乳腺癌患者血清VEGF和P53的表達(dá)及臨床病理意義

韓桂蘭 李偉 尚培中 張華東

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，嚴(yán)重的影響了女性的生活質(zhì)量，同時(shí)也造成了一定程度的社會(huì)經(jīng)濟(jì)問題。因而，早期診斷、早期治療成為臨床和基礎(chǔ)研究的重點(diǎn)。如今，已有多種腫瘤標(biāo)志物用于乳腺癌檢測(cè)的研究，如 CA-742、CEA、CA153、CA199 等［1，2］，但特異性和敏感性不高。本研究通過檢測(cè)乳腺癌患者血清中VEGF、P53抗體表達(dá)水平，探討兩者在乳腺癌診療及預(yù)后判斷中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集尚義縣醫(yī)院乳腺癌70例，乳腺腺病組織標(biāo)本45例，乳腺癌患者年齡22～75歲，平均47歲，術(shù)前均未接受放化療及激素治療。乳腺癌組織中腫瘤直徑≤2 cm者9例，＞2 cm者61例;局部腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性21例，陽性49例。組織學(xué)分級(jí)：Ⅰ級(jí)15例，Ⅱ級(jí)35例，Ⅲ級(jí)20例。孕激素受體(PR)陽性35例，陰性35例;雌激素受體(ER)陽性30例，陰性40例;人表皮生長因子受體-2(HER-2)陽性32例，陰性38例。45例乳腺腺病患者年齡18～48歲，平均32歲。所有患者均無妊娠、感染、肝腎功能不全、代謝性疾病和心腦血管疾病等并發(fā)癥。

1.2 樣品的制備 取受試對(duì)象清晨空腹靜脈血2.0 ml，靜置后分離出清亮血清，置潔凈試管中，在-70℃低溫保存待測(cè)。分離時(shí)采用3 000 r/min，離心15 min。所有標(biāo)本采用深圳晶美生物公司提供的VEGF ELISA試劑盒和奧地利Bender公司提供的P53 ELISA試劑盒。操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，采用Bio-RAD680酶標(biāo)儀進(jìn)行比色定量分析。

1.3 結(jié)果判定 血清VEGF和P53抗體濃度的95%醫(yī)學(xué)參考值范圍分別為 ＜78.7 pg/ml和 ＜0.47 U/ml［3］，據(jù)此，本實(shí)驗(yàn)把血清VEGF＞78.7 pg/ml的病例定為陽性，反之為陰性;血清P53＞0.47 U/ml的病例定為陽性，反之為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患者血清VEGF和P53含量比較 乳腺腺病組患者血清VEGF、P53含量明顯低于乳腺癌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.01)。見表1。

表1 2組患者血清VEGF、P53含量比較±s

表1 2組患者血清VEGF、P53含量比較±s

P值 ＜0.01 ＜0.01

2.2 乳腺癌患者血清VEGF和P53抗體與臨床病理因素的關(guān)系 乳腺癌患者血清VEGF和P53抗體的表達(dá)與年齡、腫瘤直徑、組織學(xué)分級(jí)及HER-2的狀態(tài)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER及PR差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見表2。

表2 乳腺癌患者血清VEGF和P53抗體與臨床病理因素的關(guān)系例(%)

3 討論

VEGF主要由癌細(xì)胞產(chǎn)生，在腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移中起著重要作用，是目前公認(rèn)的最關(guān)鍵的促血管形成因子。不僅如此，它還能上調(diào)纖溶酶系統(tǒng)的表達(dá)，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生間質(zhì)膠原酶，蛋白水解酶和組織因子等，這更有利于腫瘤細(xì)胞脫落進(jìn)入脈管或向鄰近組織擴(kuò)散，為腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移創(chuàng)造條件［4］。本研究結(jié)果顯示，血清VEGF在乳腺腺病中的表達(dá)明顯低于乳腺癌中的表達(dá)，表明在惡性病變中VEGF呈過表達(dá)，一定程度上反應(yīng)了病情的狀態(tài)。與李菊梅等［5］研究結(jié)果相同。通過分析VEGF與乳腺癌臨床病理因素的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，血清VEGF的水平與患者年齡、腫瘤直徑、組織學(xué)分級(jí)及HER-2的狀態(tài)無關(guān)，而與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER及PR有關(guān)。這進(jìn)一步表明，受VEGF刺激生成的血管可以滿足腫瘤生長所需的營養(yǎng)，加強(qiáng)了腫瘤細(xì)胞遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的能力。有資料表明，VEGF是一種性激素反應(yīng)因子，異位內(nèi)膜中VEGF與ER均呈正相關(guān)，提示異位內(nèi)膜中VEGF可能與ER存在相互促進(jìn)的依存關(guān)系［6］。但在乳腺癌中VEGF與ER、PR之間的具體調(diào)節(jié)及誘導(dǎo)機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

