CTGF在急性氨中毒患者血清中的表達及意義

張洪明 何 平 陳 紅

1.沈陽市第九人民醫(yī)院，遼寧沈陽 110024；2.中國醫(yī)科大學(xué)盛京醫(yī)院，遼寧沈陽 110024；3.沈陽工業(yè)大學(xué)，遼寧沈陽 110024

職業(yè)性急性氨中毒是在職業(yè)活動中，短時間內(nèi)吸入高濃度氨氣后對呼吸道粘膜產(chǎn)生強烈的刺激作用，可表現(xiàn)為急性化學(xué)性氣管、支氣管炎，可出現(xiàn)喉頭水腫、肺泡水腫或肺間質(zhì)。損傷后的氣道周圍炎癥細胞浸潤，釋放多種炎癥介質(zhì),引起的以呼吸系統(tǒng)損害為主的全身性疾病，常伴有眼和皮膚灼傷,嚴重者可出現(xiàn)急性呼吸窘迫綜合征，可以引起支氣管、肺的永久性損害[1]。近年發(fā)現(xiàn)的結(jié)締組織生長因（Connective －tissue growth factor ，CTGF）具有促進胞外基質(zhì)合成、成纖維細胞有絲分裂等功能，在肺、肝、腎等器官纖維化過程中具有重要作用[2]，但是否參與急性氨中毒的炎癥反應(yīng)尚不清楚。本實驗通過觀察CTGF在急性氨中毒患者血清的表達變化，旨在初步揭示CTGF在急性氨中毒病理過程中的作用。

1 對象與方法

1.1 研究對象

2009年我市發(fā)生16人氨氣中毒事故，隨后7例男患、9例女患均于該院進行搶救，年齡15～31歲，平均（25.2 ±5.2）歲，既往無病史。16例氨中毒患者按國家“職業(yè)性急性氨中毒診斷標準”分級[1]，刺激反應(yīng)11例及輕度氨中毒組5例。對照組16例為健康者，從該院體檢中心募集，其中男7例，女9例，年齡19～31歲，平均年齡（27.3±6.4）歲。

1.2 方法

氨中毒患者入院后，抽取3 mL空腹靜脈血,放入試管中常溫凝固后離心（3000轉(zhuǎn)/分）10 min，分離血清,當(dāng)日測定。正常對照組同上處理。ELISA法檢測人血清CTGF，操作流程按說明書進行，試劑盒購自上海森雄生物試劑公司，使用sunrise（奧地利）全自動酶標儀檢測，在波長450 nm測得O D值，根據(jù)樣品O D值及標準曲線計算待測樣品，操作流程按說明書進行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS 11．0統(tǒng)計軟件進行，血清CTG F水平以（±s）表示，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗，P ＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

氨中毒患者CTGF的峰值水平均比正常對照組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）；如表1所示。

表1 病例組與對照組血清 CTGF含量比較

由表1顯示接觸氨氣患者血清CTGF濃度均比對照組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。CTGF隨病情加重含量升高。

3 討論

氨氣屬于堿性高溶解度氣體，具有強烈的刺激性和腐蝕性，接觸氨氣急性期輕則引起皮膚及黏膜的刺激癥狀，重則引起肺部損傷及氨中毒[1]。刺激性氣體導(dǎo)致肺泡1型細胞、內(nèi)皮細胞損傷，肺泡內(nèi)液體滲出，通氣血流比例失調(diào)，氣體交換功能下降，2型細胞增生肥大修復(fù)損傷的1型細胞，同時引起肺間質(zhì)炎癥改變并導(dǎo)致肺纖維化。肺纖維化是多細胞、多因子共同參與，經(jīng)過成纖維細胞異常增殖和轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致肺組織結(jié)構(gòu)重建失敗的結(jié)果[3]。在參與肺纖維化的細胞因子中，CTGF是近年發(fā)現(xiàn)的一種新的可刺激成纖維細胞增殖和分泌膠原的生長因子[4]。本研究顯示氨中毒病例組的CTGF水平高于對照組，提示CTGF參與了氨中毒的病情進展，與氨中毒纖維化的發(fā)生發(fā)展可能相關(guān)。在急性氨中毒發(fā)病過程中CTGF上升的機制尚不清楚。已有研究表明TGF－β1是一種作用廣泛的生長因子，在某些炎癥過程中過度表達，可能誘導(dǎo)其下游因子CTGF表達上調(diào)，并由后者作為下游效應(yīng)介質(zhì)作用于結(jié)締組織和成纖維細胞，刺激成纖維細胞增殖和細胞外基質(zhì)（ECM）合成最終導(dǎo)致組織器官纖維化[5]。

