoniflorin in Paeoniae Radix alba

2.6 指紋圖譜的建立 采用國家藥典委員會中藥色譜指紋圖譜相似度評價軟件 (2004A)對全部供試品HPLC色譜圖進行疊加比較 (結果見圖1)，對其中16批芍藥苷量不合格但峰檢出樣品的HPLC色譜圖進行擬合并與對芍藥苷對照品、對照藥材、合格藥材的比較 (結果見圖2)。

圖1 供試品HPLC指紋譜圖Fig.1 Fingerprints of sam ples

由圖1、圖2可見，對照藥材 (S28)5號峰較大，1、2、3、4號峰均較小，合格的藥材(S27)1、2、4、5號峰的大小比例與對照藥材類似，而不合格的藥材 (S1～S26)5號峰所占比例顯著減小或未檢出，同時2號峰所占比例顯著增大。此外芍藥苷峰檢出的16批不合格樣品HPLC圖譜經擬合后含有1、2、4、5號4個共有峰與合格樣品的相同，而此27批樣品與對照藥材相比均未檢測出3號峰。造成上述現象的可能原因見下文的討論。

3 討論

3.1 對市售白芍飲片中芍藥苷低于中國藥典規定的討論 上述調研結果表明，市售的27批白芍飲片中僅有1批芍藥苷的量符合藥典規定。經過文獻查閱，發現導致這種現象的因素較多，現對可能的幾點因素進行如下分析。

3.1.1 炮制不當 藥典規定的白芍飲片的炮制方法為“除去頭尾和細根，置沸水中煮后除去外皮或去皮后再煮，曬干”“洗凈，潤透，切薄片，干燥”［2］，芍藥苷有一定的水溶性，炮制過程中水洗、煮等程序均有水參與，若操作不當如浸潤過透、煮的時間過久，均易造成芍藥苷的流失。有研究報道在白芍炮制過程中，加熱、加水浸泡等對白芍中芍藥苷的量影響較大［3］。李外等［4］得出了浸潤12 h切制芍藥苷的量高于浸潤24 h的結論。李玲等［5］也研究表明不同切制工藝對白芍中芍藥苷量有影響，干品浸潤切制芍藥苷的量約為鮮品切制的一半。

圖2 部分供試品的HPLC色譜圖Fig.2 HPLC chromatogram s

3.1.2 硫磺熏蒸 硫磺熏制是一項傳統的中藥材產地加工技術，雖然藥典中未收載白芍飲片的加工炮制需用硫磺熏制，一些生產者為了片面的追求白芍飲片色澤的潔白美觀，在加工過程中使用硫磺熏制。硫磺燃燒不完全產生的SO2是一種很強的還原劑，可使芍藥苷轉化另一種成分——芍藥苷亞硫酸酯，從而導致芍藥苷的大幅度降低［6］。孟祥松等［7］研究報道，硫磺熏制白芍24 h芍藥苷損失50%以上，劉靜靜等［8］在《對市售白芍飲片芍藥苷含量低于中國藥典標準的深入討論》一文中也表明硫磺熏蒸可使包括芍藥苷在內的6種單貼苷類有效成分發生化學轉化并導致市售白芍飲片芍藥苷的量顯著降低。

3.1.3 生長年限短 白芍為多年生植物，一般3年采收入藥，但是現在藥農提前采收加工，加工成白芍飲片的原藥材因生長年限不夠而芍藥苷量不符合規定［9］。

3.1.4 貯存條件的影響 萬穎等［10］對貯藏條件對芍藥苷的影響進行了考察，結果發現白芍隨貯存時間的延長，芍藥苷的量呈下降趨勢，溫度、濕度越低芍藥苷的量降低的趨勢越小。

3.1.5 非法提取 樣品13中與芍藥苷相應的峰未檢出，其樣品在外觀上與其他的樣品相比具有明顯的膨脹狀，表面沒有光澤，顏色泛黃而無粉性。目前，中藥飲片存在提取后再次出售的現象，芍藥苷有一定的水溶性，樣品13極有可能是經過提取后再次出售的。