P53基因定位于人染色體17P13.1，是一個(gè)腫瘤抑制基因，具有阻止不正常細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。然而，突變的P53基因不僅喪失了其抑癌的功能，而且還獲得了致癌性。研究發(fā)現(xiàn)P53抗體出現(xiàn)與P53蛋白異常以及P53基因突變有明顯相關(guān)性，因而可以相對(duì)簡單地由血清中P53抗體的狀態(tài)推測(cè)機(jī)體有無P53基因突變［7，8］。本研究結(jié)果表明，血清P53在乳腺腺病中的表達(dá)低于乳腺癌中的表達(dá)，顯示出癌癥患者血清中有高水平突變的P53，其水平越高越能表明患者的預(yù)后。在臨床病理因素中，血清P53的水平與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER及PR有關(guān)，而與其他因素?zé)o關(guān)。有文獻(xiàn)報(bào)道，突變的P53基因增強(qiáng)了蛋白激酶C對(duì)VEGF表達(dá)的誘導(dǎo)，兩者呈顯著的正相關(guān)，其相關(guān)性亦有非常顯著的意義，從而說明VEGF的表達(dá)可能受P53調(diào)控［9］。但VEGF不僅是促血管形成因子，而且又是性激素反應(yīng)因子，其這兩項(xiàng)功能也許使P53與ER、PR之間有某種聯(lián)系。文獻(xiàn)顯示，乳腺癌患者血循環(huán)中P53癌基因蛋白含量與癌組織ER、PR表達(dá)存在負(fù)相關(guān)，同時(shí)認(rèn)為P53陽性腫瘤對(duì)環(huán)磷酰胺、甲氨喋呤、氟尿嘧啶聯(lián)合化療有一定抵抗性，對(duì)含蒽環(huán)類藥的聯(lián)合化療卻敏感［10］。據(jù)此可知，P53不僅與乳腺癌患者的預(yù)后有關(guān)，還可指導(dǎo)臨床治療方案的選擇。

綜上所述，血清VEGF、P53在乳腺癌患者中呈高表達(dá)，且與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER及PR有關(guān)，因而，檢測(cè)兩者在一定程度上能反映患者的病情狀況，除此之外，還能為臨床的治療及方案的選擇提供有價(jià)值的幫助。

1 龍志華.血清CA72-4檢測(cè)在乳腺癌診斷中的臨床應(yīng)用.北方藥學(xué)，2011，8：67-68.

2 龔春芳.血清CA125、CA199、CEA及VEGF聯(lián)合檢測(cè)在卵巢癌診斷中的意義研究.中國當(dāng)代醫(yī)藥，2011，18：35-36.

3 唐懷民，黃根池.血清VEGF和p53抗體與非小細(xì)胞肺癌的相關(guān)性研究.實(shí)用心腦肺血管病雜志，2011，19：1469-1470.

4 宋亞輝，劉青云，張林.VEGF和p53蛋白在宮頸癌中的表達(dá).現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2010，10：313-315.

5 李菊梅，韓建軍，郭梅艷.VEGF和TNF-α在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義.河北醫(yī)藥，2009，31：2377-2378.

6 陳瓊?cè)A，曲軍英，邱娜璇，等.VEGF、ER、PR在異位和在位子宮內(nèi)膜中的表達(dá).廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2005，44：870-873.

7 Chang SC，Lin JK，Liang WY.Genetic alteration of P53，but not overexpression of intrtumoral P53 protein，or serum P53 antibody is a prognosis factor insporadic colorectal adenocarcinoma.International Journal of Oncology，2005，26：65-75.

8 Luts W，Nowakowska-Swirta E.Gene P53 mutation，proteinP53，and anti-P53 antibodies as biomarkers of cancers process.Int JOccup Med Evioren Health，2002，15：209-218.

9 朱穎蔚，成金羅，錢科卿，等.胃癌患者血清VEGF、P53的表達(dá)及意義.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2007，1：375-376.

10 瞿峰.乳腺癌組織中VEGF的表達(dá)與CD44v6、MMP-2的相關(guān)性研究.河北醫(yī)藥，2012，34：808-810.