TMSG1在胃癌中的表達及其臨床意義

汪波

胃癌是常見的惡性腫瘤，近年來發病率逐年升高。胃癌的復發與轉移是疾病進展及胃癌患者死亡的主要原因。胃癌的發生發展是一個多基因、多階段的變化過程，涉及到多種癌基因的激活和抑癌基因的失活。TMSG1(tumormetastasis suppressor gene 1，腫瘤轉移抑制基因1)是近年來新發現的新型的腫瘤抑制基因。TMSG1已經被證實在前列腺癌，宮頸癌，肝癌中TMSG1的表達與疾病的浸潤，轉移明確相關［1，2］，但在胃癌中的生理功能及臨床意義目前尚不十分明確，本文旨在探討TMSG1的表達與胃癌患者的臨床病理因素及預后的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性隨機選取霍山縣中醫院普外科2006年3月到2008年3月確診的81例胃癌患者為研究對象，患者年齡29～69歲，平均55歲。臨床分期:I+II期40例、III期41例。病理類型:腺癌68例、其它類型癌13例。手術前檢查(胸片，B超)未發現遠處轉移，以上病例均未接受過放療、內分泌治療及化療，心肺肝腎功能均正常。另外選擇20例胃良性疾病標本作為對照。

1.2 免疫組化染色 81例胃癌組織蠟塊均行4μm連續切片，分別作HE和免疫組織化學染色。鼠抗人單克隆抗體TMSG1抗體等相關試劑均購自福州邁新公司。免疫組化染色按照說明書步驟進行。經DAB顯色后，蘇木精復染，中性樹膠封片。用已知陽性切片作陽性對照，PBS緩沖液代替一抗作陰性對照。

1.3 結果判定 TMSG1的判定以胞質內有棕黃色或棕褐色細顆粒為陽性表達，選取5個高倍鏡(×400)視野做陽性細胞計數，陽性細胞數≤10%為陰性，＞l0%為陽性。

1.4 統計學方法 采用SPSS 17.0軟件包進行統計學分析，計數資料采用χ2或Fisher檢驗;所有患者隨訪至2012年12月，以60個月為界進行5年生存率分析，不同組間用Log-Rank檢驗，采用 Kaplan-Meier法繪制生存曲線，以 P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 TMSG1蛋白在胃癌中的表達 TMSG1蛋白在胃癌中的表達主要定位于細胞漿中，呈現出棕黃色的顆粒，TMSG1蛋白在胃癌中的表達為46.9%(38/81)，而在胃良性疾病中的表達高80%(16/20)，TMSG1在胃癌中的表達較良性疾病明顯下降(χ2=7.06，P=0.008)。

2.2 TMSG1的蛋白表達與胃癌患者的臨床病理因素的關系本組研究病例的結果提示，TMSG1的表達與患者年齡、腫瘤大小，病理類型及組織學分級無關(P＞0.05)，而與淋巴結轉移及腫瘤的分期密切相關(P＜0.05)，見表1。

2.3 TMSG1的表達在胃癌患者預后中的意義 TMSG1的表達與患者的總生存期(OS)明顯相關，TMSG1陽性組患者的總生存期明顯高于陰性組患者(P=0.0277，log-rank檢驗)，且TMSG1陽性組患者的無病生成期也明顯高于陰性組患者(P=0.0297，log-rank檢驗)。在多因素Cox回歸分析中可見TGSM1的缺失或減少及腫瘤的分期是腫瘤復發或轉移的一個獨立預后因素(P=0.025，P=0.007)。

表1 TMSG1的蛋白表達與胃癌患者的臨床病理因素的關系

3 討論

胃癌的發生發展是一個多因素多步驟的過程，而體內一些基因表達的改變導致細胞生長調控的失調是胃癌發生過程中一個重要的因素［3］。無序的細胞增殖最終也會導致腫瘤的浸潤與轉移。現在大量的表明腫瘤相關的抑制基因如NM23、KAI-1、KISS-1在腫瘤的浸潤與轉移中起到非常重要的作用［4-6］。

