多藥耐藥因子在胃癌中表達的相關性及其臨床意義

蔡麗芳,肖琳琳,吳 寧,胡 宇,黃偉明

(福建省莆田市第一醫院腫瘤內科,福建莆田,351100)

胃癌是中國消化系統常見的惡性腫瘤,死亡率高居各種惡性腫瘤的第2位[1]。近年輔助化療能提高胃癌術后生存,是胃癌綜合治療的重要手段之一,但總體療效并不理想[2-3]。多藥耐藥(MDR)現象是導致胃癌化療失敗的直接原因[4]。由于MDR的發生機制極為復雜,存在眾多的難點和疑點,因此,解決腫瘤的多藥耐藥問題就益發迫切。MDR相關蛋白是腫瘤耐藥研究的一大進展,這些蛋白與胃癌生物學行為、化療敏感性和評估預后有著緊密的聯系。因此,本研究探討了多藥耐藥因子在胃癌中表達的相關性及其臨床意義,現報告如下。

1 臨床資料

收集2005年6月—2011年6月在本院行手術治療的64例胃癌患者的切除標本,其中男42例,女22例,年齡40～68歲。按組織學分級:高分化6例,中分化28例,低分化27例,未分化4例。TNM分期:Ⅰ期3例,Ⅱ期21例,Ⅲ32例,Ⅳ期8例。按病灶直徑:<5 cm 33例,>5 cm 31例,淋巴結轉移情況:陽性38例,陰性26例。納入標準:實驗所用蠟塊標本取自本院病理科,均經術后病理及胃鏡病理確診胃癌;術前均未進行放療、化療或其他針對腫瘤的治療。

將胃癌標本固定、包埋、蘇木精-伊紅染色(HE)染色、病理分類。采用鏈酶抗生物素蛋白-過氧化物酶免疫組織化學法(SP法)檢測P-糖蛋白(P-gp)、p53、谷胱甘肽 S 轉移酶-π(GST-π)。由2位病理醫師分別雙盲閱片并記錄,每張切片隨機取5個400倍視野,每視野計數100個細胞,取平均值。P-gp和GST-π以細胞膜或細胞質染棕黃色為陽性,p53以細胞核染為棕黑色為陽性,陽性細胞>30%為陽性,以癌旁黏膜為陰性對照。

結果見表1、2。

表1 P-gp、p53、GST表達與胃癌病理因素之間的關系[n(%)]

表2 P-gp、p53和GST-表達與胃癌2年無病生存時間的關系[n(%)]

3 討 論

化療具有清除術后殘余腫瘤細胞、預防腫瘤復發和轉移的作用。國外統計資料表明[5],90%腫瘤患者的死亡不同程度受到耐藥的影響。胃癌是耐藥性較強的惡性腫瘤,目前其化療有效率不足50%[6]。腫瘤細胞一旦對某種化療藥物產生了耐藥作用,即可對其他結構、細胞靶點、作用機制的抗癌藥物也產生耐藥性,這一現象稱為MDR。

P-gp是由位于7q21d的MDR-1基因編碼的產物,分子量 170 kD,故稱為 P170糖蛋白。P-gp跨膜結構可形成藥物通道,具有“藥泵”作用,依靠三磷酸腺苷(ATP)釋放能量,逆濃度梯度泵出細胞外,降低細胞內藥物濃度,從而使化療藥物的細胞毒作用減少甚至消失,誘發MDR發生。本研究中,胃癌組織 P-gp表達率為 75.0%,與 Hu等[7]的研究結果基本一致。P-gp高表達的腫瘤對長春新堿、長春花堿、阿霉素等生物堿類高度耐藥,可見本組病例可能對上述抗腫瘤藥存在不同程度的耐藥。Shi等[8]的研究表明,P-gp高表達與淋巴結轉移呈正相關,MDR與腫瘤轉移關系密切,推測腫瘤細胞在轉移過程中發生細胞黏附和產生多藥耐藥現象可能有某種共同的途徑。關云艷等[5]的研究證實,P-gp在向細胞外泵出藥物時,能夠促進腫瘤細胞游走、著床,上調金屬蛋白酶的數量和活性,增加CD44的表達,共用提高腫瘤侵襲能力及耐藥性。本研究顯示,P-gp高表達與淋巴結轉移有相關性,提示胃癌P-gp高表達容易發生淋巴結轉移,預后差[9]。

p53是一段16～20 kb的DNA,分子量約53 kDa,故命名為p53,分為野生型和突變型兩種。野生型p53控制細胞周期和誘導凋亡,但半衰期較短,組織含量低,因此臨床能夠檢測的均為突變型p53。突變型p53失去抑制細胞增殖和誘導凋亡作用,促進腫瘤發生、發展。p53基因突變可發生在胃癌的早期,即居于腸化生階段的癌前病變過程中,有助于胃癌的早期診斷[10]。突變型p53能夠增強MDR基因表達,介導大量P-gp表達,增加腫瘤耐藥性[11]。本研究顯示,p53蛋白與P-gp呈正相關,兩者存在協同關系,同時與預后顯著相關,與Oliver等[12]的研究結果一致。p53蛋白表達與病灶大小關系尚無統一說法,Tzanakis等[13]認為,p53蛋白高表達與大病灶密切相關,而本研究未發現p53蛋白表達與病灶大小相關。本研究胃癌組織中p53高表達與淋巴結轉移、TNM分期存在相關性,說明突變型p53對癌細胞增殖抑制減弱,促進腫瘤細胞轉移,是胃癌惡性程度高的標志。

GST-π是一組具有解毒和結合蛋白功能的同工酶家族,分為 α、β、γ、π、μ、θ及膜結合微粒體 。GST-π是由GST-π超基因家族編碼基因的相應蛋白,目前認為與MDR關系最密切。其表達在許多癌前病變、癌組織及癌細胞系中高表達并參與MDR的形成。通過催化谷胱甘肽與親電物質相結合,本身也可與親脂性細胞毒性物質結合形成GS-X,增加其水溶性,將抗腫瘤藥物如阿霉素、環磷酰胺及順鉑等烷化劑類藥物,從尿液中排出或代謝為無毒性醇類物質,從而保護癌細胞;還可促進DNA修復,導致MDR發生[14]。Shi等[8]研究證實,GST-π表達與病理分化程度密切相關。本研究中低分化胃癌中GST-π表達率顯著低于高中分化者,提示高中分化者比低分化者更容易產生耐藥,符合臨床上高中分化胃癌對化療有效率較低,而分化差的神經內分泌癌、印戒細胞癌等對化療敏感現象[15]。本研究未發現GST-π表達與2年DFS的相關性,可能與本選取的標本數量不足或多數為中晚期有關。

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