抗支口服液對哮喘大鼠IgE和ECP含量的影響

李志軍，馬冰宇

(1.黑龍江中醫藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040;2.黑龍江中醫藥大學附屬第二醫院，黑龍江 哈爾濱 150001)

哮喘是一種慢性氣道炎癥，常有肥大細胞、嗜酸性粒細胞、和T淋巴細胞等多種炎性細胞的參與，發病機制仍不十分清楚。本實驗采用抗支口服液對模型大鼠進行藥物干預，測量大鼠血清中IgE和ECP前后含量變化情況，從而對抗支口服液治療哮喘的機制進行探討。

1 材料

1.1 實驗動物及分組

成年Wistar大鼠60只，體質量180～230g，由黑龍江中醫藥大學實驗動物中心提供。隨機分為空白組、模型組、地塞米松組(以下簡稱西藥組)、抗支口服液高、中、低劑量組。

1.2 藥品和試劑

抗支口服液(組成:麻黃、石膏、杏仁、黃芩、射干、僵蠶、地龍、炙百部、川貝母、桑白皮、虎杖、蘆根、甘草，由黑龍江中醫藥大學附屬第二醫院制劑室生產);大鼠IgE試劑盒(北京晶美生物制劑公司);ECP大鼠血清試劑盒(美國Sigma公司)。

2 實驗方法

2.1 哮喘動物模型的建立

實驗大鼠經適應性飼養3天后，除空白組外，其余大鼠分別于實驗的第1天和第8天給予腹腔內注射10%卵蛋白、氫氧化鋁混合液1ml，與兩側腰部各取1點，每次每點皮下注射0.5ml，使大鼠致敏。于第15天起，用40ml 3%的卵蛋白霧化吸入激發大鼠哮喘發作，其霧化流量為5ml/min，每次20min，隔日1次，共4周。激發成功標志為大鼠出現呼吸加快、口唇發紺、腹肌痙攣，點頭呼吸及站立不穩等表現。以生理鹽水代替卵蛋白對空白組進行腹腔注射及霧化吸入。

2.2 動物分組及給藥

適應性飼養后，將60只實驗大鼠隨機分為空白組、模型組、西藥地塞米組(簡稱0.5mg/kg/d)、抗支口服液高劑量組(40g/kg/d)、抗支口服液中劑量組(20g/kg/d)、抗支口服液低劑量組(100/kg/d)每組10只。對各組大鼠分別標號，組間平均體重差控制在＜20g，進行藥物灌胃干預實驗。各治療組均從第1次哮喘激發開始，每日灌胃給藥，直至處死前，連續4周，空白對照組用等量生理鹽水灌胃，每5天復查動物體質量。

2.3 標本采集 于末次給藥2h提取血標本，頸靜脈采血，靜置4h，然后以3 000r/min的轉速離心10min，取上層血清低溫放置備用。

2.4 統計學處理

應用統計軟件SPSS 17.0軟件進行t檢驗或方差分析，P＜0.05為有統計學意義。

2.4.1 抗支口服液對IgE的影響 結果見表1。

表1 給藥4周后各組IgE情況(±s)

表1 給藥4周后各組IgE情況(±s)

注:與模型組相比，＊＊P＜0.01;各劑量組與高劑量組比較，#P＜0.05。

組別 n IgE(Iu/ml)空白組 8 0.0230 ±0.0068＊＊模型組 8 0.0784 ±0.0114西藥組 8 0.0250 ±0.0095＊＊高劑量組 8 0.0256 ±0.0094＊＊中劑量組 8 0.0313 ±0.0113＊＊低劑量組 8 0.0367 ±0.0101＊＊#

實驗結果顯示，模型組與空白組相比，IgE含量極顯著增高(P＜0.01);與模型組相比，西藥及抗支口服液高、中、低治療組 IgE含量均極顯著降低(P＜0.01)。抗支口服液高、中劑量組與西藥組之間無顯著差異，低劑量組與西藥組有明顯差異。提示抗支口服液能明顯降低哮喘大鼠血清IgE含量，尤其是中、高劑量組。

灌胃劑量不同的各組間比較，高劑量組和低劑量組之間有顯著差異(P＜0.05)，而高劑量組與中劑量組之間無顯著差異(P＞0.05)。提示抗支口服液降低哮喘大鼠血清IgE的作用與劑量相關，高劑量組和中劑量組作用相當，明顯強于低劑量組。

