細胞因子誘導殺傷細胞治療中晚期食管癌的療效觀察

汪治宇 劉榮鳳 曹春曉 王麗斌 王聰敏 (河北醫科大學第四醫院，河北 石家莊 0500)

過繼免疫治療對于晚期腫瘤是一種安全、可行的治療方法〔1〕。細胞因子誘導殺傷(CIK)細胞是一種新型的免疫活性細胞，它是將人外周血單個核細胞在體外用多種細胞因子共同培養一段時間后獲得的一群異質細胞，兼具有T淋巴細胞強大的抗瘤活性和自然殺傷(NK)細胞的非主要組織相容性復合體(MHC)限制性殺瘤優點，被認為是新一代抗腫瘤過繼細胞免疫治療的首選方案，其在臨床上被應用于多種腫瘤治療〔2〕。本科對36例中晚期食管癌患者進行CIK細胞免疫治療后，進行臨床療效評估，并監測患者免疫功能及生活質量變化，同時對治療過程中的護理體會總結如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 生物治療科2010年10月至2011年10月間行CIK細胞免疫治療的36例中晚期食管癌患者，年齡35～76(平均51.3)歲，男19例，女17例，鱗癌21例，腺癌11例，未分化癌4例，Ⅲ期20例，Ⅳ期16例。

1.2 CIK細胞制備 抽取自體外周血50 ml，分離并收集單核細胞后在無菌室進行CIK細胞的制備。首先對收集到的單核細胞在無菌條件下進行培養和誘導、增殖，使其成為成熟的CIK細胞，周期一般為10 d左右;然后將培養成熟的CIK細胞懸液在冷藏條件下由專人送至病房，由護士通過靜脈通路回輸給患者，同時輸注白細胞介素Ⅱ100萬單位。每次輸注細胞數約1×1010/L，1次∕隔日，共輸注3次，間隔1個月進行下一療程，共4療程。

1.3 評價指標 (1)可測量病灶療效：參照實體腫瘤的療效評價標準1.1版評定。完全緩解(CR)：所有靶病灶消失，全部病理淋巴結(包括靶結節和非靶結節)短直徑必須減少至＜10 mm。部分緩解(PR)：靶病灶直徑之和比基線水平減少至少30%。疾病進展(PD)：以整個實驗研究過程中所有測量的靶病灶直徑之和的最小值為參照，直徑和相對增加至少20%;除此之外，必須滿足直徑和的絕對值增加至少5 mm(出現一個或多個新病灶也視為疾病進展)。疾病穩定(SD)：靶病灶減小的程度沒達到PR，增加的程度也沒達到PD水平，介于兩者之間，研究時可以直徑之和的最小值作為參考。CR+PR統計客觀緩解率。(2)生活質量的改善：采用國際通用的卡氏評分〔3〕評價。(3)免疫功能檢測：抽靜脈血3 ml進行SAP法檢測，分別計數300個細胞中CD4+、CD8+T細胞、NK細胞數目，求出百分率及計算CD4+/CD8+比值。(4)安全性及不良反應評價：安全性按照WHO抗腫瘤藥急性及亞急性毒性反應分級標準〔3〕。觀察患者發熱、皮疹、嘔吐、腹瀉等不良反應發生。

1.4 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件，計量資料先進行正態性檢驗，對符合正態分布的數據，采用兩獨立樣本t檢驗。對非正態分布的數據，采用Mann-Whitney U檢驗。

2 結果

2.1 CIK細胞治療后的療效 36例患者中PR 16例，SD13例，PD7例，客觀緩解率為44.4%，臨床獲益率為80.6%。

2.2 治療后免疫功能的變化 見表1。經過CIK細胞免疫治療后 CD4+、CD8+、NK、CD4+/CD8+細胞比例明顯改善(P＜0.05)。

表1 CIK細胞治療前后免疫功能的變化( s ，n=36)

表1 CIK細胞治療前后免疫功能的變化( s ，n=36)

