透明質酸凝膠預防大白兔術后腹膜粘連

姚霽航 姚永華 安蓮華 杜曉宏 (吉林大學白求恩醫學院醫療系，吉林 長春 300)

腹膜粘連是外科手術后較為常見的并發癥〔1〕，可能導致腹部疼痛、腹脹、肛門停止排氣、排便等癥狀的發生〔2〕。如何預防和減少術后腹膜粘連已成為當今醫學科技工作者迫切需要解決的問題。本實驗將我們與中國科學院長春應用化學研究所聯合開發的透明質酸凝膠應用于粘連動物模型體內，旨在探討透明質酸凝膠預防術后腹膜粘連的有效性及可行性。

1 資料與方法

1.1 實驗動物 大白兔60只，購自吉林大學白求恩醫學院動物中心，體重(2.3±0.2)kg，雌雄不拘，隨機將其分為A、B兩組，每組30只。

1.2 實驗方法 全部大白兔均采用3%戊巴比妥鈉1 ml/kg耳緣靜脈注射麻醉。麻醉穩妥后，仰臥手術臺上，消毒、鋪洞巾后，取下腹正中6 cm切口，長約6 cm，入腹后提出盲腸，在距盲腸20 cm的回腸末端用手術刀片剝離回腸漿膜面達15.0 cm×0.6 cm，至漿膜有微小出血點為止。A組、B組創面分別以注射器置入生理鹽水和透明質酸凝膠各10 ml，關腹。術后分籠飼養，禁食15 h，術后5 d各組分別處死2只大白兔，直視下觀察腹腔粘連情況，同時分別取創面剖位2 cm腸管組織，石蠟包埋后制片，光鏡下觀察，術后14 d各組處死余下的大白兔。

1.3 結果評價 參照胡建敏等〔3〕的分級法，將腹腔內粘連程度分為5級：0級，無粘連;Ⅰ級，僅有疏松少量輕微的粘連帶，易分離，回腸漿膜大部分已修復;Ⅱ級，粘連較Ⅰ級略密，回腸漿膜修復50%左右;Ⅲ級，粘連略成團或與其他臟器廣泛粘連，但無腸梗阻;Ⅳ級，粘連廣泛致密，有腸梗阻，近端腸管高度擴張。

1.4 統計學方法 采用SAS9.0統計軟件進行統計分析，組間比較采用χ2檢驗。

2 結果

術后5 d，B組大白兔有1只無明顯粘連，另一只腸間只有少許膜性纖維粘連，光鏡下觀察B組腸壁纖維細胞略有增生，膠原纖維排列較為疏松;A組有1只腸壁粘連、分離時易滲血，另1只局部粘連成團狀，且局部與其他臟器粘連，光鏡下觀察A組腸壁纖維細胞增生較明顯，膠原纖維致密排列。

術后第8、9天，A組有兩只大白兔死亡，剖腹后檢查見死于較窄性腸梗阻、腸管壞死、感染性休克，粘連級別為Ⅳ級。術后14 d處死兩組余下的大白兔，發現A組粘連發生率為92.9%，B組粘連發生率為68.6%，差異有統計學意義(P＜0.01);B組粘連分級較A組明顯降低，A組以Ⅲ級粘連為主，且有5只Ⅳ級粘連，B組以Ⅰ～Ⅱ粘連為主，且無Ⅳ級粘連，故從粘連分級上B組較A組明顯減輕，差異有統計學意義(χ2=11.463 5，P ＜0.01)。見表1。

表1 術后14 d各組大白兔腹腔內粘連分級情況(n)

3 討論

腹部手術后腸粘連癥狀比較常見，且有時反復發生，更有甚者出現腹部劇痛、肛門停止排氣、排便等腸梗阻癥狀，給患者帶來巨大痛苦，目前尚無確切的防治辦法〔4〕，形成腹膜粘連有一個重要因素，即在病理條件下，腹膜兩處或更多處漿膜面的有效接觸。因此，局部應用屏障物質預防術后腹膜粘連便可能成為一種行之有效的方法。此法的實施成功與否，關鍵在于隔離物質要有多種良好的性能，即具有良好的生物相容性，在體內可安全降解且較易人工控制降解的速度，無毒、副作用等。基于此要求，我們與中國科學院長春應用化學研究所共同研制了液態高分子材料透明質酸凝膠。

透明質酸是一種由N-乙酰葡萄糖醛酸反復交替形成的高分子多糖，1934年美國眼科教授Meyer等首先從牛眼玻璃體中分離出該物質。透明質酸以其獨特的分子結構和理化性質在機體內顯示出多種重要的生理功能，如潤滑關節調節血管壁的通透性、調節蛋白質、預防粘連等。透明質酸廣泛分布于人體各部位，在透明質酸豐富的環境中，粘連不易形成。隨著年齡的增長，人體合成透明質酸的能力逐漸下降。但其高分子生物材料已被生物醫學研究所合成，且應用于術后組織粘連的預防，其機制為：(1)透明質酸可在腹膜等組織創面修復中隔開組織表面，防止粘連和纖維組織形成;(2)透明質酸能抑制粒性白細胞遷移和吞噬作用，且對血小板的沉積有抑制作用〔5〕。醫用透明質酸有預防術后腹膜粘連的作用。但本研究顯示，透明質酸在體內吸收較快，說明抗粘連效果仍有限〔6〕。

我們將透明質酸制成凝膠生物材料，具有高度的黏彈性、可塑性以及良好的生物相容性，在預防粘連方面有明顯的作用〔7〕。透明質酸凝膠有高度的黏彈性、可塑性、可壓性，將腸管和腹膜隔開，減少組織粘連。而且，我們在實驗中發現其在大白兔體內降解吸收的時間為6 d左右，與術后腹膜粘連形成的時間相差不多。結果顯示，透明質酸凝膠預防術后腹膜粘連的作用明顯優于生理鹽水，且無明顯不良反應。因此，透明質酸凝膠可有效預防術后腹膜粘連的發生。

1 趙玉洲，韓廣森，任瑩坤，等.腹部二次手術經原切口兩種手術入路的對照研究〔J〕.中華實驗外科雜志，2011;28(9)：1577-80.

2 Harris DA，Topley N.Peritoneal adhesions〔J〕.Br J Surg，2008;95(2)：271-2.

3 胡建敏，黃紹賢，侯忠民，等.人體脂肪，alpha-糜蛋白酶聯合腹腔灌注預防黏連的實驗及臨床研究〔J〕.中華實驗外科雜志，1989;6(3)：101.

4 張偉健，王 輝，李鎮偉，等.醫用透明質酸鈉防止腹部手術腸黏連的效果〔J〕. 廣東醫學，2007;28(6)：990-2.

5 Zhou J，E1son C，Lee TD.Reduction in postoperative adhesion formation and reformation after an abdominal operation with the use of No-carboxymethyl chilosan Nova scotia〔J〕.Canada Surg，2004;135(3)：307-12.

6 劉國輝，于金海，王玉梅，等.羧甲基纖維素透明質酸鈉預防術后腹膜黏連的實驗研究〔J〕.中華胃腸外科，2011;13(11)：855-6.

7 趙永紅，徐 穎.透明質酸鈉凝膠剖預防宮產后宮腔黏連的臨床應用〔J〕.中國組織工程研究與臨床康復，2011;15(12)：2217-30.