以往氨中毒診斷分級標準主要依靠皮膚、眼、呼吸系統(tǒng)臨床表現(xiàn)及胸部X線征象[6]。本實驗中診斷為刺激反應(yīng)患者中只有2例CTGF值在定診急性氨中毒患者的結(jié)果范圍中，分別存在肝功能改變和CK升高，余診斷急性輕度氨中毒患者CTGF水平均高于刺激反應(yīng)者。氨中毒是一個對多系統(tǒng)損傷的疾病。CTGF存在于心、腦、肺、肝、腎、子宮、胰腺、結(jié)締組織等多種組織器官，其中腎臟含量最高。成纖維細胞、平滑肌細胞、血管內(nèi)皮細胞、腎小球系膜細胞（MC）和某些腫瘤細胞等均可合成CTGF[7]。不同種類細胞產(chǎn)生的CTGF的功能不盡相同。其通過自分泌、旁分泌途徑發(fā)揮下列生物學(xué)功能：①促進細胞增殖、分化。②介導(dǎo)細胞黏附和遷移。③提高細胞外基質(zhì)(ECM)含量，誘導(dǎo)基質(zhì)沉積，進而促進器官纖維化。④其他：促進血管形成以及胚胎發(fā)育，誘導(dǎo)細胞凋亡，創(chuàng)傷修復(fù)等。正常情況下體內(nèi)的CTGF表達很低或無表達。在病理狀態(tài)下，CTGF的過度表達則與某些纖維化或增殖性疾病的發(fā)生密切相關(guān)，如腎纖維化、動脈粥樣硬化、肺纖維化、肝纖維化等[8]。CTGF測得值可能整體上反應(yīng)損傷的嚴重程度。提示臨床上應(yīng)用血清CTGF含量的變化，對急性氨中毒的診斷、損傷程度評價可能有一定的參考價值。但其在其作用的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑、作用發(fā)生的階段、早期干預(yù)能否預(yù)防氨中毒的損傷以及如何延緩其進展尚待進一步研究。

[1] 職業(yè)性急性氨中毒診斷標準及處理原則[S].中華人民共和國國家標準.GBZ14-2002.

[2] 李忠民，楊嵐.急性氨中毒呼吸道損傷的遠期后果[J].中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志，1994，12（2）：97.

[3] Robinson FR，Runnels LJ，Conrad DA，et al.Pathologic response of the lung to irritant gases[J].Vet Hum Toxicol，1990，32（6）：569-572.

[4] Gressner AM，Yagmur E，Lahme B，et al.Connective tissue growth factor in serum as a new candidate test for assessment of hepatic fibrosis[J].Clin Chem，2006，52（9）：1815-1817.

[5] Grotendorst GR，Duncan MR，Rahmanie H.Combinatorial signaling pathways determine fibroblast proliferation and myofibroblast differentiation[J].FASEB J，2004，18（3）：469-479.

[6] 孫維生.職業(yè)中毒病例研究[M].北京：北京化學(xué)工業(yè)出版社，1990：4.

[7] Xiu M，Liu YH，Brigstock DR，et al.Connective tissue growth factor is overexpressed in human hepatocellular carcinoma and promotes cell invasion and growth[J].World J Gastroenterol，2012，18（47）：7070-7078.

[8] 高媛.結(jié)締組織生長因子（CTGF）與肺纖維化的關(guān)系研究進展[J].臨床肺科雜志，2011，16（4）：601-602.