TMSG1是近年來新發現的一種新型腫瘤相關基因，已經發現在前列腺癌，肝癌，宮頸癌和胰腺癌中都有不同程度的表達。目前一些研究表明TMSG1的功能是抑制腫瘤的生長與浸潤。Chen等［7］在肝癌細胞系 HCCLM3中通過質粒轉染TMSG1研究發現其能夠明顯抑制肝細胞腫瘤的浸潤與轉移。Su等［8］研究發現高表達TMSG1的前列腺癌細胞系PE-3M-1E8的增殖，浸潤能力明顯被抑制。Tang等［9］研究發現在肝癌MHCC97-L細胞系通過siRNA干擾下調TMSG1的表達能夠明顯增加細胞外氫離子的濃度，提示通過抑制TMSG1的表達和V-ATP酶的活性可能提高了細胞膜氫離子泵的轉運功能從而增加了腫瘤細胞增殖與浸潤的能力。但是TMSG1在胃癌中表達的臨床意義及與患者的預后關系目前尚不十分清楚。

本研究采用免疫組織化學的方法檢測了胃癌中TMSG1的蛋白的表達發現，胃癌中TMSG1的蛋白表達較胃良性組織中明顯下降(P＜0.05)，說明在胃癌的發生過程中TMSG1的表達明顯被抑制，這可能與腫瘤的增殖浸潤有關。進一步分析TMSG1的蛋白表達與患者的臨床病理因素的關系發現，TMSG1的蛋白表達與患者的淋巴結轉移，腫瘤的分期密切相關(P＜0.05)，淋巴結轉移組的TMSG1的蛋白表達及mRNA的表達明顯低于淋巴結陰性組，且TNM分期愈晚其TMSG1的蛋白表達及mRNA的表達越下降，說明可能在腫瘤的進展過程中TMSG1的表達被顯著抑制。在患者的預后分析中作者發現TMSG1的表達與患者的預后明顯相關，TMSG1高表達患者的總生存期(OS)及無病生存期(PFS)明顯高于TMSG1低表達組患者，在多因素生存分析中進一步表明TMSG1的表達是患者的一個獨立預后因素，這與Wang等研究結果相同，TMSG1的表達的減少與缺失是膀胱癌腫瘤轉移及無病生成期的一個獨立預后標記，尤其在腫瘤的早期階段它是一個非常重要的預后參考指標。

綜上所述通過使用免疫組織化學分析TMSG1的蛋白的表達與患者的淋巴結轉移，腫瘤的臨床分期(TNM)及患者的預后密切相關，進一步證實了TMSG1的表達與胃癌的進展及預后密切相關，對判斷臨床患者的病情發展具有重要的指導意義。當然由于本實驗的樣本量較少，這仍然需要大樣本前瞻性的實驗來進一步證實，并且需要進一步了解TMSG1抑制腫瘤增殖浸潤的具體調控機制，希望未來TMSG1能夠成為治療胃癌浸潤轉移的一個新的治療靶點。

［1］ Su J，You JF，Zhen J，et al．Overexpression of tumor metastasis suppressor gene 1 suppresses proliferation and invasion，but enhances apoptosis of human breast cancer cells MDA-MB-231 cells．Chin JPathol，2007，36(2):672-676.

［2］ Mesicek J，Lee H，Feldman T，etal．Ceramide synthases2，5，and 6 confer distinct roles in radiationinduced apoptosis in HeLa cells．Cell Signal，2010，22(3):1300-1307.

［3］ Moon HG，Jeong SH，Ju YT，et al．Upregulation of RhoGDI2 in human breast cancer and its prognostic implications．Cancer Res Treat，2010，42(7):151-156.

［4］ Zhang C，Lv F，Zhou L，et al．Effect of verapamil on the expression of EGFR and NM23 in A549 human lung cancer cells．Anticancer Res，2009，29(1):27-32.

［5］ Wu CY，Yan J，Yang YF，et al．Overexpression ofKAI1 induces autophagy and increases MiaPaCa-2 cell survival through the phosphorylation of extracellular signal-regulated kinases．Biochem Biophys Res Commun，2011，404(5):802-808.

［6］ Cao GL，Chu MX，Fang L，et al．Analysis on DNA sequence of KiSS-1 gene and its association with litter size in goats．Mol Biol Rep，2010，37(3):3921-3929.

［7］ Chen SH，Bubb MR，Yarmola EG，et al．Vacuolar H-ATPase binding to microfilaments:regulation in response to phosphatidylinositol3-kinase activity and detailed characterization of the actinbinding site in subunit B．JBiol Chem，2004，279(5):7988-7998.

［8］ Su J，You JF，Zhen J，etal．Studies of tumormetastasis suppressor gene TMSG-1 inhibited proliferation and invasion of prostate cancer．Chin JCancer，2008，30(2):404-407.

［9］ Tang N，You HY，Jin J．Small interfering RNA targeting LASS2 gene enhances invasion capacity of hepatocellular carcinoma cells．Tumor，2009，29(2):399-403.