2.4.2 抗支口服液對ECP的影響 結果見表2。

表2 給藥4周后各組ECP情況(±s)

表2 給藥4周后各組ECP情況(±s)

注:與模型組相比，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;各劑量組與低劑組比較，#P＜0.05。

組別 n ECP(ng/ml)空白組 8 34.13 ±6.85＊＊模型組 8 44.63 ±8.88西藥組 8 35.13 ±6.40＊＊高劑量組 8 35.63 ±7.33＊＊#中劑量組 8 36.00 ±8.86＊＊#低劑量組 8 42.00 ±7.50*

實驗結果顯示，模型組與空白組相比，ECP含量極顯著增高(P＜0.01);與模型組相比，除低劑量組外，西藥及抗支口服液高、中劑量組ECP含量均顯極顯著降低(P＜0.01)。抗支口服液高、中劑量組與西藥組之間無顯著差異。提示抗支口服ECP液能明顯降低哮喘大鼠血清ECP含量，尤其是中、高劑量組。

灌胃劑量不同的各組間比較，低劑量組無統計學治療意義。提示抗支口服液降低哮喘大鼠血清ECP作用與劑量相關，高劑量組和中劑量組作用相當，低劑量組無治療意義。

3 討論

哮喘是一種常見病、多發病，已成為全球性的社會衛生問題，對人類的健康構成了嚴重威脅。哮喘病的病理學改變以氣道內嗜酸性粒細胞浸潤為主，肥大細胞、淋巴細胞和巨噬細胞浸潤為輔的慢性氣道炎癥為基本特征，臨床上以氣道炎癥誘發的氣道高反應性和氣道通氣障礙為主要臨床特征。發病機制目前尚不完全明確，主要血清學特征是總IgE水平和特異性IgE水平增高。近年來，現代醫學對本病的病因、病機已深入到分子水平，免疫遺傳學認為，哮喘患者的氣道高反應性和氣道炎癥與受基因調控的血清總IgE和特異性IgE陽性率密切相關。

氣道的嗜酸性粒細胞浸潤是哮喘病的特征之一。越來越多的研究表明，嗜酸性粒細胞是一種特異性的抗原遞呈細胞，一切速發型變應性疾病的組織和器官的局部以及滲出液中均有大量的嗜酸性粒細胞出現，成為變應性疾病發作的一個重要指標，在已知嗜酸性粒細胞胞內有許多蛋白顆粒，其中最重要的為嗜酸性陽離子蛋白(ECP)，對支氣管哮喘的發作預后的判斷和藥物療效的評價有重要作用，它是嗜酸性粒細胞活化的一個指標［1］。歷代醫家對哮喘病因病機的認識多以痰論，痰液是津液代謝失常的病理產物，人體津液代謝主要涉及肺的輸布、脾的運化、腎的氣化功能的協調;外感六淫，飲食不當皆可導致臟腑功能失調，肺不能布散津液，脾不能運輸水谷精微，腎不能蒸化水液，都能導致津液凝聚成痰;痰既是病理產物又是內源性致病因素，痰飲伏肺病程纏綿，外邪引動伏痰則引起哮喘急性發作［2］。抗支口服液由麻黃、石膏、杏仁、黃芩、射干、僵蠶、地龍、炙百部、川貝母、桑白皮、虎杖、蘆根、甘草共13味組成。麻黃、石膏、蘆根清熱宣肺;杏仁、炙百部、川貝母化痰止咳;黃芩、射干、虎杖清熱解毒;僵蠶、地龍解熱平喘。諸藥合用，使肺熱邪毒以祛除，咳、喘、痰諸癥得以改善，是標本兼治之劑。

本實驗結果顯示，抗支口服液能明顯降低哮喘大鼠血清中IgE和ECP含量，中、高劑量組較低劑量組效果更明顯。由此可見，抗支口服液對實驗大鼠哮喘病具有較好的治療作用，為闡明抗支口服液治療哮喘病的機理提供了實驗依據。

［1］Venge P.Serum measurements of eosinophil cationic protein(ECP)in bronchia lasthma［J］.Clin Exp Allergy，1993，23(Supp12):3 －7.

［2］謝鳴.中醫方劑現代研究［M］.北京:學苑出版社，1997:63.