3.2 對中藥品質和療效的討論 近些年來，在商品經濟浪潮中，藥物這一具有特殊意義的商品也受到了沖擊，常有市售偽劣藥材的報道［11-13］，不合格的藥材不但浪費了資源影響了臨床療效，而且嚴重威脅到了人民的健康和生命安全。曾經有中醫無效及廢除中醫的風波，在這場風波中藥材質量差異大應擔當一定的責任，偽劣藥材治療疾病是天方夜譚，只有合格的藥材才可能取得良好的臨床效果。而市場上合格的藥材往往需要衛生監督部門強有力的監管及法律法規的完善。

3.3 對中藥飲片規范化生產的討論 本研究采購的27批樣品中部分為藥材市場流通的白芍飲片統貨，部分為含有飲片廠出廠合格證的包裝飲片，而芍藥苷定量測定結果表明27批樣品中僅有1批樣品符合藥典的規定，此種現象不得不發人深思:飲片生產廠家在飲片出廠前是否真的對其中的成分進行了定量測定，測定的結果是否真的合格!

國家食品藥品監督管理局在2004年的《關于推進中藥飲片等類別藥品監督實施GMP工作通知》中提出“從2008年1月1日開始，所有的中藥飲片生產企業必須在符合GMP條件下進行生產”，至今現存的中藥飲片生產廠家基本已通過GMP認證，但其是否在按照相關的操作規程執行以及執行的力度如何不得不引人深思。

4 小結

在此，我們強烈呼吁有關管理監督部門加強中藥材的種植、炮制、加工等監督管理工作以及對法律法規的完善，規范中藥飲片市場，為臨床用藥提供保障。此外，藥典是否需要增加包括白芍飲片在內的若干中藥材的二氧化硫殘留限量檢查項也值得深思。

［1］孫麗榮，曹 雄，侯鳳青，等．芍藥苷研究進展［J］．中國中藥雜志，2008，33(18):2028-2032．

［2］國家藥典委員會．中華人民共和國藥典2010年版一部［S］．北京:中國醫藥科技出版社，2010:96-97．

［3］吳劍坤，毛克臣，莊志宏，等．不同炮制方法對亳州白芍中芍藥苷含量的影響［J］．中國中醫藥信息雜志，2010，17(1):38-39．

［4］李 外，劉 萍，閻 旭．不同浸潤時間對白芍中芍藥苷含量影響的研究［J］．時珍國醫國藥，2006，17(5):775-776．

［5］李 玲，張礫巖．不同切制工藝對白芍中芍藥苷含量的影響［J］．新疆中醫藥，2007，25(2):37-38．

［6］金傳山，蔡一杰，吳德玲．硫磺熏制對白芍中芍藥苷的影響［J］．南京中醫藥大學學報，2011，27(2):161-164．

［7］孟祥松，劉文蘋，李 軍，等．硫磺熏蒸時間對白芍中芍藥苷含量影響［J］．安徽國藥，2010，14(11):1278-1279．

［8］劉靜靜，劉 曉，蔡 皓，等．對市售白芍飲片芍藥苷含量低于中國藥典標準的深入討論［J］．藥物分析雜志，2010，30(10):1817-1821．

［9］吳曉明，何柏偉，胡紅強．影響白芍芍藥苷含量的幾個關鍵因子初探［J］．浙江農業科學，2008(4):435-436．

［10］萬 穎，孫曉燕，田亞男，等．不同貯藏條件對白芍品質的影響［J］．時珍國醫國藥，2010，21(11):2984-2985．

［11］徐 超，朱麗君，劉 斌，等．HPLC測定不同地區市售飲片中四種黃酮類成分的含量［J］．中藥新藥與臨床藥理，2008，19(3):210-212．

［12］潘 軍．市售丹參飲片中丹參酮IIA含量的考察［J］．中國現代中藥，2010，12(10):29-30．

［13］朱晨晨，謝曉梅，程菁菁．市售木瓜飲片質量考察［J］．安徽醫藥，2011，15(5):577-578．