免疫檢測室內質控失控原因分析及處理對策

朱岷

酶聯免疫吸附試驗以其具有快速、簡便及易于自動化操作等特點,目前廣泛應用于臨床免疫實驗室樣本的檢測,為保證檢測的質量,通常在檢測過程中需同時進行室內質控以確保檢測結果的可靠性。實驗室室內質量控制是確保實驗室質量安全的重要保證,目前通常應用質控血清與檢測標本平行檢測,以分析實驗系統的精密度并鑒定其質量狀況。近年來,作者通過對河南省周口市中心血站實驗室室內質量控制情況進行回顧分析和總結,為建立科學合理的質控模式提供依據,現報告如下。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器 RSP150-BEPⅢ全自動酶免分析系統,HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA法),試劑盒由上海科華、珠海麗珠及法國伯樂試劑公司提供。質控品由衛生部臨檢中心提供并在有效期內使用。

1.2 質控品使用前的確認 新批號質控品購入后,使用前由質控科進行確認,以確保其質量有效性,其中陽性質控品各孔S/CO應＞1.0,S/CO均值一般應在2.0～5.0,各孔質控品檢測的S/CO值CV值≤15%。

1.3 質控圖的制作方法 采用Levey-Jennings質控圖法[1],每次進行樣本檢測前,從冰箱中取出質控血清并平衡至室溫,將質控血清與正常檢測標本同時檢測,實驗結束后將所得質控品檢測數據輸入計算機,在實驗室常規狀態下連續進行20次測定質控血清,計算出其標準差和均值,建立坐標軸,其中Y軸為質控血清測定值,刻度設定為(X±3S)范圍,X軸為測定次數。將20次質控血清測定值輸入計算機,經計算后得到室內質控框架圖,然后將本批每次試驗得到的質控品檢測數據輸入計算機。

1.4 判斷標準 試劑盒內陰、陽性對照檢測結果符合試劑盒要求,室內質控血清S/CO值≥1,同批號試劑室內質控品S/CO值在(X±3S)范圍表明試驗有效。如不符合以上標準,且檢測結果1次≥3S或2次≥2S均表示為失控。

2 結果

試劑因素是引起室內質控失控的主要原因,約占全部失控次數的48.46%,其主要原因為試劑受到污染,試劑的儲存、運輸過程不當致其失效。儀器引起的失控原因包括：①加樣器加樣不準。②加樣器吸入或排出過快致加入試劑量不準確。③洗板機注液速度過快,或洗板機洗板吸液位置過高,使液體殘留量較多。④酶標儀故障、比色結果不準確等。質控品因素引起的失控原因有：①質控品開啟時間過長或反復凍融使效價降低。②質控品保存不當造成污染。③質控品密封不好,水分揮發。④質控品批號不符或過期。⑤質控品使用不當,如使用前未充分混勻等。見表1。

表1 室內失控原因分析(n,%)

3 討論

室內質控是實驗室為保證臨床檢測質量而進行的檢測活動,ELISA法以具有快速、簡便及易于自動化操作等特點,目前廣泛應用于臨床免疫實驗室各類樣本的檢測。室內失控涉及檢測過程的各種環節,其室內質控的目的是為確保每份檢測標本的穩定性,并最大限度的防止假陽性或假陰性結果的出現。

在實驗室檢測過程中試劑、儀器、質控品及人為因素等是引起室內失控的主要原因。作者通過多年的實踐認為可采取諸多的方法來減少室內失控的發生,試劑處理方法：①添加或更換試劑時,應檢查其有效期,并注意試劑的批號與上一次檢測的試劑批號是否一致,如批號改變應進行校準,避免不同批號試劑混用。②試劑應嚴格按照要求保存,防止試劑有效期內發生變質,配制試劑時應使用符合質量要求的蒸餾水和容量器具,試劑槽內的試劑不宜過滿,防止試劑在轉動時濺出而致相互污染,同時實驗前應清洗或更換試劑槽,防止試劑被污染。儀器因素引起的失控原因及處理方法[2]：①嚴格按照標準規程操作及日常維護。②對于經維修或維護后的大型、關鍵設備,于使用前由質控給予確認,以保證其性能達到預期要求,計量的儀器經維護后,使用前應校準后方能用于實驗。③電壓不穩、光源燈老化、濾光片不潔均可引起測定結果的誤差。④加強實驗室人員工作責任心及提高其業務素質。質控品處理方法：①在每次實驗前應逐一檢查各種質控品的規格、種類、批號、外觀和效期等,防止不符合要求的質控品使用。②質控品不能反復凍融,質控品融解后應置于2～8℃環境保存,溶解后應于一周內使用完畢,防止反復打開瓶蓋致質控品的污染。③干粉類質控品應輕開瓶蓋,避免質控粉粒的噴出,在加入蒸餾水后配制后應放置0.5 h,使質控品完全溶解[3]。

綜上所述,在臨床實驗室檢測過程中,每個環節均可影響實驗結果的質量,只有實驗室每個員工都能做到認真對待,并細致耐心的做好方方面面的工作,嚴格執行標準操作規程,對每天的檢測結果認真進行分析,對失控的實驗應組織全科室人員集體參與討論、分析和查找原因,杜絕類似問題的再次發生。

[1] 王治國.臨床檢驗質量控制技術.第2版.北京：人民衛生出版社,2008:69-70.

[2] 丁海明,潘婉儀.ELISA法定性實驗室內質控方法探討.現代檢驗醫學雜志,2011,26(3):159-161.

[3] 余妙嫦.HBsAg檢測室內失控失控原因及處理.中國醫學文摘.檢驗與臨床,2008,22(1):2-3.