與治療前比較：1)P＜0.05

CD4+ CD8+ NK CD4+/CD8+治療前28.31±2.62 36.72±3.11 22.76±2.51 0.82±0.04治療后 37.14±4.201)19.82±1.551)38.63±3.861)1.38±0.171)

2.3 生活質量的改善 36例患者中，KPS評分增加≥10分為24例(66.7%)，10例評分無變化，但食欲及睡眠均有改善。2例評分下降10分。

2.4 安全性和不良反應 5例出現體溫升高(37.5～38.5℃)，發熱率為14%(5/36)。4例給予物理降溫后自行緩解。1例經退熱栓一枚納肛后緩解。1例出現皮疹，涂抹派瑞松軟膏后消失。

3 討論

CIK細胞是一種新型、高效的具有廣譜殺腫瘤活性細胞。CIK細胞可通過三種途徑發揮殺瘤、溶瘤作用：①在體內受某些淋巴因子作用后，CIK細胞大量釋放具有細胞毒性的胞質顆粒到胞外，這些顆粒直接破壞瘤細胞;②進入體內活化的CIK細胞可分泌多種細胞因子如干擾素、腫瘤壞死因子和白細胞介素-2等，不僅對腫瘤細胞有直接抑制作用，而且還可通過調節免疫系統間接殺傷瘤細胞;③CIK細胞表達Fas可誘導腫瘤細胞凋亡，但CIK細胞由于有抗凋亡基因表達，因此在體內能抵抗Fas陽性腫瘤細胞對的反作用，故能對腫瘤細胞發揮持久的溶瘤作用〔4，5〕。更重要的是，CIK細胞療法對人體正常細胞、機體免疫系統沒有任何傷害，是一種安全可靠、副作用小的腫瘤治療方法。因此，本研究對于無法行手術、晚期和高齡晚期食管癌患者給予CIK細胞治療，觀察療效及治療前后免疫功能、生活質量、不良反應等的變化。本研究結果可見，CIK細胞單獨應用對晚期食管癌有較好的療效，并且可以提高患者的生活質量。

機體的抗腫瘤免疫以細胞免疫為主，特別是T淋巴細胞，其細胞表面不同分化抗原(CD抗原)是反應免疫功能的重要標志，并隨疾病轉歸而發生變化。外周血中，CD4+代表具有殺傷作用的T細胞，CD8+代表具有抑制作用的 T細胞，CD4+/CD8+反映機體免疫功能紊亂的敏感指標，只有在正常的比例時才能發揮正常的抗腫瘤作用，比值降低，說明機體存在免疫抑制和免疫調節紊亂。本研究中CIK細胞治療后，NK細胞對腫瘤細胞有自然殺傷作用。在CIK細胞治療過程中，耐心地宣教、精心全面的護理、規范的操作對保證治療的順利進行至關重要，也有利于提高治療效果。因此醫護人員不但要加強業務知識學習，還應加強對相關學科的學習，如預防醫學、社會學、教育學、健康心理學、健康行為學等。良好的專業素質，豐富的相關學科知識，加之護理人員的實踐經驗，將有效地提高整體醫療、護理水平，為患者帶來更大的獲益。

1 Weng DS，Zhou J，Zhou QM，et al.Minimally invasive treatment combined with cytokine induced killer cells therapy lower the short-term re-currence rates of hepatocellular carcinomas〔J〕.J Immunother，2008;31(1)：63-71.

2 秦 莉.CIK細胞的體外培養與細胞毒作用〔J〕.醫學分子生物學雜志，2007;4(1)：82-5.

3 周際昌.實用腫瘤內科學〔M〕.北京：人民衛生出版社，2003：28-48.

4 Hongeng S，Petvises S，Worapongpaiboon S，et al.Generation of CD3+CD56+cytokine-induced killer cells and their in vitro cytotoxicity against pediatric cancer cells〔J〕.Int J Hematol，2003;77(2)：175-9.

5 胡禮儀，張有順，周 新，等.CIK細胞的誘導及對肝癌細胞毒作用的體外研究〔J〕. 中國醫師雜志，2005;7(5)：604-6.