胚胎肝干細胞治療失代償期肝硬化臨床療效觀察

陸長春，藺詠梅，韓 潔，丁敏俠 (.陜西省漢中市漢中30醫院感染性疾病科，陜西 漢中 73000;.陜西省漢中市漢中30醫院功能科，陜西 漢中 73000)

胚胎干細胞來源于早期胚胎，具有多向分化潛能，可以在體內或體外分化為多種組織細胞［1］。已有試驗證實人胚胎干細胞經過分階段培養，最終可以分化為具備肝細胞功能的細胞。故肝干細胞為終末期肝病的治療提供了一種全新的治療手段［2］。我科自2011年開始運用保守治療聯合胚胎肝干細胞經脾動脈、肝動脈介入移植術的方法，對22例失代償期肝硬化患者進行治療觀察，有效地緩解了患者的臨床癥狀，改善了預后。取得較好臨床療效，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:病例來源于2011年10月～2013年5月我院的住院患者，共48例。采用隨機、平行對照臨床實驗設計方案，分為對照組26例和治療組22例。對照組中男18例，女8例，年齡24～69歲，平均(48±12.1)歲。治療組中男15例，女7例，年齡23～70歲，平均(46±11.5)歲;對兩組患者的一般臨床資料進行統計分析，兩組患者性別、年齡、發病原因、病輕重程度等方面差異無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 病例納入標準:失代償期肝硬化診斷依據參照中華醫學會肝臟病學分會脂肪肝和乙醇性肝病學組推薦的診斷標準。

1.3 方法:兩組均給予保肝、降門脈壓、抗纖維化、維持水電解質平衡、抗感染等對癥處理，少數病例根據病情、病毒定量采用抗病毒治療，并依據腹水量予行利尿、腹水超濾濃縮回輸等治療。用藥劑量、途徑及療程均相同。治療組在此基礎上加用胚胎肝干細胞注射液(吉林拓華生物有限公司)，細胞數量1.0×108，4例聯合多能干細胞，細胞數量0.5×108/L，細胞活率均＞98%。經由介入方式移植(1/3量)入脾臟(2/3量)及肝臟，1次/4周，共計3次，療程均為24周。

1.4 觀察指標:①癥狀和體征:包括乏力、消化道癥狀，肝區疼痛、黃疸、肝脾腫大及治療前后變化;②肝功能:膽紅素(SB)、ALT、AST、GGT、ALP、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB);③Child－Pugh觀測指標:膽紅素、白蛋白、腹水、肝性腦病及凝血酶原時間。治療期間注意觀察并記錄患者有無不良反應。

1.5 療效評定標準:①顯效:療程結束臨床癥狀完全消失或明顯改善，肝脾腫大回縮，腹水完全消失，PT延長＜3 s，TB、ALT、AST、GGT降至正常范圍，A/G正常或基本正常，Child－Pugh評分分值下降＞3分;②有效:臨床癥狀好轉，肝脾腫大無明顯變化，腹水大部分消失，PT延長＜6 s，肝功能指標較治療前下降達＞30%，并低丁正常上限值2倍以下，Child－Pugh評分分值下降＜3分;③無效:癥狀體征無改善、PT延長＞6 s，肝功能指標改善不明顯或病情加重，Child－Pugh評分分值無下降或增加。顯效率+有效率=總有效率。

2 結果

2.1 兩組療效比較:療程結束時，兩組資料均完整。兩組療效比較，治療組明顯優于對照組(P＜0.05)。治療組總有效率為86.4%，對照組為73%，兩組比較差異無統計學意義(P＞0.05)。但治療組顯效率13.6%，明顯高于對照組的0%(P＜0.01)，結果見表1。兩組治療后Child－Pugh積分均較治療前明顯下降(P＜0.01)，治療組下降幅度明顯優于對照組(P＜0.05)。

表1 兩組臨床有效率比較［例(%)］

2.2 兩組病例治療前后肝功能改變:治療前與治療后24周肝功能有顯著變化，兩組 ALT、AST、ALB、TB、ALP、GGT 復常率基本相似，詳見表2。

表2 治療組和對照組肝功能及Child－Pugh評分分析結果()

表2 治療組和對照組肝功能及Child－Pugh評分分析結果()

