城市生活污水處理廠活性污泥中細菌群落結構組成研究

王 猛，李如剛，肖毅宏，邢夢雅，雷雙舟，徐佳寧，徐 欣，趙大勇

（1.河海大學水文水資源學院，江蘇 南京210098；2.無錫錢惠污水處理有限公司，江蘇 無錫214151）

活性污泥是微生物群體及它們所依附的有機物質和無機物質的總稱，具有由多種細菌組成并通過胞外聚合物和離子橋作用形成的絮狀結構。細菌是活性污泥組成和凈化功能的核心，也是生物法處理工業和城市生活污水的主體[1，2］。了解活性污泥中細菌的群落結構組成及多樣性，使其中的微生物更好地發揮凈化作用，對于進一步提高污水處理效率具有重要意義。

細菌群落多樣性的傳統研究方法是分離培養、顯微鏡觀察，這類方法不足以從整體上掌握細菌群落結構組成以及多樣性信息。隨著分子生態學技術的發展，新興的分子生物學技術如變形梯度凝膠電泳（Denaturing gradient gel electrophoresis，DGGE）、末端限制性片段長度多態性（Terminal restriction fragment length polymorphism，T－RFLP）、克隆文庫等的出現逐漸彌補了這一缺陷[3］。

T－RFLP依據微生物的基因組學信息，選取一段具有系統進化標記特征的DNA序列為分析目標，應用熒光物質標記1個或1對引物的5′端。擴增后的PCR產物經限制性內切酶消化處理，熒光標記末端片段可被測序儀識別，得到不同長度的末端片段峰，根據片段峰的大小和數量就可以檢測和分析環境樣品中微生物的群落結構組成和動態變化等信息[4，5］。1997年，Liu等[6］首先應用 T－RFLP技術研究微生物多樣性。隨后，該技術快速發展，已成為研究環境微生物多樣性的重要手段之一，與其它指紋圖譜技術相比，TRFLP具有更高的靈敏度和重復性[7］。……