注:t1、P1表示治療組與對照組治療后比較t值、P值

組別 治療前后評分對照組(n=26) 治療前 97.5 ±78.1100.1 ±98.2.110.2 ±78 68.4 ±10.1 24肝功能指標TB(μmol/L )ALT(IU/L )AST(IU/L) TP(g/L) Alb(g/L ) ALP(IU/L)GGT(IU/L) CTP±7.1 101 ±80.6.100.1 ±78.1. 8.3 ±4.7治療后 36.2 ±14.2 52 ±25.7 42.5 ±28.7 72.6 ±4.3 28 ±4.5 81 ±47.3 71.5 ±55.3 6.2 ±2.5治療組(n=22) 治療前 96.2 ±81.2 110.3 ±88.9 121 ±81.1 67.5 ±8.8 23.1 ±7.5 108 ±78.4 102 ±52.1 8.5 ±3.1治療后 21 ±13.4 31 ±13.3 41.9 ±22.4 70.3 ±11.9 28 ±7.2 78 ±42.3 61 ±53.2 5.6 ±2.3 t1 值 3.12 3.12 2.54 2.56 3.21 2.5 2.51 3.18 p1值0.01 0.01 0.05 0.05 0.01 0.08 0.08 0.01

2.3 臨床癥狀:治療24周后患者臨床癥狀有一定改善，應用生活質量的評估(應用SF36的評分方式)，治療組生活質量明顯改善(P＜0.01)。

2.4 安全性檢測:治療組患者接受胚胎肝干細胞治療期間1例出現股動脈介入穿刺處局部血腫，1例出現移植后發熱，皮疹，經積極處理后癥狀均緩解。治療前、后檢測患者血常規、心電圖、AFP定量、肝腎功能、上腹部CT等指標均未發現與治療有關的異常改變。

3 討論

干細胞研究近年來已成為生物醫學領域研究的熱點之一，肝干細胞是一種具有雙向分化(向肝細胞和膽管細胞)和自我更新能力的細胞，不僅參與肝臟損傷的修復與重建，而且不斷分化為具有功能的成熟肝細胞，為肝細胞移植和生物型人工肝提供了重要的細胞來源［3］。目前利用肝移植及肝干細胞移植治療各種終末期肝病被認為是最有效的方法。而肝細胞移植可以作為原位肝移的有效替代治療方法來治療各種終末期肝病，有資料顯示已獲得得了一定的臨床療效。然而囿于肝干細胞獲得效率低下、肝干細胞潛在的癌變風險以及亟待解決的問題如:移植時機、移植數量、移植后肝內定位跟蹤、移植費用等諸多問題［4］，目前肝干細胞移植治療終末期肝病臨床應用較少。筆者嘗試運用胚胎肝干細胞介入移植至肝臟治療失代償期肝硬化患者，旨在評估胚胎肝干細胞移植治療的臨床療效及其安全性，希冀從中獲得有益的啟示。

治療結果顯示:采用胚胎肝干細胞治療組總體療效優于對照組。其中顯效率病例3例(13.6%)，明顯大于對照組0例(0%);兩組總療效比較，治療組總有效率86.4%，明顯高于對照組的73%(P＜0.01);兩組治療后Child－Pugh積分均較治療前明顯下降(P＜0.01)，治療組下降幅度明顯優于對照組(P＜0.05)。在安全性方面:治療組在胚胎肝干細胞移植術后180 d，跟蹤AFP定量、肝臟影像學均未發現明顯癌變跡象。并且無明顯嚴重不良反應，均能耐受。故綜合考慮胚胎肝干細胞移植在治療失代償期肝硬化方面，已顯示短期臨床療效好，安全性可控。但因時間問題遠期療效及其安全性尚不得而知。總之，胚胎肝干細胞移植治療失代償期肝硬化不失為一個全新的治療方法，相信隨著對肝干細胞研究的進一步深入，治療各種終末期肝病所面臨的諸多問題將得到有效解決。

［1］高 強.肝干細胞的研究進展［J］.實用肝臟病雜志，2008，11(2):124.

［2］鄭進芳，吳昌雄，等.胚胎肝細胞移植治療小鼠肝纖維化［J］.中華試驗外科雜志，2008，25(3):237.

［3］吳 燕.肝干細胞分析研究進展［J］.微生物免疫學進展，2010，8(2):82.

［4］錢 波，蔡寒青，馮 潔.干細胞、腫瘤干細胞與腫瘤發生［J］.世界華人消化雜志，2007，15(13):1526.